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在原位横向腹直肌肌皮瓣:肌缺血再灌注损伤模型大鼠

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Summary

广泛采用游离组织移植重建手术,肿瘤切除术和创伤后恢复形式和功能。手术前预处理这个组织可能提高的结果。本文介绍了一种

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Edmunds, M. C., Wigmore, S., Kluth, D. In situ Transverse Rectus Abdominis Myocutaneous Flap: A Rat Model of Myocutaneous Ischemia Reperfusion Injury. J. Vis. Exp. (76), e50473, doi:10.3791/50473 (2013).

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Abstract

游离组织移植重建手术的金标准,不服从当地期权或那些需要的复合组织修复缺陷。缺血再灌注损伤(IRI)是一个已知的部分游离皮瓣失败的原因,有没有有效的治疗方法。建立这种损伤的实验室模型可以证明均付出沉重代价财政,大型哺乳动物通常用于在所需的专业知识,技术难度,这些程序通常需要聘请一位经验丰富的microsurgeon。本出版物和视频演示的典范IRI大鼠不需要显微专长的有效利用。此程序是一个原位模型的横向腹直肌肌皮瓣(TRAM)无创伤钳是用来重现缺血再灌注损伤与此手术相关。激光多普勒成像(LDI)扫描仪是用来评估皮瓣灌注和图像处理软件,重新评估面积百分比作为一个主要的测量结果受伤的皮肤生存的Image J。

Introduction

这个协议的目的是为了展示一个可靠和可重复的模型,观察缺血再灌注损伤中游离组织移植,使介入策略进行调查。

免费组织转移被定义为一个孤立的组织块,然后由该组织自体移植吻合瓣的横断本地船只船只接收站点的血管支队。该过程被称为FTT和组织受让方简称为游离皮瓣。

游离组织移植的金标准方法用于矫正复杂的,复合的缺陷地方选择不适合或无法使用。1-4缺血再灌注损伤(IRI)是不可避免的游离组织移植,有助于襟翼失效5,6及无有效的治疗。游离皮瓣手术选修性质,允许管理pharmacologi卡尔剂对IRI的前提。

IRI结果在流经受损内皮细胞活化微循环和代谢功能障碍,毛细血管通透性增加和随后的间质水肿,炎性细胞的大量涌入,8炎性介质的释放,活性氧和补体沉积。10这个复杂的过程中缺氧和随后的再灌注损伤,最终导致细胞死亡。肌IRI模型,使预处理策略,对临床结果的有效性进行评估。最近的工作作为替代人类IRI IRI研究的动物模型验证了使用通过比较分子人类受试者中观察到的变化和现有的动物数据。10,11

大鼠横向腹直肌肌皮瓣(TRAM)于1987年在德国的12,并于1993年首次被描述13英语。这种模式得到广泛普及13-25 TRAM皮瓣的基础上深,下unipedicled 14,17-22这些研究大部分被设计成,作为一种廉价的,可靠的模型来研究不同的策略,以降低游离组织移植IRI。上腹血管蒂15-18,20-22从这些研究的数据比较复杂,通过使用不同大小的皮岛(10.5 - 30厘米2)和不同长度的术后随访(2 - 10天)。在这些研究的控制臂的平均百分比总面积皮瓣坏死是69±6.2%(平均值±SEM)。应当注意,这六个文件全部采用腹直肌血管蒂的载体,但不公开,分裂和microanastomose或钳血管。 Zhang 23所描述的真正的,自由的大鼠TRAM皮瓣,腹壁上血管的基础上的f圈提出,船舶分为肌皮瓣转移腹股沟血管microanastomosed的。这个技术难度要求microanastomosis为0.45 - 0.5毫米口径的容器。只有15和67%,这些幸存下来。23 Zhang 等人描述的模型23是人类的自由TRAM皮瓣一个很好的模型,因为它真实地反映了FTT过程中产生伤害。大鼠TRAM皮瓣的其他已发表的模型,更准确地反映带蒂TRAM在人体产生伤害,但并不能准确地反映这些瓣IRI不接受血管蒂从来没有夹紧或划分和缺血再灌注期间执行microanastomosis。该协议和视频描述IRI被复制使用microclamps的使用大鼠TRAM游离组织移植的新模式。这更忠实地复制IRI比蒂TRAM前辈的,但在技术上更容易比performi纳克microanastomosis。通过移植的研究人员已被广泛采用microclamps重新创建IRI与实体器官移植; 26-33然而,这是第一次已经描述了在大鼠TRAM皮瓣。

