The Helsinki Rat Mikrosidewall aneurisme Model

1Neurosurgery Research Group, University of Helsinki, Helsinki, Finland
Published 10/12/2014
0 Comments
  CITE THIS  SHARE 
Medicine

Your institution must subscribe to JoVE's Medicine section to access this content.

Fill out the form below to receive a free trial or learn more about access:

Welcome!

Enter your email below to get your free 10 minute trial to JoVE!





By clicking "Submit", you agree to our policies.

 

Summary

Cite this Article

Copy Citation

Marbacher, S., Marjamaa, J., Abdelhameed, E., Hernesniemi, J., Niemelä, M., Frösen, J. The Helsinki Rat Microsurgical Sidewall Aneurysm Model. J. Vis. Exp. (92), e51071, doi:10.3791/51071 (2014).

Please note that all translations are automatically generated.

Click here for the english version. For other languages click here.

Abstract

Eksperimentelle saccular aneurisme modeller er nødvendig for å teste nye kirurgisk og endovaskulær behandlingstilbud og enheter før de blir introdusert i klinisk praksis. Videre er eksperimentelle modeller for å belyse komplekse aneurisme biologi fører til brudd på saccular aneurismer.

Flere forskjellige typer eksperimentelle modeller for saccular aneurismer er etablert i ulike arter. Mange av dem, men krever spesielle ferdigheter, dyrt utstyr, eller spesielle miljøer, noe som begrenser deres utbredt bruk. En enkel, robust og billig eksperimentell modell er nødvendig som en standardisert verktøy som kan brukes på en standardisert måte i forskjellige institusjoner.

Den mikro rotte abdominal aortic veggen aneurisme modellen kombinerer muligheten til å studere både nye endovaskulær behandlingsstrategier og det molekylære grunnlaget for aneurisme biologi på en standardisert og billigmåte. Standardiserte grafts ved hjelp av form, størrelse og geometri er høstet fra en donorrotte synkende torakal aorta og deretter transplanteres til et mottaker syngeniske rotter. De aneurismer er sutureres ende-til-side med kontinuerlig eller avbrutt 9-0 nylon suturer til infrarenale abdominale aorta.

Vi presenterer steg-for-steg prosessuelle instruksjoner, informasjon om nødvendig utstyr, og diskutere viktige anatomiske og kirurgiske detaljer for vellykket mikro opprettelsen av en abdominal aortic sidevegg aneurisme i rotte.

Introduction

Brudd på en saccular cerebral arterie aneurisme fører livstruende blødning som fører til hjerneslag, varige nevrologiske skader eller død. Brudd kan forebygges ved enten mikro klipping eller endovaskulær aneurisme okklusjon. Har ennå ikke blitt etablert en medisinsk behandling for å hindre aneurisme vekst og ruptur.

Eksperimentelle modeller for saccular aneurismer er nødvendig for å studere biologi av arterielle aneurismer og for testing av nye terapeutiske enheter og strategier. For disse formål, har flere ulike modeller i forskjellige arter blitt utviklet og publisert 1.. Større aneurisme modeller i griser, hunder og kaniner er fortrinnsvis brukes til å teste endovaskulære innovasjoner i komplekse aneurisme arkitektur 1,2. Murine aneurisme modeller, derimot, tillater testing problemstillinger i genmodifiserte arter 3,4 og lette avklaring av aneurisme biologi på cellulært og molekylærtnivå langt bedre enn større arter en. Selv endovaskulær trans-carotis og trans-iliac enhet utplassering er begrenset til større rotter (> 400-500 g) og stenter mindre enn 2,0 mm og 1,5 mm i diameter 5,6, kan stenter også plasseres ved direkte innsetting i den abdominale aorta segment husing de eksperimentelle aneurismer. Tidligere arbeid ved hjelp av rotta mikro abdominal aortic veggen aneurisme modellen demonstrert sin gjennomførbarhet i testing romanen emboliske enheter og dets bruk i å studere den molekylære basis av aneurisme biologi 3,7.

