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Chapters
- 00:04Title
- 00:49The High Titer sgRNA Library Lentivirus Generation
- 01:44Titration of Lentiviral Library in MOLM13 Leukemia Cells
- 02:59Transduction of the Pooled CRISPR-Cas9 KO Library
- 04:20Screening of the Pooled CRISPR-Cas9 KO Library with One-Step RT-qPCR
- 05:41Verification of Integrated sgRNAs Positive Clones through Genotyping and Sanger Sequence
- 06:37Detection of sgRNAs Induced Indel Mutation by Nuclease Digestion Assay
- 07:48Results: Pooled CRISPR-Cas9 KO Library Screening and Identification
- 09:19Conclusion
Une bibliothèque CRISPR/sgRNA a été appliquée à interroger des gènes codant pour des protéines. Toutefois, la faisabilité d’une bibliothèque de sgRNA afin de découvrir la fonction d’une limite de la FCCT dans la régulation des gènes reste inexplorée. Nous décrivons ici une bibliothèque de sgRNA spécifiques de locus HOX afin d’élucider la fonction des limites de la FCCT dans loci HOX .
