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탄소 테트라 클로라이드를 통해 쥐에 급성 간 상해를 유도 (CCl4)오로 위관을 통해 노출
Chapters
Summary April 28th, 2020
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이 프로토콜은 오로 위관을 통해 CCl4 노출을 통해 급성 간 손상 (ALI)을 유도하는 일반적이고 실행 가능한 방법을 설명합니다. CCl4 노출은 간에서의 생체 변환 동안 반응성 산소 종의 형성을 통해 ALI를 유도합니다. 이 방법은 ALI의 병리생리학을 분석하고 다른 간 보호 전략을 검사하는 데 사용됩니다.
Transcript
나는 구로위관을 통해 탄소 테트라 클로라이드 노출을 통해 쥐에 유도 급성 간 손상에 대한 우리의 작업을 제시하고 싶습니다. 300 ~ 350 그램의 성인 남성 스프라그-Dawley 쥐를 선택합니다. 쥐 차우와 물 광고 리비툼을 제공합니다.
오전 6시부터 오후 12시 사이에 모든 실험을 수행합니다. 이스라엘 네게브 벤 구리온 대학의 동물 관리 코미디는 이 프로토콜에 사용되는 모든 치료 및 테스트 절차를 승인했습니다. 12 시간 조명과 12 시간 어두운 주기와 22 섭씨 도의 실온에서 쥐를 유지합니다. 22 게이지 카테터로 꼬리 정맥을 캐너레이.
기준선에서 혈액 샘플을 수집합니다. 혈액 생화학 적 분석은 혈청 GOT의 측정을 포함, GPT, 총 빌리루빈. 소로카 의료 센터의 생화학 실험실에서 간 효소 및 총 빌리루빈 수준의 검사가 수행되었습니다.
주의: 증기 또는 피부 흡수를 포함한 고농도의 탄소 테트라클로리드에 노출되면 중추 신경계에 영향을 미치고 간과 신장을 퇴화시키고 장기간 노출되면 혼수 상태에 빠질 수 있습니다. 올리브 오일과 혼합된 탄소 테트라클로리제의 50% 용액을 차량으로 1대 1비율로 준비합니다. 구로위관을 통해 탄소 테트라클로리드 투여에 의해 생체내의 병독성을 유도한다.
쥐의 구강을 통해 구위관을 삽입합니다. 탄소 테트라클로라이드의 다른 복용량에 쥐를 노출. 가벼운 급성 간 부상에 대 한 킬로 당 1 밀리 리터, 중간 급성 간 부상에 대 한 킬로 당 2 점 5 밀리 리터, 또는 심각한 급성 간 부상에 대 한 킬로 당 5 밀리 리터.
가짜 그룹의 경우, 1킬로당 5 밀리리터에 쥐를 노출만 올리브 오일. 탄소 테트라클로리드 노출로부터 24시간 동안 혈액 샘플을 수집합니다. 혈액 생화학 적 분석은 혈청 GOT의 측정을 포함, GPT, 총 빌리루빈.
복부가 위쪽으로 향하고 복부를 면도하는 등쪽 재조합의 해부 보드에 죽은 쥐를 놓습니다. 메스를 사용하여 항문에서 턱까지 벤트럼의 전체 길이를 절개합니다. 피부를 반사합니다.
메스를 사용하면 항문에서 시포이드 연골에 복부 벽을 절개하여 복부 내장을 노출시합니다. 간을 페트리 접시에 옮기습니다. 헤마톡시린과 에진 염색을 수행합니다.
20밀리미터 의 객관적 길이로 200배의 현미경 배율 하에서 슬라이스를 검사합니다. 간 단면도는 처리 프로토콜에 눈이 멀게 한 전문 병리학자에 의해 채점되어야 합니다. 0의 점수는 간 이상을 나타내지 않으며, 1 ~2 개는 가벼운 간 부상을 나타내며, 3 ~4 개는 중간 간 부상을 나타내며 5 ~ 6 개는 심각한 간 손상을 나타냅니다.
다른 시간에 쥐의 다양한 그룹은 계획에 표시됩니다. 급성 간 손상을 유도 한 후 24 시간, GOT에서 상당한 증가가 있었다, GPT, 총 빌리루빈 수준, 대조군에 비해 노출 탄소 테트라 클로라이드에 따라. P값은 0점 0 0 1 미만이었습니다.
조직 병리학적 변화는 다양한 용량에서 탄소 테트라염화물 중독 후 모든 그룹에서 24 시간 후에 관찰되었다. 조직학 채점 점수는 대조군에 대한 세 가지 중재 그룹 사이의 24시간 에서 상당히 높았다. P값은 0점 0 5 미만이었습니다.
우리의 연구 그룹은 구로위관을 통해 탄소 테트라 클로라이드 노출을 통해 쥐에 있는 유도된 급성 간 상해의 일반적이고 물리적인 방법을 제시했습니다. 이 방법은 급성 간 손상의 병리생리학을 조사하고 보호 전략에 대해 다른 테스트하는 데 사용됩니다. 당신의 관심을 주셔서 대단히 감사합니다.
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