Mange av de nåværende publiserte eksperimentelle saccular aneurisme modeller krever dyrt utstyr, spesielle miljøer (f.eks sterile operasjonsrom med gjennomlysning evner), intervensjonsradiologi kompetanse, eller bruk av dyre arter. Disse krav begrenser den utbredte bruken av disse modellene, og føre til bruk av ulike modeller i forskjellige laboratorier, hvor MAKES data sammenligning og meta-analyse vanskelig, om ikke umulig. En enkel, robust og billig eksperimentell modell er nødvendig som en standardisert verktøy som kan brukes på en standardisert måte i forskjellige laboratorier for å få sammenlignbare resultater fra forskjellige institusjoner. For dette formålet har vi opprettet rotte aorta veggen saccular arteriell aneurisme modell.

Målet med denne rapporten er å presentere steg-for-steg prosessuelle instruksjoner, informasjon om nødvendig utstyr, og for å diskutere viktige anatomiske og kirurgiske kjennetegn for vellykket mikro etablering av abdominal aorta sidevegg aneurismer hos rotte.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

MERK: Mann Wistar rotter (gjennomsnittlig kroppsvekt: 356 ± 44 g, 10-14 uker gammel) ble plassert i dyrerom på 22-24 ° C og tolv timers lys / mørke syklus med fri tilgang til pellets kosthold, regelmessig vann fra springen og fikk også human omsorg i samsvar med institusjonelle retningslinjer. Forsøkene ble gjennomgått og godkjent av komiteen for Animal Welfare ved Universitetet i Helsinki, Finland.

NB: I det følgende demonstrasjonen vår kirurgisk metode er som følger: Anesthetize rotte vekttilpasset subkutan injeksjon av medetomidin hydroklorid (0,5 mg / kg) og intraperitoneal injeksjon av ketamin-hydroklorid (50 mg / kg). Test for mangelen på en tå-pinch refleks for å bekrefte at rotta er fullt bedøvet. Påfør øye salve, klipp det kirurgiske området, og rens huden med en egnet desinfeksjonsmiddel, for eksempel Klorhexidin, enten i alkohol eller vann. Vask hendene, ta på verneutstyr, et hode cover og ansiktmaske, og sterile operasjonshansker. Ha en kirurgisk assistent hjelpemiddel i å opprettholde aseptiske kirurgi forhold og for å dokumentere de kirurgiske egenskaper (som oppført i tabell 1). Overvåke dybden av anestesi hvert 15 min under operasjonen ved å følge respirasjonsfrekvens, hjertefrekvens, og reaksjon på skadelige stimuli (tå klype test). Subkutan injeksjon av buprenorfin (0,03 mg / kg) ble gitt for postoperativ analgesi og gjentatt om nødvendig hver 12. time.

1. Hardware, forbruksvarer, og posisjonering

  1. Hold små dyr kirurgi rommet stille, aseptisk, og opprettholde romtemperaturen ved 23 +/- 3 ° C. For å utføre eksperimentelle aneurisme kirurgi følgende minimal utstyr er nødvendig:
    1. Bruk en bordplate kirurgisk mikroskop ideelt utstyrt med en assistent omfang og digitalt mikroskop kamera. Bruk porøse gjenbrukbare drifts overflate og rengjørbart instrument overflate for å beskytte laboratoriebenken.
    2. Bruk følgende standard kirurgiske instrumenter: Kirurgisk saks, vev tang, bløtvev sprederen eller selv beholde retractor, og to Mosquito kirurgiske klemmer.
    3. Bruk en grunnleggende mikrokirurgisk instrument sett som inkluderer: Buet microneedle holdere, en buet og to rette microforceps, og en rett eller buet microscissor.
    4. Hold mikroinstrumenter i en nyre tallerken fylt med sterilt saltvann for å holde instrumentet ikke-klebrig og ren under operasjonen. Nyre fatet er polstret med gummimatte eller en kirurgisk hanske for å hindre skade på tuppen av mikro-instrumenter. Sørg for at alle forsyninger er sterile og prosedyren utføres med aseptisk teknikk i henhold til gjeldende anbefalinger for overlevelse kirurgi på forsøksdyr
    5. I tillegg bruker en vaskulær klipp applikator og tre atraumatiske midlertidige vaskulære klemmer. Det er viktig at de klemmer som brukes har et lavt avslutt kraft til å hindre skade på meget tynn vegg av rotte aorta. Også utarbeide en linjal med halv millimeter skala barer, en liten farget gummipute, og en kort stump nål.
    6. Plasser rottene i liggende stilling, immobilisere både foran og hind poter med kirurgisk tape uten å legge strekk eller kompresjon på huden, og bøy deres rygg med en tykk markør eller kirurgi penn ved å plassere den under trelast regionen i ryggen. Det er viktig å få så mye lumbalcolumna lordose som mulig for å forbedre retroperitoneal eksponering og tilgang til infrarenale aorta som forenkler mikrokirurgisk anastomose. Dette posisjonering anbefales for abdominal aorta aneurisme skapelsen, men ikke nødvendig for thorax pode høsting.

