Helsinki Rat Mikrocerrahi Yanduvar Anevrizma Modeli

1Neurosurgery Research Group, University of Helsinki, Helsinki, Finland
Published 10/12/2014
0 Comments
  CITE THIS  SHARE 
Medicine

Your institution must subscribe to JoVE's Medicine section to access this content.

Fill out the form below to receive a free trial or learn more about access:

Welcome!

Enter your email below to get your free 10 minute trial to JoVE!





By clicking "Submit", you agree to our policies.

 

Summary

Cite this Article

Copy Citation

Marbacher, S., Marjamaa, J., Abdelhameed, E., Hernesniemi, J., Niemelä, M., Frösen, J. The Helsinki Rat Microsurgical Sidewall Aneurysm Model. J. Vis. Exp. (92), e51071, doi:10.3791/51071 (2014).

Please note that all translations are automatically generated.

Click here for the english version. For other languages click here.

Abstract

Deneysel sakküler anevrizma modeller klinik uygulamaya girdikten önce yeni cerrahi ve endovasküler tedavi seçenekleri ve test cihazları için gereklidir. Ayrıca, deneysel modeller sakküler anevrizma yırtılmasına yol açan karmaşık anevrizma biyolojisini aydınlatmak için gereklidir.

Sakküler anevrizmalar için deneysel modellerin birkaç farklı türde farklı türlerde kurulmuştur. Birçoğu, ancak bunların yaygın kullanımını sınırlayan, özel beceriler, pahalı ekipman veya özel ortamları gerektirir. Basit, sağlam ve ucuz deneysel model çeşitli kurumlarda standart bir şekilde kullanılabilecek bir standart araç olarak gereklidir.

Mikrocerrahi sıçan abdominal aort anevrizması yanak modeli yeni endovasküler tedavi stratejileri ve bir standart ve ucuz anevrizma biyolojinin moleküler temelini hem çalışma imkanı birleştirirşekilde. Şekil, boyut, ve geometrisi ile standardize edilmiş bir greft verici sıçan torasik aort inen hasat edilir ve daha sonra bir alıcı, singenik fareye transplante edilir. Anevrizmalar Sürekli ile uç-yan dikildi veya infrarenal abdominal aort 9-0 naylon sütür kesilir.

Biz gerekli ekipman adım adım prosedür talimatlarını, bilgi sunma ve sıçan abdominal aort anevrizması yanak başarılı mikrocerrahi oluşturulması için önemli anatomik ve cerrahi ayrıntılarını görüşmek.

Introduction

Sakküler serebral arter anevrizma rüptürü inme, kalıcı nörolojik hasar veya ölüme hayatı tehdit kanama neden olur. Kopma mikrocerrahi olarak kliplenmesiyle veya endovasküler anevrizma tıkanması ile önlenebilir. Anevrizma büyüme ve delinmesine önlemek için tıbbi bir tedavi henüz kurulmamıştır.

Sakküler anevrizmalar için deneysel modeller arter anevrizması ve yeni tedavi cihazları ve stratejilerinin test edilmesi için biyoloji eğitimi gereklidir. Bu amaçlar için, farklı türlerde birçok farklı modeller geliştirilmiş ve 1 yayınlanmıştır. Domuz, köpek, tavşan ve daha büyük modeller anevrizma, tercihen kompleks anevrizma mimari 1,2 endovasküler yenilikleri test etmek için kullanılır. Murin anevrizma modelleri, diğer taraftan, genetik olarak modifiye edilmiş türlerin 3,4 araştırma sorular test olanak sağlar ve hücresel ve moleküler biyoloji anevrizma açıklık kolaylaştırmakbüyük türlerin 1 çok daha iyi seviyeye. Endovasküler trans-karotis ve trans-iliak cihaz dağıtım büyük sıçanlara sınırlı (> 400-500 g) ve daha küçük 2.0 mm ve çapı 5,6 1.5 mm stent kullanımı olmasına rağmen, stentler de karın aort içine doğrudan yerleştirilmesi ile konabilir Deneysel anevrizmalar barındıran bölüm. Sıçan mikrocerrahi abdominal aort anevrizması yanak modeli kullanılarak Önceki iş test roman embolik cihazlara uygulanabilirliğini ve anevrizma biyoloji 3,7 moleküler temelini okuyan kullanımını gösterdi.