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Protocol

所有手术是按照由英国内政部和英国爱丁堡大学的兽医服务局的指引载。

1。手术程序集的说明

  1. 转变成干净的手术袍,长袍,磨砂帽和口罩。清洁所有表面手术室,包括70%的异丙醇用2%洗必泰设备。
  2. 手术前,高压灭菌器,将用于在程序中的所有手术用品和仪器。每次手术的无菌包应包括:窗帘,纱布,棉签涂药,矽胶片和手术器械,请参阅表的具体的手术材料和工具,和图1。大鼠称重和测量适当体积的丁丙诺啡(0.04毫克/千克),以皮下注射前1小时完成的过程。布局; 3×1毫升注射器皮下积液管理外科学每2×6-0薇乔缝合线,1×5-0 Ethilon缝合线,无菌的标记与标尺和10刀片一次性解剖刀,4 - 5对无菌手套,和一个手持式的烧灼部。
  3. 将4×10毫升无菌0.9%盐水小瓶在水浴中加热到37℃。这将用来更换皮下积液(1毫升/公斤/小时)和冲洗手术部位。设置毯的homeothermic,直肠探头,热灯,手术显微镜和麻醉钻机。打开激光及其软件,设置另一个麻醉钻机和下方的黑色垫子,动物会躺在扫描过程中放置​​散热垫。
  4. 使用男,Lewis大鼠,体重250-300克。 7天自由采食和饮水,12小时明暗周期之前,任何手术与食品家鼠进行。

2。麻醉和皮肤准备

  1. 将大鼠麻醉钻机的感应室和管理1L/min时O 2与4%的异氟醚2-3分钟诱导麻醉。从箱内取出麻醉大鼠仰卧放置在干净,加热垫。维持异氟醚1.5%使用鼻锥。应用lacrilube或类似剂,以防止在手术过程中角膜擦伤。进行足垫捏测试,以确保动物有足够的麻醉,然后再进行。重复这最后的测试,在每个过程中的重要一步,并相应地调整吸入麻醉药浓度。
  2. 密切剃腹前壁使用的电动剃须刀,使整个腹部的表面暴露。应用脱毛霜由供应商建议的时间。取出奶油和温暖无菌生理盐水彻底冲洗皮肤,删除所有痕迹的奶油。应用2%洗必泰,70%异丙醇对皮肤和晾干,然后再继续。这是标准的皮肤准备在我们单位,根据目前外科手术部位感染的证据。34请ð与您的兽医部iscuss标准是什么程序在你的单元选出前皮肤准备协议。
  3. 广场两侧的窗帘大鼠和照顾,让他们无菌。戴上无菌手套和一个助手的帮助下打开无菌包。将所有的仪器在一个悬垂的缝合线,纱布,棉花涂药,矽胶片和无菌记号笔与其他统治者。
  4. 确定中线剑突和尾部作为参考点。标记中线。测量0.8厘米剑突下方,标志着这一点。画一条线垂直于从该点向中线。以中线襟翼标记为中心出1厘米和2厘米的左侧和中线的右侧。绘制从点向中线平行的垂直线。原来的水平线上测量4厘米以下,并绘制另一个平行。按照这些说明一个4×4厘米的皮瓣分为4个相等条划定(参见图2)。

3。激光多普勒成像

  1. 小心地将大鼠LDI扫描仪第二麻醉钻机在鼻锥。继续麻醉1.5%异氟醚,1L/min时O 2。打开激光,并按照制造商的指示,开始扫描。保存扫描文件后返回大鼠第一钻机和重新插入直肠探头的homeothermic毯采用软白石蜡作为润滑剂。