2. Graft Høsting

  1. Under narkose, åpne brysthulen (start graft iskemi tid). Påfør en skadelig tå knipe for å bekrefte at rotta er ikke svarer før du fortsetter med følgende trinn. Skjær gjennom midventral bukveggen, identifisere membranen like over leveren, og kutte bindevevet i bunnen av membranen for å gi tilgang til brystkassen. Med store saks, sløv side ned, skar gjennom ribbeina bare en centimeter til venstre og høyre på brystkassen midtlinjen og åpne opp brysthula. Lungene er mobilisert til høyre side av hjertet. Sacrifice rottene ved overdosering med intrakardiell injeksjon av ketamin hydrochloride.Pulmonary bagasjerommet, venstre subclavia vene, venstre hjerne vena cava, og azygous vene forstyrre med innhøstingen av den proksimale thorakalaorta.
  2. Kaudal til de prominente årer det er en god inngangspunkt for å starte disseksjon av synkende thorakalaorta via mikro saks og microforceps.
  3. Spore thorakalaorta back fra ryggveggen av thorax oppover til aortabuen ved forsiktig sløv disseksjon retraksjon og med mygg kirurgisk klemme.
  4. Clamp og deretter kutte venene med saks. Opprettholde de klemmer på venene og bruke som en retractor avsløre underliggende aortabue.
  5. Plasser en ikke-absorberbare 6-0 silke ligatur rett over det første interkostalrom arterien forlater aorta.
  6. Kutt synkende aorta like under venstre subclavia og deretter under ligaturen. Trimming kan utføres for å få en vinkelrett standardisert aneurisme geometri, eller hvis det er nødvendig, for å få en bestemt vinkel mellom aksen til aneurismen og aorta. Mål transplantatet i sin bredde og lengde.
    MERK: Høstes grafts kan enten umiddelbart transplantert inn mottaker rotter eller bearbeides videre for å oppnå decellularization av graftet veggen. Decellularized grafts kan lagres ved -4 grader Celsius før re-implantasjon på et senere tidspunkt (figur 1). The decellularization av aneurisme veggen har vist seg å disponere aneurisme for å forstørre 11.

3. Graft Decellularization

  1. Freeze donor grafts i fosfatbufret saltløsning ved 4 ° C.
  2. Den neste dagen, tine grafts, skylles med renset og avionisert vann ved romtemperatur, og inkuber i 10 timer ved 37 ° C i 0,1% natriumdodecylsulfat.
  3. Til slutt vaskes natriumdodecylsulfat-behandlede transplantater tre ganger med forsiktig omrøring, fryses i fosfatbufret saltvann, og holdes i 4 ° C inntil bruk.