Şu anda yayınlanan deneysel sakküler anevrizma modelleri birçok pahalı donanımları, özel ortamlar (floroskopi yetenekleri ile örneğin steril ameliyathane), girişimsel radyoloji yetkinlik, ya da pahalı türlerin kullanımını gerektirir. Bu gereksinimler bu modellerin yaygın kullanımını sınırlamak ve m farklı laboratuvarlarda, farklı modellerin kullanılmasına yolakes veri karşılaştırma ve meta-analizi imkansız değilse, zor. Basit, sağlam ve ucuz deneysel model, farklı kurumlardan karşılaştırılabilir sonuçlar elde etmek için çeşitli laboratuarlarda standart bir şekilde kullanılabilecek bir standart araç olarak gereklidir. Bu amaçla, biz sıçan aort yanak sakküler arter anevrizma modeli yarattık.

Bu raporun amacı, gerekli ekipman adım adım prosedür talimatlarını, bilgi sunma ve sıçan abdominal aort anevrizması yanak başarılı mikrocerrahi oluşturulması için önemli anatomik ve cerrahi özelliklerini tartışmaktır.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

Not: Erkek Wistar sıçanları (vücut ağırlığı ortalama 356 ± 44 g, 10-14 haftalık), 22-24 ° C ve on iki saat ışık / topak içeren bir diyete serbestçe erişimine, normal musluk suyu ile karanlık çevriminde hayvan odasında yuvalandırılmış ve ayrıca kurumsal kurallarına uygun olarak insancıl bakıma aldı. Deneyler yorumlanan ve Helsinki, Finlandiya Üniversitesi Hayvan Refahı Komitesi tarafından kabul edildi.

Not: medetomidin hidroklorür (0.5 mg / kg) ve ketamin hidroklorür intraperitoneal enjeksiyonu (50 mg / kg) ağırlık uyarlanmış deri altına enjeksiyon ile sıçan anestezisi: Aşağıdaki tanıtımda cerrahi yöntemi aşağıdaki gibidir. Bir ayak tutam refleksi eksikliği için test sıçan tamamen uyuşturulduktan doğrulamak için. Örneğin, klorheksidin için, ya alkol ya da su, göz merhemi sürün cerrahi siteyi klibi, ve uygun bir dezenfektan ile cildi temizleyin. Koruyucu giysiler, bir baş örtüsü ve yüzünde koymak, ellerinizi yıkayınmaske ve steril cerrahi eldiven. Aseptik cerrahi koşullar muhafaza cerrahi bir asistan yardımı ve (Tablo 1 listelendiği gibi) cerrahi özelliklerini belgelemek. Zararlı uyarılmanın (ayak tutam testi) solunum hızı, kalp hızı ve reaksiyonu takiben cerrahi sırasında anestezi her 15 dk derinliğini izleyin. Buprenorfinin (0.03 mg / kg) deri altına enjeksiyon sonrası analjezi için verilir ve her 12 saatte gerektiğinde tekrarlanmıştır.

