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June 13, 2021
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हमारा प्रोटोकॉल महत्वपूर्ण है क्योंकि यह गर्भावस्था के परिणामों पर पुराने तनाव, विशेष रूप से मनोसामाजिक तनाव के प्रभावों का मूल्यांकन करने के लिए एक नए प्रतिमान का प्रतिनिधित्व करता है। इस प्रोटोकॉल में, हम गर्भवती चूहों को अप्रत्याशित तरीके से विभिन्न तीव्रताओं के विभिन्न मनोसामाजिक अपमान के लिए बेनकाब करते हैं। पिछले पशु मॉडल प्रतिमान शारीरिक तनाव या तनाव की एक सीमित संख्या दोहराया प्रशासित कार्यरत है, जो गर्भावस्था के दौरान महिलाओं के अनुभव को प्रतिबिंबित नहीं करता है ।
हमारा क्रोनिक साइकोसासोशल स्ट्रेस मॉडल इन सीमाओं पर काबू पा रहा है । इस विधि का विभिन्न अनुसंधान क्षेत्रों के लिए व्यापक प्रभाव पड़ता है, जिसमें मातृ मानसिक स्वास्थ्य और प्रतिकूल शिशु विकास से संबंधित अनुसंधान और अधिक मोटे तौर पर, प्रतिकूल अंतर्गर्भाशयी घटनाओं के माध्यम से वयस्क रोग के विकासात्मक मूल को समझने के लिए शामिल हैं । सीजीएस प्रतिमान में प्रत्येक तनाव शुरू करने से पहले, सीजीएस के लिए नामित कमरे में आवास कक्ष से सीजीएस समूह चूहों को लाएं।
6.5 से 17.5 तक गर्भावधि दिन से चलने वाले 11 दिन के तनाव के बाद चूहों को विभिन्न तनावों का पर्दाफाश करें। चूहों को विदेशी वस्तुओं को बेनकाब करने के लिए, बेतरतीब ढंग से माउस नेस्लेट्स के बिना माउस बिस्तर के साथ एक साफ स्थिर पिंजरे में विभिन्न आकारों के छह पत्थर या छह लेगो वितरित करें। दो घंटे के लिए विदेशी वस्तुओं के साथ स्थिर पिंजरे में एक घर पिंजरे से सभी चूहों प्लेस, तो उनके घर पिंजरे में चूहों वापस।
चूहों को शिकारी गंध के लिए बेनकाब करने के लिए, मादा चूहों से एक सेंटीमीटर मोटी गंदे बिस्तर को एक साफ स्थिर पिंजरे में रखें जिसमें कोई माउस बिस्तर या नेस्लेट्स नहीं है। एक घर पिंजरे से सभी चूहों को दो घंटे के लिए गंदे चूहे बिस्तर के साथ स्थिर पिंजरे में रखें, फिर चूहों को उनके घर पिंजरे में वापस करें। चूहों को पिंजरे के झुकाव के लिए बेनकाब करने के लिए, माउस नेस्लेट्स के बिना माउस बिस्तर के साथ एक साफ स्थिर पिंजरे में एक घर पिंजरे से सभी चूहों को रखें।
पिंजरे को दो घंटे तक दीवार के खिलाफ 30 डिग्री कोण पर झुका रखें, फिर चूहों को उनके घर पिंजरे में वापस करें। चूहों को लगातार बिस्तर में परिवर्तन करने के लिए बेनकाब करने के लिए, सभी चूहों को एक घर के पिंजरे से माउस नेस्लेट्स के बिना माउस बिस्तर के साथ एक साफ स्थिर पिंजरे में रखें। हर 10 मिनट में, चूहों को धीरे-धीरे एक अलग साफ पिंजरे में ले जाएं और माउस बिस्तर को बदल दें।
दो घंटे के बाद चूहों को उनके घर पिंजरे में लौटा दें। चूहों को हटाने के लिए बेनकाब करने के लिए, एक घर पिंजरे से सभी चूहों को दो घंटे तक एक खाली, साफ स्थिर पिंजरे में रखें, फिर चूहों को उनके घर के पिंजरे में वापस करें। एक शेखर पर आंदोलन करने के लिए चूहों को बेनकाब करने के लिए, माउस नेस्लेट्स के बिना माउस बिस्तर के साथ एक साफ स्थिर पिंजरे में एक घर पिंजरे से सभी चूहों को रखें।
दो घंटे के लिए प्रति मिनट 140 स्ट्रोक के लिए सेट एक पारस्परिक प्रयोगशाला शेखर के ऊपर स्थिर पिंजरे रखें, तो चूहों को उनके घर पिंजरे में वापस करें। चूहों को रात भर रोशनी के लिए बेनकाब करने के लिए, माउस नेस्लेट्स के बिना माउस बिस्तर के साथ एक साफ स्थिर पिंजरे में एक घर पिंजरे से सभी चूहों को रखें। अंधेरे चक्र में हस्तक्षेप करने के लिए रात भर रोशनी रखें।