4. aneurisme Creation

  1. Disseksjon av bukaorta
    1. Etter at dyret er bedøvet, klipp pelsen fra operasjonsstedet, og rense huden med et egnet desinfeksjonsmiddel. Test for mangelen på en tå-pinch respons før huden innsnitt. Start snitt 1cm proksimale til kjønnsorganene in midventral stilling (start driftstid). Skille nøye huden mot de underliggende muskler. Slutt disseksjon en til to centimeter under brystbenet.
    2. Forsiktig, men bestemt trekke opp de underliggende magemusklene for å unngå skade på underliggende organer. Forleng langsgående snitt langs linea alba oppover til xiphoid prosessen og ender i caudal retning på nivået av blæren.
    3. Gjelder forsiktig press på blæren å tømme det for å lette tilgangen til retroperitonealrommet.
    4. Flytt tynntarmen og den fremtredende cecum til høyre eller venstre. Identifiser tykktarmen nemlig synkende kolon på venstre bunnen av bukhulen.
    5. Skjær ligament i mellom tynntarmen og tykktarmen synkende i cranial retning for å tillate større eksponering av dorsal kroppsveggen. Plasser en selv beholde retractor å holde tarmer fra hverandre.
    6. Den ideelle plasseringen av ende-til-side aneurisme anastomose jegs funnet på nivået mellom nedsatt og iliolumbar årer. Abdominalaorta ligger retroperitoneal innebygd i fettvev. Under disseksjonen være spesielt oppmerksom på de sammenkoblede nesten gjennomsiktige urinlederne og testikkel fartøy.
    7. Hvis ytterligere tilbaketrekking av tarmen er nødvendig, bruke større gasbind bytteavtaler. Lumbalcolumna lordose kalles mens posisjonering ved å plassere en kirurgi penn eller lignende under korsryggen av rotte, reduserer behovet av tarmen dementi.
    8. Den ventrale overflaten av dorsal kroppsveggen er dekket med et tynt parietal peritoneum. Når dette er åpnet, visual aorta like under. Under forsiktig skarp og sløv disseksjon av den abdominale aorta fra tilgrensende store vener gripe bare adventitia å unngå skade på karveggen.
    9. Sjelden, små lumbale arterier oppstå som segmental fartøy fra framsiden av abdominal aorta og forstyrre forberedelsene. Ligering og skjæring av fartøyet er needed å unngå retrograd oser under aneurisme suturering. Bruk av buede mikro tang kan legge til rette ligatur plassering i dybden.
  2. Ende-til-side anastomose
    1. Sett en farget gummipute under abdominal aorta og polstre det med en liten gasbind pinne. Fjern løst bindevev og adventitia på nivået av den planlagte anastomosestedet.
    2. Klem abdominal aorta distalt til den anastomose først, deretter proksimale (start aortisk klemming tid). Dette sikrer en fast fylling av beholderen og forenkler påfølgende arteriotomi.
    3. Utfør arteriotomi ved hjelp av enten rette eller buede mikro saks. En mikro-tang holder opp en svært liten del av åreveggen å kutte ut en elliptisk form.
    4. Skyll arterien grundig med saltvann i begge retninger ved hjelp av en stump tippet nål.
    5. Plasser de første to suturer av denne ende-til-side anastomose ved den proksimale og distale ende av arteriotomi (start anastomose gang). Unngå å gripe fatt i beholderveggen med mikro-tang når det er mulig. Kontroller at hver sutur er plassert gjennom alle lagene i åreveggen.
    6. Utfør suturering enten som kontinuerlig eller avbrutt suturer. Hvis avbrutt suturering velges deretter plassere baksiden ni o'clock sutur først. Påfølgende suturer kan være adskilt fra hverandre begynner ved siden av den første suturen. Ta tak i adventitia nøye. Unngå enhver klemme / fatte av intima.
    7. Når den bakre veggen er ferdig, kontrollere endoluminale del av anastomose for feilplasserte suturer. Utføre de samme prosedyrene i samme rekkefølge på forsiden. Sørg for at den første av i alt tre knop per sutur er fast, men ikke for stramt.
  3. Hemostase og Closure
    1. Etter utløpet til side anastomose er fullført (ende-anastomose-tid), skylle området med saltvann og fjerne den distale klemmen først for å tillate tilbakestrømning (slutt aortisk klemming tid og slutt pode iskemi timeg).
    2. Hvis åpenbar blødning oppstår fra tilbakestrømning en ekstra sting kan være nødvendig (starttid av hemostasis). Ved mindre oser, oppnå hemostase med lett press over blødning området ved hjelp av en liten bit av et gasbind pinne.
    3. Fjern den proksimale vaskulær klemme, skyll anastomosestedet igjen, og kuttet av de gjenværende endene av ligaturen på aneurisme kuppel.
    4. Bekreft åpenheten til det aneurisme ved observasjon av volumøkning av aneurisme under peak arterielle puls bølge. Vurdere distal magepulsåren patency gjennom direkte "melking test".
    5. Fjern plastarket og den lille gasbind pinne under. Den pulserende blod virvel innenfor opprettet aneurisme er godt synlig.
    6. Dekk sutur linjer rundt anastomosen med små biter av fettvev eller Spongostan for mer hemostase om små oser er fortsatt til stede (sluttid for hemostase).
    7. Fjern de myke vev spreader og gasbind vattpinner.Plasser tynntarmen, cecum og fettmasse tilbake i deres riktige stilling.
    8. Lukk midtlinjemagemusklene ved å bruke 5-0, 4-0, eller 3-0 resorberbare eller ikke-absorberbare suturer fulgt av huden sårlukking med kontinuerlig sutur teknikk med 3-0 resorberbar polyfilament sutur (slutten driftstid). Merk: Det er vår erfaring rotter tolerert resorberbare hud sting bedre enn ikke-absorberbare monofilament suturer.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