1. Donanım, Sarf ve Konumlandırma

  1. , Sessiz küçük hayvan ameliyathane tutun aseptik ve 23 +/- 3 ° C'de oda sıcaklığını korumak. Aşağıdaki minimal teçhizatı gerekli deneysel anevrizma ameliyatı gerçekleştirmek için:
    1. Ideal bir asistan kapsam ve dijital mikroskop kamera ile donatılmış bir masa üstü cerrahi mikroskop kullanın. Laboratuar tezgah korumak için gözeneksiz yeniden çalıştırma yüzeyini ve temizlenebilir enstrüman yüzeyini kullanın.
    2. Cerrahi makas, doku forseps, yumuşak doku yayıcı veya kendini tutan retraktörü ve iki Sivrisinek cerrahi sıkıştırmalar: Aşağıdaki standart cerrahi aletler kullanın.
    3. Kavisli mikroiğne tutucu, kavisli bir ve iki düz microforceps ve düz veya kavisli microscissor: Bir içermektedir temel mikrocerrahi enstrüman seti kullanın.
    4. , Ameliyat sırasında, yapışkan olmayan ve temiz aleti tutmak için steril tuzlu su ile dolu bir böbrek tabak mikrocerrahi aletleri tutun. Böbrek çanak kauçuk paspas veya mikro-araçların ipuçları zarar görmesini önlemek için cerrahi eldiven ile doldurulur. Tüm malzemeleri steril ve prosedür laboratuvar hayvanları üzerinde sağkalım cerrahi için geçerli önerilere göre aseptik tekniği ile yapılır emin olun
    5. Buna ek olarak, damar klip aplikatör üç atravmatik geçici vasküler kelepçe kullanır. Kullanılan kelepçeler sıçan aort çok ince duvara yaralanmasını önlemek için düşük kapanış güce sahip olması önemlidir. Ayrıca yarım milimetre çaplı barlar, küçük renkli lastik pedi, ve kısa bir künt bir iğne ile bir cetvel hazırlar.
    6. , Yatar pozisyonda sıçan yerleştirin hem ön hareketsiz ve deri streç veya sıkıştırma uygulamadan cerrahi bant ile arka pençeleri ve arka kereste bölgenin altında koyarak kalın bir işaretleyici veya koter kalem ile geri eğmek. Bu mikrocerrahi anastomoz kolaylaştırır infrarenal aorta retroperitoneal pozlama ve erişimi geliştirmek için mümkün olduğu kadar lomber omurga lordozu elde etmek önemlidir. Bu konumlandırma abdominal aort anevrizması oluşturulması için önerilen ancak toraks greft için gerekli değildir.

2. Greft Hasat

  1. Under genel anestezi, göğüs boşluğu açın (greft iskemi başlangıç ​​zamanı). Sıçan aşağıdaki adımlara geçmeden önce tepkisiz olduğunu doğrulamak için bir zararlı ayak tutam uygulayın. Midventral karın duvarından kesme, sadece karaciğer üzerindeki diyaframı belirlemek ve göğüs kafesi erişim sağlamak için diyafram altındaki bağ dokusu kesilir. Kaburga kesti büyük makas, aşağı künt tarafı, sadece bir santimetrelik sol ve göğüs kafesi orta hat sağ ve göğüs boşluğu açmak. Akciğerler kalbin sağ tarafına seferber edilir. Ketamin hydrochloride.Pulmonary gövde, sol subklavian ven intrakardiyak enjeksiyon, sol kranial vena kava ile doz aşımı ile sıçan Kurban ve azygous ven proksimal torasik aorta hasat müdahale.
  2. Kuyruk belirgin damarlar mikro-makas ve microforceps kullanarak inen torasik aort diseksiyonu başlamak için iyi bir giriş noktası vardır.
  3. Aorta b Traceyukarı Sivrisinek cerrahi kelepçe ile nazik künt retraksiyonu ve diseksiyon ile aort kemer toraks dorsal duvarından ack.
  4. Kelepçe ve sonra makasla damarları kesilmiş. Damarlar üzerinde kelepçeler korumak ve altta yatan aort arkı duyurmak için bir ekartör olarak kullanmak.
  5. Sadece aorta bırakarak birinci interkostal arter üzerinde bir emilemeyen 6-0 ipek ligatürün yerleştirin.
  6. Sadece sol subklavyan arterin altında ve daha sonra dikilen altına inen aorta kesin. Kırpma dik standart anevrizma geometri almak için yapılabilir, ya da gerekirse, anevrizma ve aort ekseni arasındaki belirli bir açıyı elde etmek. Genişliği ve uzunluğu greft ölçün.
    Not: Hasat edilen greft ya hemen alıcı farelere nakledilen ya da daha fazla aşı duvarın decellularization elde etmek için işlenebilir. Decellularized greftler daha sonraki bir tarihte tekrar implantasyonu (Şekil 1) kadar -4 derece santigrat saklanabilir. Thanevrizma duvarının E decellularization 11 büyütmek için anevrizmayı yatkınlık gösterilmiştir.

3. Greft Decellularization

  1. Donma verici greft fosfat içinde -4 ° C 'de tamponlanmış tuzlu su.
  2. Ertesi gün, greft çözülme, oda sıcaklığında saflaştırılmış ve iyonu giderilmiş su ile durulama ve% 0.1 sodyum dodesil sülfat, 37 ° C'de 10 saat boyunca inkübe edilir.
  3. Son olarak, yumuşak çalkalama ile sodyum dodesil sülfat ile muamele edilmiş greftler üç kez yıkayın, fosfat tamponlu tuzlu su içinde dondurulabilir ve tutmak -4 ° C'de kullanılana kadar.