4。原位 TRAM皮瓣-肌IRI模型

  1. 再擦洗双手把新鲜无菌手套。剪出一个直径5厘米的圆圈的中心,其余无菌的悬垂性和放置在裸露腹部创造一个搭着无菌场。
  2. 做一个切口沿左路横向标记边缘( 图3AB)。达到止血效果。类似切口上下水平线中线的左侧。达到止血效果。
  3. 脂肪覆左下腹直肌鞘应该是可见的。仔细使用镊子和精美的虹膜剪下面这块肥肉。小心不要损坏打孔器通过左,腹直肌鞘前壁。飞机开辟等夹层,立即前腹壁筋膜以上。在这架飞机周围划定边界继续解剖。在左髂窝在于大,旋髂浅血管,这些可以被捆绑或烧灼。然后延长夹层内侧谨慎,只有尽可能左腹直肌外侧缘。有一个明显的颜色变化,在这一点上,从粉红色到近白色( 图3C)。小心灌溉面积用无菌生理盐水和检查,止血前已达到湿润的纱布放置在该区域。
  4. 对侧上重复此过程,但这个时间延长吨Ø 白线 (中线)。小心识别和烧灼在右腹直肌( 图3D)的中心肌产生的打孔器。如果不这样做正确术后血肿和可靠的结果,它会导致。同样达到止血,浇水湿润的纱布放置募集瓣。
  5. 回到左前腹直肌下缘( 图3EF)。烧灼见过的最下穿孔。继续腹直肌鞘前壁使用microscissors的切开一个小窗口中(约0.6厘米×0.6厘米),并指出弯曲Graeffe的镊子。钝性解剖的外侧缘肌肉慢慢放下,直到肌肉变薄,但在此之前被违反后鞘。然后钳旋转,直到腹部的肌肉之上的弧形边缘的镊子,并提示是免费的内侧缘,钝性解剖内侧。饲料近似LY 6厘米5-0 Ethilon到钳口钳和配合下直肌鞘。这一步完成后,被孤立在一个占主导地位的船舶深优越的上腹血管皮瓣。盖上湿润的纱布。
  6. 切矽胶片成椭圆用平滑拐角( 图3G)。这些应该是大到足以覆盖大部分的面积暴露下的筋膜皮瓣部分。然而,必须谨慎,以确保可以封闭在无张力状态和内侧的椭圆形曲线的皮肤边缘可能必须通过其它穿孔机,以防止它损害流动配对。然后,将它们缝合的地方用6-0薇乔( 图3H)。盖上湿润的纱布。
  7. 使用简单的中断5-0 Ethilon缝合皮瓣,以减少热量和水分损失( 图3I)挂出'。盖上湿润的纱布。
  8. 优伤口延伸到左侧的剑突( 如图3I)。缝合当前左上象限,以提高该字段的视图。
  9. 切去任何覆脂肪揭示优越,左,前腹直肌鞘。切开一个小窗口(0.6厘米×0.6厘米)在此鞘( 图3J)。内侧的伤口延长,直至肌纤维轨迹的变化从垂直到看到斜肌和松散的纤维排列紧密的一致性。
  10. 插入这两块肌肉之间仔细弯钳钝性分离,并开辟了飞机。小心砍掉尽可能优异的表面,这些弯钳切割,左腹直肌揭示底层深,腹壁上动脉和静脉( 图3K)通过腹部。
  11. 使用微型仪器和高功率的手术显微镜,仔细分离动脉和静脉和去掉所有周围脂肪的。
  12. 将无创伤阿克兰钳位到一个的rtery和静脉(B-1,“V”型),并开始计时,倒计时30分钟缺血期。灌溉夹紧蒂,用纱布覆盖。我们没有雇用船只的扩张器如维拉帕米或pabavarine的但血管痉挛应该是一个问题,这些药物应予以考虑。
  13. 辖的丁丙诺非(0.04毫克/千克)和温热的,无菌盐水中(1毫升/公斤/小时)。
  14. 从左上角开始,停止与6-0薇乔皮下的缝线打结在剑突缝合皮瓣。
  15. 当30分钟缺血时间已经过去,小心地取出夹具和温热的盐水灌溉蒂。检查流量已重新建立。请注意,缺血时间,这是由英国内政部权威规定。在其他部门工作的研究人员或许能够延长这一时间。扩展缺血时间将有可能导致较差的临床结果。
  16. 的腹直肌缝合切缘用6-0薇乔到位。小心不要施加太大的紧张,因为这可能会导致扭结的船只。
  17. 填写皮下缝合照顾到所有结埋在皮肤下面( 图3K)。
  18. 清洁伤口区域,并让其干燥。重新绘制瓣上的区域。
  19. 重新扫描动物获得术后影像。
  20. 重新申请lacrilube动物的眼睛和一个温暖的孵化器在(37°C)1小时恢复返回牧单元之前。