En pilot serie omfattet 14 rotter. Deretter totalt 84 dyr ble operert i henhold til presenterte protokollen for flere forskningsprosjekter mellom mars og september 2012 Ytterligere 29 dyr fungerte som givere for arterielle saccular grafts. De øvrige forsøk ble utført ved bruk av pre-behandlet grafts høstet og lagret fra tidligere eksperimenter med rotter av samme kjønn, stammen, vekt og alder.

Kroppsvekt, generelle driften tid, aortic klem tid, tid for anastomose skapelse, tid til hemostase etter anastomose skapelse, pode iskemi tid, og aneurisme dimensjoner på tidspunktet for opprettelse (aneurisme bredde og lengde) ble registrert og hentet fra skriftlige case-rapportskjemaer . Alle karakteristika er oppsummert og visualisert i tabell 1 og figur 1.

Med unntak av et dyr som gjennomgikk en ny operasjon på grunn av trombose i den abdominal aorta distal til anastomosestedet det var ingen periprocedural dødelighet eller sykelighet. Midlere driftstiden var mindre enn 52 min (52 ± 12 minutter). Hos dyr med transplantasjon av syngene aneurismer (n = 21) mener pode iskemi tid var 29 ± 7 min. Samlet gjennomsnittlig aortic klem tid var 25 ± 7 min. Aneurisme dimensjoner åpenbart å være konstant med lav avviket størrelse (gjennomsnittlig bredde 2,5 ± 0,2 mm og gjennomsnittlig lengde 3,8 ± 0,2 mm).

De innsamlede data gikk beskrivende analyse og visualisering ved hjelp av statistisk programvare. Verdier er uttrykt som gjennomsnitt ± standardavvik (SD) og 95% konfidensintervall (CI).

Figur 1
Figur 1:. Ikke-Decellularized eller Decellularized grafts Ubehandlede opprinnelige donor grafts fra thorax aorta blir øyeblikkelig re-implantert i mottakerrotter (1). Grafts å væredecellularized er behandlet med natrium-dodecyl-sulfat (SDS) og oppbevart ved -4 grader Celsius før re-implantering (2). Den histologiske panelet viser lengdesnitt gjennom en ubehandlet (venstre) og decellularized (høyre) pode vegg. Hematoksylin-eosin farging.

