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高架プラス迷路外因性ケト原性サプリメントの抗不安薬の効果を調べるためのソフトウェアを追跡するビデオと組み合わせてテスト
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Summary January 7th, 2019
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ここでは、齧歯類の動物モデルの不安レベルの変化を調査するためのプロトコルを提案する.高架式十字迷路 (EPM) テスト、追跡ソフトウェア、ビデオと併用は前臨床研究所では様々 な潜在的な抗不安薬治療の効果を文書化する信頼性の高い方法を提供します。
Transcript
上昇プラス迷路は、他の方法と比較してより人道的な方法で実験室げっ歯類モデルに対する様々な潜在的に無神経な治療の効果を文書化する方法です。この方法の主な利点は、高さの未調整の恐怖とオープンスペースの回避に加えて、暗い空間と閉じた空間の両方にげっ歯類の本能的なプロクティビティに依存していることです。私の研究室の協力者であるコリン・パークは、この手順のデモンストレーションを手伝います。
テストの数日前に、彼らの胴体でそれらを選び、実験者にそれらを順応させるために1分間保持することによって、動物を処理します。次に、処置を開始する前に動物の体重を測定し、治療のための投薬量計算を決定する。次に、ケトン補充前5日間、ガビンによる水を用いて胃内ガバジ法に動物を馴染む。
不安アッセイのために、上昇プラス迷路またはEPM装置、2つの開いた2つの開いた2つの腕を持つプラス状の装置を使用する。直接照明するのではなく、天井から間接照明を使用してEPM装置を点灯します。4 本のアームがすべて同様に照らされていることを確認します。
移動追跡ソフトウェアのインストールキーをUSB 2.0ポートに接続し、ソフトウェアをインストールします。次に、実験領域の上にカメラを固定し、実験の間、不動のままであることを確認します。最後に、取扱説明書を使用して、移動追跡ソフトウェアシステムに新しい実験を設定します。
実験領域に動物を配置します。次に、コントロールパネルのタイムボタンを押してデータ収集処理を開始します。テストルームでは、EPMデータを手動で、ソフトウェアを使用して、2つの方法で収集します。
目の見えない観察者はカーテンで区切られます。トラッキングプロセスの記録のeneまで待つか、時間コントロールパネルの停止ボタンを押してください。次いで、実験領域から動物を除去する。
最後に、解析ツールにアクセスして、実験アシスタントバーの解析ボタンを押します。分析してレポートを生成する試行と時間間隔を選択します。まず、実験を開始する30分前に、自宅のケージ内のラットを実験室に移すことから始めます。
実験者の反対側の開いた腕に面したEPMの4本の腕の交点にラットを置く。ビデオトラッキングソフトウェアを実行し、手動で5分間動物の行動を記録します。その後、動物がEPMから落ちた場合は、それを拾って、それが落ちたEPMの同じポイントに戻します。
この動物の行動データを解析から除外します。5 分間のテストの最後に、ビデオ トラッキング ソフトウェアを停止します。EPMから動物を取り出し、ホームケージに戻します。
最後に、消毒洗剤と水道水でEPMを洗浄します。ペーパータオルで装置を乾かします。慢性摂食後、KSMCT群のラットは対照群と比較して、オープンアームで有意に多くの時間を費やした。
KSグループは、対照群と比較して、センターでかなり多くの時間を費やしました。そして、コントロールと比較してLKE、KS、KSMCTグループで閉じた腕に費やされる時間が少ない。KSおよびKSMCT群のラットは、両手を広げてかなり長い距離を移動した。
LKE、KS、およびKSMCT群のラットは、対照群と比較して閉鎖された腕の中を移動する距離が有意に少ないことを示した。さらに、7日間の経口ギャバジの後、オープンアームで過ごした時間はKE群では大きかったが、KE、KS、およびKSMCT群の中心では減少した。また、KEグループとKSグループで7日間の投与を行った後、閉鎖された武器へのエントリー数も大幅に減少した。
実験者から離れた交差点で、機器上のすべてのラットを一貫したマナーに置くのは非常に重要です。げっ歯類に対するEPMアッセイは、性感作用に関与する脳領域や作用機序に影響を与えるさまざまな治療法の効果を調査するのに適した、敏感な方法です。
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