在协议的关键步骤

关键的程序是确定深,优越的上腹血管。这清楚地显示在随附膜。简单地说,一个窗口被切断腹直肌鞘前壁,以暴露下面的肌肉纤维的纵向上。通过扩展腹直肌前鞘的表面解剖内侧肌纤维的变化轨迹观察fROM纵向斜。插入钝止的,弯曲的,Graeffe钳(或类似),在这两个肌纤维束的交叉点。钝性解剖横向。降不下来,使用微型剪刀,在此平面之间的肌纤维束的弯钳的上表面上。在去除Graeffe钳深,腹壁上动脉和静脉将观察腹直肌体的中点。剥去脂肪覆船只使用微型工具和应用夹具。

大鼠TRAM皮瓣,筋膜部分薄到足以允许皮瓣作为全厚皮片。为了防止这种情况,以确保这是一个真实的模型,IRI薄,灵活的硅钢片置于下方的筋膜皮瓣部分。35这一步已通过其他研究人员进行大鼠TRAM模型。17,21,25

大鼠咀嚼THROUGH节,以便确保所有缝线皮下,被埋没节。在报告的其他研究人员开展细致的缝合autocannabilism,襟翼,可避免24

继降低维护管理的丁丙诺啡麻醉1%异氟醚(1L/min时O 2)。

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Representative Results

比大动物模型大鼠模型更经济,36抗病性和基因操纵。松散的皮肤的动物,如啮齿类动物,被认为具有不同的安排相比,固定皮肤的动物如人类和猪的皮肤的血液供应。在宽松的皮肤的动物,皮肤直接皮肤血管,通过皮下脂肪相比之下覆皮肤( 图4),主要提供固定剥皮的动物派生皮肤的血液供应,通过船只,当然通过底层肌肉提供覆包膜通过肌穿孔机( 图4)。因此,松散皮肤的动物是否可以用在皮瓣研究的关注。然而,泰勒的上angiosomes的工作表明,在隐蔽区域的大鼠皮肤,通过肌穿孔机以类似的方式为人类提供。该前腹壁横形腹直肌肌皮瓣(TRAM)是基于这样的一个区域。37,36,15

相关解剖

优越,深,的上腹血管是占主导地位的血管蒂在大鼠和六到十打孔器通过腹直肌鞘前壁提供覆包膜。13,15优越的深上腹血管在大鼠的水平进入腹直肌剑突继续,减少口径,向耻骨。腹部前侧缘提供的肤浅的劣势和腹壁上,髂骨血管37之间的地区提供这些直接皮支和肌打孔器通过扼流船只提供这些领域的包膜是生理性的重叠。38本是一致的解剖和生理血管领土中描述的人类的,但在人的占主导地位的血管蒂39是,而非腹壁上动脉逊色。

横向腹直肌肌皮瓣(TRAM)

横向腹直肌皮瓣重建,1974年乳腺癌根治术后40此基础上腹壁深血管皮瓣,并采用了部分的腹直肌和覆包膜。 TRAM皮瓣在这篇文章中,将其分为四个相等的区域称为区域。它们的编号I-IV为每Schlefen 等。例如:I区(ZI)外皮覆直接由血管蒂腹直肌;区II(ZII)描述包膜覆盖对侧腹直肌区III(ZIII)区域横向I区和第四区(ZIV)II区的区域横向(见41 5)。

激光多普勒成像评估血液灌流

激光多普勒成像技术提供了一种非侵入性的方式评估皮瓣的血流量。42-45单色光源发出的激光头。入射的光( 图6中的蓝色)被转移的组织内的红细胞。位移的程度与红细胞的速度。移光( 图6中的绿色)的扫描头内的光检测器检测,并转换成测量灌注。在这些给定的以任意单位,灌注单位(PU),很像一个天气图,其中灌注的图像数据转换成指定的颜色( 图7)从高向低,且每个值分级。产生彩色地图,说明相对灌注不同区域之间的皮瓣。每台仪器仔细校准苏CH比较可以是主体之间采用相同的扫描仪