Figur 2
Figur 2: Kirurgiske Kjennetegn. Grafene visualisere fordelingen av enkle dataverdier (små svarte prikker), data gjennomsnittlig (fet lang bar), og standardavvik (feilfelt). Vennligst klikk her for å se en større versjon av dette tallet.

Karakteristisk Mean ± SD 95% CI øvre - nedre
Gjennomsnittlig kroppsvekt (gram) 363 47 350-373
Gjennomsnittlig driftstid (minutter) 50 11 48-53
Mener aortic klem tid (minutter) 25 7 23 - 27
Mener anastomose tid (minutter) 18 6 16 - 19
Gjennomsnittlig tid for hemostase (minutter) 2 2 2 - 3
Mener pode iskemi tid (minutter) 29 7 26 - 32
Mener aneurisme bredde (millimeter) 2.5 0.2 2.4 - 2.5
Mener aneurisme lengde (millimeter) 3.7 0.5 03.05 til 03.08

Tabell 1: Kirurgiske Kjennetegn. SD = standardavvik; KI = konfidensintervall

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Fremgang i vår forståelse av den komplekse biologi saccular cerebral arterie aneurisme avhenger analyse av epidemiologiske og kliniske data, supplert med laboratoriestudier på pasientprøver og eksperimentelt arbeid i dyremodeller 3,12,13.

Små dyr som rotte er iboende forbundet med lavere kostnader av eksperimenter og bolig, og redusert behov for spesialutstyr. En gjennomsnittlig total driftstid på mindre enn 60 minutter for mikrokirurgisk etablering av en sidevegg aneurisme i rotter er mye kortere enn den tiden som brukes til å lage mer komplekse mikro venøs posen arteriell bifurcation aneurisme i kaniner og hunder 2,14,15. Fordelene med lave kostnader og raskere metoder for aneurisme etableringen kan bidra til gjennomføring av studier med større antall eksperimenter og påfølgende økt statistisk styrke. I tillegg har dagens murine modeller blitt implementert for å svare researc h spørsmål som trenger mer avansert laboratorium metodikk, inkludert transgene dyr 3,4. Når du bruker mus for etablering av sidevegg aneurismer, til en trenger huske på at de nødvendige avbrutt 11-0 sting krever ekstra mikroferdigheter. Utførelse av frem-aneurisme-modellen hos mus er også assosiert med høyere dødelighet (30%, hovedsakelig på grunn av komplikasjoner i væskebalansen og anestesi og mindre diameter (0,5-1 mm) av musen aorta) 3.

Grunnleggende prinsipper for rottemodellen aneurisme kan mestres i en kort tidsperiode. Et innføringskurs i gnager mikrokirurgi anbefales for de forskere uerfarne i å utføre disseksjoner og sutur teknikker under en drifts mikroskop. Uthevede viktige skritt i den presenterte protokollen vil ytterligere forenkle saksbehandlingen. Spesiell forsiktighet bør utvises ved disseksjon av abdominal aorta fra tilstøtende store årer.

ntent "> Den lille perifere blodkar diameter på en mellomstor rotte gjør trans-carotis og trans-iliaca endovaskulær enhet distribusjon vanskelig 5,6. kan imidlertid enheter også plasseres gjennom direkte abdominal aortic innsetting eller direkte plassering i den eksperimentelle aneurisme før slutt -to stedet Anastomose 7,16. Store endringer i nakke rester og aneurisme geometri kan være oppfølging med serie og ikke-invasiv høyfrekvente ultralyd, mikro-CT, eller høy oppløsning magnetisk resonans angiografi 16. Tidligere eksperimenter avdekket høy samlet patency priser på 92,5% ved en median oppfølging på seks uker etter etableringen uten peri- eller intra-prosessuelle antikoagulasjon og antiaggregation 3,7,16. Med unntak av en enkelt sak betydelig vekst eller dilatasjon av de eksperimentelle aneurismer ble ikke observert og ingen av dem sprukket tre.

