Journal
/
/
כלי עריכת גנים CRISPR לניתוח רשת אשכולות מיקרו-רנ"א
JoVE Journal
Biology
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Journal Biology
CRISPR Gene Editing Tool for MicroRNA Cluster Network Analysis
DOI:

10:40 min

April 25, 2022

, , ,

Chapters

  • 00:04Introduction
  • 00:58Preparation of CRISPR Gene Editing and Guide RNA Design to Generate miRNA Cluster Knockout Cell Lines
  • 02:06Generation of Stable Lentiviral Cell Lines Carrying the DOX-Inducible Cas9 Expression Cassette
  • 03:20Performing CRISPR Reactions by Cas9 Induction and Synthetic Guide RNA Transfection of Cells Using a High-Throughput Format
  • 07:22PCR Genotyping of CRISPR Cell Lines Using Crude Cell Lysates
  • 08:37Results: High-Throughput CRISPR Experimental Design to Generate Multiple miR-888 Cluster Deletion Combinations
  • 09:51Conclusion

Summary

Automatic Translation

פרוטוקול זה מתאר זרימת עבודה של עריכת גנים של גנים חוזרים פלינדרומיים קצרים (CRISPR) בתפוקה גבוהה, המקובצים באופן קבוע, עבור ניתוח רשת של אשכולות מיקרו-רנ"א, המאפשרת ייצור מהיר של פאנל של קווי תאים מהונדסים גנטית הנושאים שילובי מחיקה ייחודיים של חברי אשכול miRNA בגודל של עד 35 קילו-בתים בתוך ניסוי יחיד.

Related Videos

Read Article