Представлен протокол приготовления ламельных пленок замороженных биологических образцов крио-сфокусированной ионно-лучевой микрообработкой для структурных исследований макромолекул in situ с высоким разрешением с помощью криоэлектроно-томографии. Представленный протокол содержит рекомендации по получению высококачественных ламелл с высокой воспроизводимостью для структурной характеристики макромолекул внутри Saccharomyces cerevisiae.