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HOX軌跡 Focused CRISPR/sgRNA ライブラリ スクリーニングを識別する重要な CTCF の境界
JoVE Journal
Genetics
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JoVE Journal Genetics
HOX Loci Focused CRISPR/sgRNA Library Screening Identifying Critical CTCF Boundaries
DOI:

10:10 min

March 31, 2019

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Chapters

  • 00:04Title
  • 00:49The High Titer sgRNA Library Lentivirus Generation
  • 01:44Titration of Lentiviral Library in MOLM13 Leukemia Cells
  • 02:59Transduction of the Pooled CRISPR-Cas9 KO Library
  • 04:20Screening of the Pooled CRISPR-Cas9 KO Library with One-Step RT-qPCR
  • 05:41Verification of Integrated sgRNAs Positive Clones through Genotyping and Sanger Sequence
  • 06:37Detection of sgRNAs Induced Indel Mutation by Nuclease Digestion Assay
  • 07:48Results: Pooled CRISPR-Cas9 KO Library Screening and Identification
  • 09:19Conclusion

Summary

Automatic Translation

CRISPR/sgRNA ライブラリは、蛋白質コーディングの遺伝子を尋問に適用されています。ただし、CTCF 境界の遺伝子発現制御の機能を明らかにするための sgRNA ライブラリの可能性は未踏のままになります。ここでは、 HOX遺伝子座の CTCF 境界の働きを解明するHOX遺伝子特定 sgRNA ライブラリをについて説明します。

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