4. Anevrizma Yaratılış

  1. Karın Aort diseksiyonu
    1. Hayvan anestezi edildikten sonra, cerrahi siteden kürk klibi ve uygun bir dezenfektan ile cildi temizleyin. Önce cilt kesisi bir ayak tutam yanıt eksikliği için test. Genital kesi 1cm proksimal başlayın in midventral pozisyonu (çalışma başlangıç ​​zamanı). Dikkatle yatan kasları cilt ayırmak. Sternum altında iki santimetre bir ucu diseksiyon.
    2. Dikkatle ama sıkı temel organlarının zarar görmesini önlemek için altta yatan karın kasları yukarı çekin. Kılıç şeklinde sürece yukarı linea alba boyunca boylamasına kesitini uzanır ve mesane düzeyinde kaudal yönünde biter.
    3. Yavaşça retroperitona erişimi kolaylaştırmak amacıyla boşaltmak için mesaneye baskı uygulamak.
    4. Küçük bağırsak, sağa veya sola doğru belirgin çekum hareket ettirin. Karın boşluğunun sol alt büyük barsağı yani inen kolon tanımlayın.
    5. Dorsal gövde duvarının daha geniş bir etkileşim sağlamak için ince bağırsak ve beyin yönünde inen kolon arasındaki bağ kesin. Dışında bağırsakları tutmak için kendini tutan ekartörünü yerleştirin.
    6. Uç-yan anastomoz anevrizma i ideal konumuböbrek ve iliolumbar damarlar arasındaki düzeyde bulunan s. Abdominal aort yağ dokusunda gömülü retroperitoneal yatıyor. Diseksiyonu sırasında eşleştirilmiş neredeyse şeffaf üreterler ve testis damarlarının özellikle dikkat.
    7. Bağırsakların fazla küçültme gerekli ise, daha büyük bir gazlı bez takaslarını kullanın. Sıçan alt sırt altına bir koter kalem veya benzer bir cisim yerleştirerek konumlandırma sırasında uyarılan lomber omurga lordoz, önemli ölçüde bağırsak retraksiyonun ihtiyacını azaltır.
    8. Dorsal gövde duvarının ventral yüzeyi ince pariyetal periton ile kaplıdır. Bu açıldığında, sadece altında aorta görselleştirmek. Bitişik büyük damarlar abdominal aort dikkatli keskin ve künt diseksiyon sırasında damar duvarına zarar vermemek için sadece adventisya kavramak.
    9. Nadiren, küçük lomber arterler abdominal aorta dorsal yüzeyinden segmental gemisi olarak ortaya çıkan ve hazırlık ile müdahale. Geminin bağlama ve kesilmiş J`o`kflanevrizma dikiş atma sırasında retrograd sızmaya önlemek için ded. Kavisli mikro forseps kullanımı derinlemesine bağ yerleştirme kolaylaştırabilir.
  2. Uç-yan Anastomoz
    1. Abdominal aort altında renkli bir lastik pedi koyun ve küçük bir gazlı bez çubukla ile döşemek. Planlanan anastomoz seviyesinde gevşek bağ dokusu ve adventisya çıkarın.
    2. , Sonra proksimal anastomoz için abdominal aort distaline Kelepçe (aort sıkma başlangıç ​​zamanı). Bu ise haznedeki sağlam bir şekilde doldurulmasını sağlar ve daha sonra arteriyotomi kolaylaştırır.
    3. Düz veya kavisli mikro-makas kullanılarak arteriyotomi gerçekleştirin. Bir mikro-forseps, elips şekline kesmek için damar duvarının çok küçük bir parçasını tutar.
    4. Künt uçlu iğne kullanılarak her iki yönde de tuzlu su ile iyice yıkayın arteri.
    5. (Arteriyotomi yakın ve uzak sonunda bu uç-yan anastomoz ilk iki stürler anastomoz başlangıç ​​zamanı). Mümkün mikro forseps ile damar duvarı tutmaktan kaçının. Her ameliyat dikiş ipliği, damar duvarının tüm katları boyunca yerleştirildiğinden emin olun.
    6. Ya sürekli ya da kesintili sütür olarak dikilmesi gerçekleştirin. Kesintiye dikiş seçilirse ilk sonra arka taraftaki dokuz o'clock dikiş yerleştirin. Daha sonra dikiş ilk dikişine bitişik başlangıç ​​birbirinden aralıklı olabilirler. Dikkatli adventisya kavrayın. Intima herhangi sıkma / tutulmasımn kaçının.
    7. Arka duvar tamamlandığında, yanlış dikişler için anastomoz endolüminal bölümünü kontrol edin. Ön tarafta, aynı sıra ile aynı prosedürleri gerçekleştirin. Sütür başına üç düğüm toplam ilk çok sıkı sağlam değil ama emin olun.
  3. Hemostaz ve Kapanış
    1. Yan anastomoz için uç (uca anastomoz süresi) tamamlandıktan sonra, tuzlu su ile yıkayın ve sitesi (geri akış sağlamak için birinci uç, aort ve bitiş aşı iskemi Ti kıskaç uzak kelepçe kaldırmakbana).
    2. Bariz kanama ekstra bir dikiş gerekebilir backflow dan oluşursa (hemostaz başlangıç ​​zamanı). Küçük sızma durumunda, bir gazlı bez çubukla küçük bir parça kullanılarak kanama sitesi üzerinden hafif basınç ile hemostaz.
    3. , Proksimal vasküler kelepçeyi sökün kez daha anastomoz siteyi durulayın ve anevrizma kubbe de dikilen kalan uçları kesilmiş.
    4. Pik arteriyel nabız dalgası sırasında anevrizmanın hacmi artış gözlenmesiyle anevrizma açıklığını onaylayın. Doğrudan "sağım testi" aracılığıyla uzak karın arter açıklığını değerlendirin.
    5. Plastik levha ve altında küçük gazlı bez çubukla çıkarın. Oluşturulan anevrizma içinde titreşen kan koşuşturma açıkça görülebilir.
    6. Küçük sızıntı hala mevcut olup olmadığını (hemostaz bitiş zamanı) ek hemostaz için adipoz doku veya Spongostan küçük parçalar ile anastomoz etrafında dikiş hatları kapsayacak.
    7. Yumuşak doku serpme ve gazlı bezlerden çıkarın.Lütfen kendi doğru pozisyonda, küçük bağırsak, çekum ve yağ kütlesi yerleştirin.
    8. 5-0, 4-0, veya 3-0 3-0 emilebilir polyfilament sütür (bitiş çalışma süresi) sürekli sütür tekniği kullanılarak deri yara kapanmasının ardından emilebilir veya non-emilebilir dikişlerle kullanarak orta hat karın kasları kapatın. Not: bizim deneyim fareler emilmeyen monofilament sütür daha iyi emilebilir dikişlerle deri tolere olarak.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