大鼠进行激光多普勒血流灌注成像使用荒原LD12(摩尔仪器,英国埃塞克斯郡)扫描仪手术前,术后即刻,并在24和48小时后手术。

使用该软件提供的LDI扫描仪是可以叠加的到LDI图像的感兴趣的区域(ROI),计算该区域( 图7)的平均灌注。

图像J面积百分比坏死主要转归指标分析

图像J是一个开放获取的图像处理程序的全国学院Health.46的礼貌这可以被用来测量区和随后的每个区,在每个时间点是正常的或完全坏死的皮肤面积百分比计算( 图8)

损伤评估

该皮肤坏死率最高的第四区(参见图9图10中的有代表性的数据)与其他研究一致发现,16,22,24,25,47这些发现与坏死的格局,临床报告证实在人类TRAM皮瓣临床上的问题,这是一个忠实代表14的总面积百分比皮瓣坏死率为37.86±5.4%(平均值±SEM)。

皮肤的血液变化

LDI TRAM皮瓣模型,用来评估血流灌注扫描。这是一个简单的,非侵入性和可重复性评估灌注手段( 图9图11)。灌注下降至58.4±0.49%(N = 10, 平均值±标准差),术后即刻,56.98±0.41%,在24小时和92.4±0.6%相比,整个皮瓣手 ​​术前的值。皮瓣无线领域日最低灌注在术后即刻和24小时扫描表明地方坏死随后将发展为48小时( 见图9)。

图1
图1。设备设置。麻醉钻机用红色感应室后面看到办公桌。通过鼻锥维持麻醉大鼠仰卧。热灯是用来提高环境温度。上述的大鼠在手术显微镜。大鼠的左侧是一个无菌的悬垂性用纱布,缝合线等的大鼠的右侧是与外科手术器械无菌的悬垂性。核心温度保持使用homeothermic的毯子(下大鼠)和直肠探头连接到哈佛仪器设备(黑盒前面的锐器斌)。

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图2。标记瓣边界和区域。脱毛大鼠置于平卧。中线识别和标记(蓝色虚线)。 A线标记垂直于剑突下方的中线0.8厘米。 4画线平行于中线,1厘米。最后绘制平行线和4厘米以下的第二行完成的平方。 点击这里查看大图

图4
图3。一步一步的手术方法如前所述(3A),皮瓣划定。左外侧缘切开(3B)和解剖内侧继续在排位甲烷立即肤浅左腹直肌外侧缘(3C)前腹壁筋膜。对侧同样的步骤进行,但解剖继续内侧的白线 (中线),(3D)。烧灼而产生的中心右腹直肌肌穿孔机。一个小窗口被切断左腹直肌鞘(3E)绑了(3F)和下直肌在劣势方面。矽胶片的地方下面的筋膜的皮瓣(3G H)部分切去,然后缝合。皮瓣,然后'挂'出来(3-I)。可以执行步骤(3G和 I)之前或之后的步骤(3EF)。一个小窗口,被切断的左腹直肌鞘前壁(3-J)在优越的方面。暴露的肌肉,然后仔细检查。将会看到内侧肌纤维轨迹的改变平行斜松散的纤维排列紧密。通过这些肌肉飞机之间的的弧形Graeffe钳钝性解剖横向。砍下封闭,这些镊子上表面上暴露的血管蒂。取出周围脂肪和血管暴露夹紧。阿克兰夹上的动脉和静脉(3K)和缺血时间倒计时期间。启动皮下缝合,立即离开该区域上面的夹子,直到最后。在分配的期间后,取下夹子,左腹直肌的自由端并置。填写皮下缝合(3L)。

图5
图4。固定和适度宽松的剥皮的动物的皮肤血液供应皮肤的血液供应洛斯É皮肤的哺乳动物如老鼠主要是通过直接皮支,而不是固定皮肤哺乳动物如人类和猪的肌打孔器。出于这个原因大鼠没有历史上一直青睐的整形外科研究。这已被证明是一个过时的概念和具体领域如鼠腹前壁肌打孔器提供,因此适用领域用于襟翼车型。 点击这里查看大图