अगले दिन, चूहों को उनके घर पिंजरे में वापस करें। नए पिंजरे के साथियों के लिए एक माउस का पर्दाफाश करने के लिए, माउस को दो अपरिचित मादा चूहों वाले माउस बिस्तर के साथ एक साफ स्थिर पिंजरे में स्थानांतरित करें। रात भर अपरिचित पिंजरे साथियों के साथ स्थिर पिंजरे में माउस छोड़ दें।
अगले दिन, परिचित पिंजरे साथियों के साथ अपने घर पिंजरे के लिए माउस लौट आए । चूहों को गीले बिस्तर पर बेनकाब करने के लिए, माउस बिस्तर को 24 डिग्री सेल्सियस पर रखे स्वच्छ पानी के साथ एक स्थिर पिंजरे में संतृप्त करें। रात भर गीले बिस्तर के साथ स्थिर पिंजरे में एक घर पिंजरे से सभी चूहों रखें।
अगले दिन, चूहों को उनके घर पिंजरे में वापस करें। तनाव के बाद आहार आहार गर्भावधि दिन 17.5 पर पूरा हो गया है, एकल घर सभी प्रायोगिक चूहों को पार्टिशन और डाउनस्ट्रीम कार्यात्मक आकलन के लिए तैयार करने के लिए। गर्भवती महिला चूहों को सीजीएस में उजागर करने से पुराने तनाव-प्रासंगिक मापदंडों में परिवर्तन होता है, जैसे गर्भावस्था के दौरान शरीर के वजन में कमी और प्रारंभिक प्रसवोत्तर अवधि में अधिवृक्क ग्रंथि वजन में वृद्धि।
महत्वपूर्ण बात, सीजीएस बांध पोस्टपार्टम असामान्यताओं और मातृ न्यूरोएंडोक्राइन कार्य को प्रदर्शित करते हैं जैसा कि एक उपन्यास तीव्र अपमान के बाद सीरम कोर्टिकोस्टेरोन के स्तर में वृद्धि का सबूत है। इसके अलावा, सीजीएस बांधों में मातृ देखभाल में परिवर्तन प्रदर्शित होता है जैसा कि पिल्ले द्वारा प्राप्त मातृ संकेतों के विखंडन की डिग्री में वृद्धि से परिलक्षित होता है । चाट/ग्रूमिंग मुकाबलों की औसत अवधि कम हो जाती है जबकि मुकाबलों की औसत संख्या में वृद्धि होती है, जो व्यवहार के पोषण के कई छोटे एपिसोड का संकेत देता है ।
सुक्रोज वरीयता भी सीजीएस बांधों में उदास है जब नियंत्रण बांधों की तुलना में, anhedonia की उपस्थिति का सुझाव । अंत में, सीजीएस बांधों में भी चिंता से संबंधित व्यवहार में वृद्धि प्रदर्शित की गई है जैसा कि नियंत्रण बांधों की तुलना में ईज़ीम के खुले क्वाड्रंट्स में बिताए गए समय में कमी से मापा जाता है । संतान में, गर्भाशय में सीजीएस के संपर्क में आने के परिणामस्वरूप प्रसवोत्तर अवधि के दौरान वजन में कमी आती है, जो प्रसवोत्तर दिन 7 से 21 तक होती है, हालांकि जन्म के समय कोई अंतर नहीं होता है।
शरीर के वजन में यह कमी दोनों लिंगों की संतानों में मौजूद है। इस प्रक्रिया का प्रयास करते समय, समय पर गर्भधारण प्राप्त करने और लगातार पूरी श्रृंखला को लागू करने के लिए एक कार्यक्रम स्थापित करना, परिवर्तनीय अप्रत्याशित मनोसामाजिक तनाव महत्वपूर्ण है। इस तकनीक से दिलचस्प सवालों के जवाब देने में मदद मिल सकती है जैसे कि मातृ मनोसामाजिक तनाव अपरा समारोह या संतानों के मस्तिष्क के विकास और व्यवहार पर सेक्स-विशिष्ट प्रभाव पैदा कर सकता है?
और क्या इन प्रभावों को औषधीय हस्तक्षेप या प्रसवोत्तर मातृ देखभाल द्वारा उलट या संशोधित किया जा सकता है?
क्रोनिक मनोसामाजिक तनाव (सीजीएस) प्रतिमान माताओं और शिशुओं के आदर्श मनोरोग विकारों के लिए चूहों में गर्भावस्था के दौरान चिकित्सकीय प्रासंगिक तनाव को रोजगार । यहां, हम इस मॉडल को मान्य करने के लिए सीजीएस प्रतिमान और डाउनस्ट्रीम आकलन लागू करने की एक कदम-दर-कदम प्रक्रिया प्रदान करते हैं।
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Zoubovsky, S. P., Wilder, A., Muglia, L. Using a Murine Model of Psychosocial Stress in Pregnancy as a Translationally Relevant Paradigm for Psychiatric Disorders in Mothers and Infants. J. Vis. Exp. (172), e62464, doi:10.3791/62464 (2021).
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