Bir pilot serisi 14 sıçan oluşmaktadır. Ardından 84 hayvanların toplam 2012 ek 29 hayvan arteriyel sakküler greftler için donör olarak görev Mart ve Eylül ayları arasında çeşitli araştırma projeleri için sunulan protokole göre ameliyat edildi. Kalan deneyler hasat edildi ve aynı cinsiyet, ırk, kilo, yaş ve sıçanlar üzerinde yapılan daha önceki deneylerde saklanan ön-muamele edilmiş greft kullanılarak yapıldı.

Vücut ağırlığı, genel çalışma süresi, aort klemp zamanı, anastomoz yaratılması için zaman, zaman anastomoz oluşturulması, greft iskemi süre sonra Hemostaza ve yaratılış zamanında (anevrizma genişlik ve uzunluk) anevrizma boyutları kaydedilmiş ve yazılı vaka rapor formlarında elde edildi . Tüm özellikleri özetlenen ve Tablo 1 ve Şekil 1 görselleştirilmektedir.

Nedeniyle abdo trombozdur bir ikinci operasyon yapıldı bir hayvan haricindeanastomoz için terminali aort uzak Periprosedürel mortalite ve morbidite vardı. Ortalama ameliyat süresi daha az 52 dakika (52 ± 12 dk) oldu. Singeneik anevrizması nakli ile hayvanlarda (n = 21) greft iskemi süresi 29 ± 7 dk idi. Genel ortalama aort klemp zamanı 25 ± 7 dk. Boyutu, düşük sapma ile sabit olduğu ortaya anevrizma ölçüleri (genişlik 2.5 ± 0.2 mm ve ortalama uzunluğu 3.8 ± 0.2 mm ortalama).