图6
图5。区域的横向腹直肌肌皮瓣由Schlefen 在1983年,红色箭头表示的血管蒂(在这种情况下,左,卓越,深上腹血管)。蓝色罗马数字表明他4个区编号为I-IV基于对他们的相对位置的血管蒂,这样的:I区(ZI)外皮覆直接由血管蒂腹直肌;区II(ZII)描述包膜覆盖对侧腹直肌,三区(ZIII)横向区域横向I区和第四区(ZIV)II区。

图7
图6。激光多普勒成像扫描仪。穆尔LD12扫描器评估灌注通过发出单色光(蓝色箭头),这是由皮肤内的红细胞移动转移的来源。位移的程度与红细胞的速度。此移光(绿色箭头)被检测到由光扫描仪和计算在该领域的灌注。一面镜子,然后将光束以连续的方式,使整个前腹壁可以扫描约7分钟。

图2
图7。评估平均灌注使用LDI软件。选择多边形的图标从工具栏中(红色箭头),然后感兴趣区域(ROI)选择工具(蓝十字的矩形,多边形工具右侧2个图标)。使用鼠标绘制的投资回报率,这个数字在所有4个区域标记。移动到下一个投资回报率之前再次点击蓝色正方形的矩形。一旦所有的期望的投资回报率选择按统计图标工具栏的中心(一个记事本的图标,用数字就可以了),平均灌注统计每个投资回报率,将弹出一个新的窗口,如图所示。

图8。图像J分析。

> 图8-1
图8-1。图片J-选择直线工具,选择直线工具,绘制一条线下来皮瓣的中心。 点击这里查看大图

图8-2
图8-2。图片J-SET规模选择分析工具栏,从下拉菜单中选择“设置规模。 点击这里查看大图

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图8-3。图片J-SET规模2,在弹出窗口中设置的规模至4厘米。 点击这里查看大图

图8-4
图8-4。图片J-选择多边形工具和大纲感兴趣的区域,选择多边形工具(高亮的图标),并勾勒出感兴趣的区域。 IV区的总周长,在这个例子中所述。 点击此处查看大图

“始终”> 图8-5
图8-5。图片J-测量面积1。选择从工具栏上的下拉菜单中选择测量分析, 点击这里查看大图

图8-6
图8-6。图片J-测量面积,这个区域将被显示在一个单独的结果窗口中点击这里查看大图

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图8-7。图片J-重复面积满坏死。重复前面的步骤,但仅此一次勾勒坏死区。这个例子显示坏死区四概述。要计算坏死面积百分比由前将后者的值,并乘以100。 点击这里查看大图

图9
图9所示。代表图像蒙太奇此过程。标题:每行代表一个不同的主题。照片,图片(左)和相应的LDI的图像(右)示出在4个不同的时间点(从文件英尺右:手术前,术后24小时,在手术后48小时)。很显然,不断发生,在坏死区Ziv和三。色阶的右下角显示的颜色和其相应的灌注单位。红高灌注,蓝色低灌注) 点击此处查看大图

图10
图10。代表结果的皮肤坏死皮瓣总面积的百分比在48小时表达。标题:占面积的皮瓣坏死临床评估,并使用图像J软件在48小时测量。平均显示和扫描电镜(SEM), 每组10只

图11
图11。精华余丹丹结果激光多普勒成像标题:激光多普勒成像显示测得的平均灌注,灌注单位的皮瓣在对照组手术前,手术后,在24小时和48小时。平均显示和扫描电镜(SEM), 每组10只

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Discussion

修改和故障排除

这里介绍的协议看到游离组织移植在实验系统中再现的IRI能够进一步了解这一进程,并提供了一​​种方法,调查手段,改善IRI和改善结果。这可以很容易地修改,以产生更严重的伤害,如果它的基础上不占优势,深,腹壁下带蒂或如果缺血时间增加。

技术的限制

对大鼠腹前壁有显著比大多数女性接受TRAM皮瓣乳房重建手术前腹壁皮下脂肪少。在这个文本概述该模型是专门为肌皮瓣缺血再灌注损伤模型的预处理治疗效果可以使皮肤坏死和灌注结果的措施进行评估。该在这篇文章中详述的程序没有具体模型问题,如脂肪坏死时,所产生的人类TRAM皮瓣皮瓣显着的脂肪成分是故意收获创建投影大乳房重建。

