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Induire des lésions hépatiques aigues chez les rats via le tétrachlorure de carbone (CCl4) Exposition par un tube orogastricrique
Chapters
Summary April 28th, 2020
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Ce protocole décrit une méthode commune et faisable d’induire des lésions hépatiques aigues (ALI) par l’intermédiaire de l’exposition CC4 par un tube orogastricrique. L’exposition CC4 induit l’ALI par la formation d’espèces réactives d’oxygène pendant sa biotransformation dans le foie. Cette méthode est utilisée pour analyser la pathophysiologie d’ALI et examiner différentes stratégies hépatoprotectives.
Transcript
Je voudrais présenter nos travaux sur les lésions hépatiques aiguës induites chez les rats par l’exposition au tétrachlorure de carbone par tube orogastrique. Choisissez des rats Sprague-Dawley mâles adultes pesant de 300 à 350 grammes. Fournir chow rat et ad libitum d’eau.
Effectuez toutes les expériences entre 6 h et 12 h. La comédie de soins aux animaux de l’Université Ben Gourion du Néguev, Israël a approuvé toutes les procédures de traitement et d’essai utilisées dans ce protocole. Maintenez les rats à une température ambiante de 22 degrés Celsius avec des lumières de 12 heures et des cycles sombres de 12 heures. Cannulate la veine de la queue avec un cathéter de calibre 22.
Prélever des échantillons de sang à la ligne de base. L’analyse biochimique de sang incluent la mesure du sérum GOT, du GPT, et de la bilirubine totale. L’examen des enzymes hépatiques et du niveau total de bilirubine ont été effectués dans le laboratoire biochimique du centre médical de Soroka.
Attention : l’exposition à une forte concentration de tétrachlorure de carbone, y compris l’absorption de la vapeur ou de la peau, peut affecter le système nerveux central, dégénérer le foie et les reins, et une exposition prolongée peut entraîner le coma ou la mort. Préparer une solution de 50 pour cent de tétrachlorure de carbone mélangé avec de l’huile d’olive comme véhicule dans un rapport à un. Induire la pathotoxicité in vivo par administration de tétrachlorure de carbone par l’intermédiaire d’un tube orogastrique.
Insérez un tube orogastrique dans la cavité buccale du rat. Exposez les rats à différentes doses de tétrachlorure de carbone. Un millilitre par kilo pour les lésions hépatiques aiguës légères, deux points cinq millilitres par kilo pour les lésions hépatiques aiguës modérées, ou cinq millilitres par kilo pour les lésions hépatiques aiguës graves.
Pour le groupe factice, exposer les rats à cinq millilitres par kilo seulement l’huile d’olive. Prélever des échantillons de sang à 24 heures de l’exposition au tétrachlorure de carbone. L’analyse biochimique de sang incluent la mesure du sérum GOT, du GPT, et de la bilirubine totale.
Placez le rat mort sur la planche de dissecting dans le recombinant dorsal avec l’abdomen faisant face vers le haut et rasez son abdomen. À l’aide du scalpel, incise toute la longueur du ventrum de l’anus au menton. Réfléchissez la peau.
Avec le scalpel, incisez la paroi abdominale de l’anus au cartilage xiphoïde pour exposer les viscères abdominaux. Transférer le foie dans une boîte de Pétri. Effectuez une coloration à l’hématoxyline et à l’éosine.
Examiner les tranches au microscope grossissement de 200 fois avec une longueur objective de 20 millimètres. La section hépatique doit être classée par un pathologiste spécialisé, aveuglé par le protocole de traitement. Le score de zéro n’indique aucune anomalie hépatique, un à deux indique des dommages légers de foie, trois à quatre indique des dommages modérés de foie, et cinq à six indique des dommages graves de foie.
Les différents groupes de rats à différents moments sont montrés sur le schéma. 24 heures après avoir induisant des dommages aigus de foie, il y avait une augmentation significative des niveaux got, GPT, et de bilirubin total, selon le tétrachlorure de carbone exposé par rapport au groupe témoin. La valeur P était inférieure à zéro point zéro zéro zéro.
Des changements histopathologiques ont été observés après 24 heures dans tous les groupes après intoxication de tétrachlorure de carbone dans diverses doses. Le score histologique de classement à 24 heures entre les trois groupes interventionnels au groupe témoin était sensiblement plus élevé. La valeur P était inférieure à zéro point zéro cinq.
Notre groupe de recherche a présenté la méthode commune et physique des dommages aigus induits de foie chez les rats par l’exposition de tétrachlorure de carbone par le tube orogastrique. Cette méthode est utilisée pour étudier la pathophysiologie des lésions hépatiques aiguës et pour tester différentes sur la stratégie de protection. Merci beaucoup pour votre attention.
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