Toplanan veriler istatistiksel yazılımı kullanılarak tanımlayıcı analizi ve görselleştirme uygulandı. Değerler ortalama ± standart sapma (SD) ve% 95 güven aralığı (CI) olarak ifade edilmiştir.

Şekil 1
Şekil 1:. Non-decellularized veya decellularized Greftler torakal aort İşlenmemiş doğal donör greft hemen alıcı farelere yeniden implante edilir (1). Greftler olduğuhücresizleştirilmiş yeniden implantasyondan kadar sodyum dodesil sülfat (SDS), depolanan en -4 derece Celsius ile muamele edilir (2). Histolojik paneli bir işlenmemiş (sol) ve hücresizleştirilmiş (sağ) aşı duvarı boyunca bir uzunlamasına kesiti gösterir. Hematoksilen-Eozin boyama.

Şekil 2
Şekil 2: Cerrahi Özellikler. Grafikler tek veri değerlerinin dağılımı (küçük siyah noktalar), veri ortalama (kalın uzun çubuk) ve standart sapma (hata çubukları) görselleştirmek. , bu rakamın büyük bir versiyonunu görmek için lütfen buraya tıklayınız.

Karakteristik Ortalama ± SD Üst% 95 CI - düşük
Ortalama vücut ağırlığı (gram) 363 47 350-373
Ortalama ameliyat süresi (dakika) 50 11 48-53
Aort sıkma süresi ortalama (dakika) 25 7 23 - 27
Anastomoz süresi ortalama (dakika) 18 6 16 - 19
Hemostaz süresi ortalama (dakika) 2 2 2 - 3
Greft iskemi süresi ortalama (dakika) 29 7 26-32
Anevrizma genişliği (milimetre) ortalama 2.5 0.2 2,4-2,5
Anevrizma uzunluğu (milimetre) ortalama 3.7 0.5 3,5-3,8

Tablo 1: Cerrahi Özellikleri. SD: standart sapma; CI = güven aralığı

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Sakküler serebral arter anevrizması karmaşık biyoloji anlayışımızda ilerleme hayvan modellerinde 3,12,13 hasta numunelerinin ve deneysel çalışmaları laboratuvar çalışmaları ile tamamlanmaktadır epidemiyolojik ve klinik verilerin analizine bağlıdır.

Gibi sıçan gibi küçük hayvanlar doğal deneyler ve konut düşük maliyetler ile ilişkili, ve özel ekipman ihtiyacı azalır. Sıçanlarda bir yanak anevrizma mikrocerrahi yaratılması için en az 60 dakikalık bir ortalama toplam çalışma süresi tavşanlarda ve köpeklerde 2,14,15 daha karmaşık mikrocerrahi venöz kese arter bifurkasyon anevrizması oluşturulması için kullanılan zaman daha kısadır. Düşük maliyetle ve daha hızlı bir anevrizma oluşturma yöntemleri avantajları deney daha fazla sayıda ve daha sonra yüksek güç ile istatistiksel çalışmaların iletimini kolaylaştırabilir. Ayrıca, geçerli fare modelleri başarıyla Researc cevap uygulanmıştır transgenik hayvanların 3,4 olmak üzere daha gelişmiş laboratuvar metodoloji, gerek h sorular. Yanak anevrizmaların oluşturulması için fareler kullanırken kesintiye ihtiyaç 11-0 sütür ek mikrocerrahi beceri gerektiren bir ihtiyaç akılda tutmak. Farelerde sunulan anevrizma modelin performansı da yüksek mortalite oranları ile ilişkilidir (30%; başlıca nedeni ve sıvı dengesinin anestezi ve fare aort çapı daha küçük (0.5-1 mm) komplikasyonlara) 3.