在这个协议中没有表现出直接在体内微循环观察,但已经提睾肌模型48和骨肌皮瓣7,49-51电车模型是一个皮瓣模型,如果研究人员特别感兴趣的骨肌皮瓣此模型是适当的,但在文献中已经描述了另一种模式50。

相对于其他的方法中的意义

大多数已发表 ​​的大鼠的电车模型使用腹直肌选择为载体的血管蒂血管蒂周围13-22,24,25他们这样做不符合urately反映IRI皮瓣是从来没有经历真正的缺血再灌注期间。因此,在这个协议中详述的模型给出了重现性好,控制肌IRI这些文件。研究人员还进行腹股沟的血管,23然而,这在技术上是极其苛刻的深优越,上腹动脉和静脉措施0.45毫米和0.5毫米,分别为游离皮瓣。此协议是一个简单的模型。

未来的应用

游离组织移植在改善预后的研究主要集中在预处理策略。采用这些策略或手术前发起的“培训”转移组织承受更好的游离组织移植手术,改善预后的目的。有两种主要的方法可以做到这一点:药理或缺血预处理52这项工作有很多。猪这是更昂贵的房子,比老鼠更难以奏效。可用于本文所描述的协议,来测试这些策略在实验动物,这是很容易的房子和工作,并在其中有可能与基因操纵动物。

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Disclosures

我们没有披露。

Acknowledgements

这个工作是由医学研究委员会授予G1000299。

相应的作者要感谢协助在手术过程中,爱丁堡大学的加里·博思威克。

笔者想从海伦·道格拉斯和麦荣恩确认意见,并允许我们观察到其深腹壁(DIEP)皮瓣法(Canniesburn整形外科单位,格拉斯哥皇家医院,84城堡街G4 0SF,格拉斯哥,英国)。

作者还要感谢他的帮助下对这篇文章的视频在爱丁堡大学的加里·布莱基。

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Moor LD12 laser doppler imaging scanner http://gb.moor.co.uk/product/moorldi2-laser-doppler-imager/8
Complete homeothermic blanket system with flexible probe. Small. 230 VAC, 50 Hz 507221F www.harvardapparatus.com
Graeffe forceps 0.8 mm tips curved 11052-10 2, http://www.finescience.de
Acland clamps 00398 V B-1 ’V’ pattern clamps used on both artery and vein. http://www.merciansurgical.com/acland-clamps.pdf
Clamp applicator CAF-4 http://www.merciansurgical.com/acland-clamps.pdf
Gemini cautery unit 726067 www.harvardapparatus.com
Micro-vessel dilators 11 cm 0.3 mm tips 00124 D-5a.2 http://www.merciansurgical.com
Micro Jewellers Forceps 11cm angulated 00109 JFA-5b http://www.merciansurgical.com
Micro Jewellers Forceps 11 cm straight 00108 JF-5 http://www.merciansurgical.com
Acland Single Clamps B-1V (Pair) 396 http://www.merciansurgical.com
Micro Scissors Round Handles 15 cm Straight 67 http://www.merciansurgical.com
Iris Scissors 11.5 cm Curves EASY-CUT EA7613-11 http://www.merciansurgical.com
Mayo Scissors 14 cm Straight Chamfered Blades EASY-CUT EA7652-14 http://www.merciansurgical.com
Derf Needle Holders 12 cm TC 703DE12 http://www.merciansurgical.com
Ethilon 5-0 W1618 http://www.farlamedical.co.uk/
Vicryl rapide 6-0 W9913 http://www.millermedicalsupplies.com/
Instrapac - Adson Toothed Forceps (Extra Fine) 7973 http://www.millermedicalsupplies.com/
Castroviejo needle holders 12565-14 http://s-and-t.ne
Heat Lamp http://www.chicken-house.co.uk
Silicone sheeting 0.3 mm translucent http://www.silex.co.uk/
Image J software http://rsbweb.nih.gov/ij/
Zeiss OPMI pico http://www.zeiss.co.uk/
Operating microscope
Vet tech solution isofluorane rig http://www.vet-tech.co.uk/
Vet tech solution isofluorane rig http://www.vet-tech.co.uk/

DOWNLOAD MATERIALS LIST

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