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संस्कृति में स्तनधारी कोशिकाओं में डाइसल्फाइड लिंकेज द्वारा स्थिर मल्टीमेरिक परिसरों का पता लगाने के लिए गैर-कम करने वाले एसडीएस-पृष्ठ विश्लेषण और रासायनिक Crosslinking का संयोजन
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Chapters
- 00:04Title
- 00:34Harvesting Cells After Blocking Free Cysteine Residues Using Iodoacetamide
- 02:02Extraction of Protein and Sample Preparation
- 03:13In Vivo Formaldehyde Cross-linking of Endogenous Proteins in U-2 OS Cells
- 04:30Fractionation of Nuclei
- 06:11Extraction of Protein and Sample Preparation
- 06:51SDS-PAGE Analysis
- 07:53Results: Analyzing Multimeric Complexes Using a Two-step Method of Non-reducing SDS-PAGE Analysis and Formaldehyde Cross-linking
- 09:04Conclusion
कई प्रोटीन की संरचना को स्थिर करने के लिए डाइसल्फाइड लिंकेज लंबे समय से ज्ञात हैं । एक साधारण विधि का विश्लेषण करने के लिए multimeric इन संबंधों द्वारा स्थिर परिसरों गैर के माध्यम से है-कम एसडीएस-पृष्ठ विश्लेषण । यहां, इस विधि मानव हड्डी अस्थिसार्कोमा सेल लाइन U-2 OS से dUTPase के परमाणु isoform का विश्लेषण करके सचित्र है ।