Sıçan anevrizma modelinin temel ilkeleri kısa bir süre içinde hakim olabilir. Kemirgen mikrocerrahi bir giriş dersidir bir ameliyat mikroskobu altında disseksiyonların ve dikiş teknikleri gerçekleştirirken tecrübesiz olanlar araştırmacılar için tavsiye edilir. Sunulan protokol vurgulanan önemli adım daha prosedürünü basitleştirecek. Özellikle dikkatli bitişik büyük damarlar abdominal aort diseksiyonu sırasında dikkatli olunmalıdır.

ntent "> orta büyüklükte bir sıçan küçük periferik damar çapı trans-karotis ve trans-iliak endovasküler cihaz dağıtımını zorlaştırır 5,6. Ancak, cihazlar da sonuna kadar deneysel anevrizma içine doğrudan abdominal aort sokulması veya doğrudan yerleştirme ile konabilir -to-sitesi boyun kalıntılarında 7,16. hacimsel değişiklik anastomoz ve anevrizma geometri seri ve non-invaziv yüksek frekanslı ultrason, mikro-CT, ya da yüksek çözünürlüklü manyetik rezonans anjiyografi 16 ile takip olabilir. Önceki deneyler, genel olarak yüksek saptandı Deneysel anevrizmaların bir tek olgu önemli bir büyüme veya dilatasyon hariç peri veya intra-prosedürel antikoagülasyon ve antiagregan 3,7,16 olmadan oluşturulmasından sonra altı hafta medyan takipte. olarak% 92.5 açıklık oranları gözlenmemiştir ve bunların hiçbiri 3 yırtıldı.

Ancak, hasat greftler decellularized eğer anevrizma demtromboz, rekanalizasyonda, büyüme ve nihai rüptürü 11 heterojen bir desen onstrate. Ikinci çalışmada büyüyen anevrizmalar belirgin adventisyal fibrozis ve inflamasyonu, tam duvar kesintileri gösterdi ve örgütsüz intraluminal trombüs nötrofil birikimini artırmıştır. Bu şekilde model anevrizma büyüme ve kopma çalışma sağlar ve potansiyel olarak artan ve yırtılma-eğilimli anevrizmalarda embolizasyon cihazları ile uyarılan biyolojik tepkiler değerlendirmek için kullanılabilir. Ideal embolize edilebilir mevcut anevrizma modellerin hiçbiri bir insan sakküler serebral arter anevrizması temsil veya anevrizma oluşumu veya rüptürü arkasında tam patobiyolojisini yeniden.

Bu ne ölçüde greft (venöz veya arteriyel kese) ve Damarların mimarisi (duvar veya çatallanma yapısının) seçimi seçim klinik uygulamaya sonuçları çeviri etkilemek için bir tartışma konusu olmaya devam etmektedir. Kesinlikle farklı model farklı için optimalamaçları ve bazı kurumlara çok yüksek seviyesine optimize edilebilir. Sunulan bu model diğer modellerin eskimiş yapmayacağız. Bir araştırmacı farklı teknik modelleri ve hayvanların en iyi deneysel hedeflerinize uygun bir pratik düşünceler ve laboratuar ortamı geniş bir seçim için gerekli kalacaktır.

Ancak, bazı deneyler ideal veri ve cihazların veya tedavilerin iyi karşılaştırma yapabilmek amacıyla, çeşitli kurum ve laboratuvarlarında aynı standart modelde yapılmalıdır. Bugün hala endovasküler cihazların standart test için kılavuzlar, klinik uygulamaya başlamadan önce, ve hayvan modelleri 1 pek az kalır. Standardize modelleri bir kez çok merkezli, randomize klinik öncesi çalışmalarda da araştırma bu alanda ortaya önem kazanacaktır.

Mikrocerrahi anevrizma oluşturma greft kökenli, hacim-deliğinden oranı ve ana damar standardizasyonu sağlaruzun eksen açısını anevrizma için. Sunulan tekniğin ana arter minimal anevrizma boyutu, konumu varyasyon ve ilişkisi ile standartlaştırılmış anevrizmalar oluşturmak amaçlanmaktadır. Standardizasyon ve nispeten düşük maliyetlerle Bu yüksek derecedeki model, daha sonra diğer daha karmaşık ve pahalı modellerde test edilir embolizasyonu malzeme ve cihazlar test etmek için iyi bir araçtır.

Sonuç olarak sunulmuştur mikrocerrahi yan duvar anevrizması sıçan modeli boyut, şekil ve ana arter göre anevrizma geometrik düzenleme aracılığı ile standardize edilmiş deney anevrizmalar oluşturmak için hızlı, uygun ve tutarlı bir yöntemdir.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

Yazarlar kullanılan ilaçlar, malzeme veya ekipman hiçbirinde mali veya ticari ilgi var.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Medetomidine Any genericon
Ketamin Any genericon
Buprenorphine Any genericon
Phosphate buffered saline
Sodium dodecyl sulfate (0.1%)
3-0 resorbable suture Ethicon Inc., USA VCP824G
5-0 non absorbable suture Ethicon Inc., USA 8618G
6-0 non absorbable silk suture B. Braun, Germany C0761060
9-0 nylon micro suture B. Braun, Germany G1118471
Spongostan Ethicon Inc., USA MS0002
Operation microscope Leica , Germany M651
Digital microscope camera Sony, Japan SSC-DC58AP
Standard surgical instruments B. Braun, Germany Multiple See protocol 1.4
Microsurgical instruments B. Braun, Germany Multiple See protocol 1.5
Vascular clip applicator B. Braun, Germany FT495T
Temporary vascular clamps B. Braun, Germany FT250T
Graph Pad Prism statistical software  GraphPad Software, San Diego, California, USA V 6.02 for Windows

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Bouzeghrane, F., et al. In vivo experimental intracranial aneurysm models: a systematic review. AJNR Am J Neuroradiol. 31, 418-423 (2010).
  2. Marbacher, S., et al. Complex bilobular, bisaccular, and broad-neck microsurgical aneurysm formation in the rabbit bifurcation model for the study of upcoming endovascular techniques. AJNR. American journal of neuroradiology. 32, 772-777 (2011).
  3. Frosen, J., et al. Contribution of mural and bone marrow-derived neointimal cells to thrombus organization and wall remodeling in a microsurgical murine saccular aneurysm model. Neurosurgery. 58, 936-944 (2006).
  4. Marjamaa, J., et al. Mice with a deletion in the first intron of the Col1a1 gene develop dissection and rupture of aorta in the absence of aneurysms: high-resolution magnetic resonance imaging. at 4.7 T, of the aorta and cerebral arteries. Magn Reson Med. 55, 592-597 (2006).
  5. Oyamada, S., et al. Trans-iliac rat aorta stenting: a novel high throughput preclinical stent model for restenosis and thrombosis. The Journal of surgical research. 166-191 (2011).
  6. Lowe, H. C., James, B., Khachigian, L. M. A novel model of in-stent restenosis: rat aortic stenting. Heart. 91, 393-395 (2005).
  7. Marjamaa, J., et al. Occlusion of neck remnant in experimental rat aneurysms after treatment with platinum- or polyglycolic-polylactic acid-coated coils. Surg Neurol. 71, 458-465 (2009).
  8. with the support of the NC3Rs. Aseptic Technique in Rodent Surgery. Newcastle University. cited 2014 Oct 3] Available from: http://www.procedureswithcare.org.uk/aseptic-technique-in-rodent-surgery (2014).
  9. Bernal, J., et al. Guidelines for rodent survival surgery. Journal of investigative surgery : the official journal of the Academy of Surgical Research. 22, 445-451 (2009).
  10. Pritchett-Corning, K. R., Luo, Y., Mulder, G. B., White, W. J. Principles of rodent surgery for the new. (2011).
  11. Marbacher, S., et al. Loss of mural cells leads to wall degeneration, aneurysm growth, and eventual rupture in a rat aneurysm model. Stroke. 45, 248-254 (2014).
  12. Frosen, J., et al. Remodeling of saccular cerebral artery aneurysm wall is associated with rupture: histological analysis of 24 unruptured and 42 ruptured cases. Stroke. 35, 2287-2293 (2004).
  13. Frosen, J., et al. Saccular intracranial aneurysm: pathology and mechanisms. Acta neuropathologica. 123-773 (2012).
  14. Ysuda, R., Strother, C. M., Aagaard-Kienitz, B., Pulfer, K., Consigny, D. A large and giant bifurcation aneurysm model in canines: proof of feasibility. AJNR Am J Neuroradiol. 33, 507-512 (2012).
  15. Sherif, C., et al. Microsurgical venous pouch arterial-bifurcation aneurysms in the rabbit model: technical aspects. Journal of visualized experiments : JoVE. (2011).
  16. Marjamaa, J., et al. High-resolution TOF MR angiography at 4.7 Tesla for volumetric and morphologic evaluation of coiled aneurysm neck remnants in a rat model. Acta Radiol. 52, 340-348 (2011).

Comments

0 Comments


    Post a Question / Comment / Request

    You must be signed in to post a comment. Please or create an account.

    Video Stats