Men hvis de høstes grafts er decellularized de aneurismer demonstrate et uensartet mønster av trombose, recanalization, vekst, og eventuell brudd 11. Økende aneurismer i den sistnevnte studien viste markert adventitial fibrose og betennelse, komplett vegg avbrudd, og økt nøytrofile akkumulering i uorganiserte intraluminal trombe. På denne måte kan modellen gjør det mulig å studere aneurisme vekst og brudd og kan potensielt brukes til å vurdere biologiske responser indusert ved embolisering enheter i voksende og bruddutsatte aneurismer. Ingen av de tilgjengelige aneurisme modeller som kan embolized ideelt representere en menneskelig saccular cerebral arterie aneurisme eller reprodusere nøyaktig patobiologi bak aneurysmidannelse eller ruptur.

Det gjenstår en del debatt i hvilken grad valget av graft (venøs eller arteriell posen) og valg av angioarchitecture (sidevegg eller bifurcation konstruere) påvirke oversettelse av resultatene i klinisk praksis. Gjerne forskjellige modeller er optimale for forskjelligeformål, og kan optimaliseres til et meget høyt nivå i visse institusjoner. Den presenterte modellen vil ikke gjøre andre modeller foreldet. Det vil fortsatt være nødvendig for en etterforsker til å velge fra et bredt spekter av ulike tekniske modeller og dyr den som passer best til de eksperimentelle målene, praktiske hensyn, og laboratoriemiljø.

Imidlertid bør noen eksperimenter ideelt sett være utført i et standardisert samme modell i forskjellige institusjoner og laboratorier, for å tillate bedre sammenligning av data og enheter eller behandlinger. Til dags dato er det ingen retningslinjer for standardiserte tester av endovaskulære enheter før klinisk anvendelse, og dyremodeller forblir underutnyttet en. Standardiserte modeller vil få betydning når multisenter randomiserte prekliniske studier også dukke opp i dette forskningsfeltet.

Mikro aneurisme Creation kan standardisering av graft opprinnelse, volum-til-åpning ratio, og moderfartøyetå aneurisme lang akse vinkel. Den presenterte teknikken er beregnet å generere standardiserte aneurismer med minimal variasjon i aneurisme dimensjon, plassering og forhold til den overordnede arterien. Denne høye grad av standardisering, og de forholdsvis lave kostnader gjøre modellen et godt verktøy for å teste embolisering materialer og utstyr som deretter testet i andre mer kompliserte og dyre-modeller.

Avslutningsvis fremmikroveggen rottemodell aneurisme er en hurtig, rimelig og konsistent metode for å lage eksperimentelle aneurismer som er standardisert ved hjelp av størrelse, form og geometrisk konfigurasjon av aneurisme i forhold til den overordnede arterien.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

Forfatterne har ingen økonomisk eller kommersiell interesse i noen av narkotika, materialer eller utstyr som brukes.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Medetomidine Any genericon
Ketamin Any genericon
Buprenorphine Any genericon
Phosphate buffered saline
Sodium dodecyl sulfate (0.1%)
3-0 resorbable suture Ethicon Inc., USA VCP824G
5-0 non absorbable suture Ethicon Inc., USA 8618G
6-0 non absorbable silk suture B. Braun, Germany C0761060
9-0 nylon micro suture B. Braun, Germany G1118471
Spongostan Ethicon Inc., USA MS0002
Operation microscope Leica , Germany M651
Digital microscope camera Sony, Japan SSC-DC58AP
Standard surgical instruments B. Braun, Germany Multiple See protocol 1.4
Microsurgical instruments B. Braun, Germany Multiple See protocol 1.5
Vascular clip applicator B. Braun, Germany FT495T
Temporary vascular clamps B. Braun, Germany FT250T
Graph Pad Prism statistical software  GraphPad Software, San Diego, California, USA V 6.02 for Windows

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Bouzeghrane, F., et al. In vivo experimental intracranial aneurysm models: a systematic review. AJNR Am J Neuroradiol. 31, 418-423 (2010).
  2. Marbacher, S., et al. Complex bilobular, bisaccular, and broad-neck microsurgical aneurysm formation in the rabbit bifurcation model for the study of upcoming endovascular techniques. AJNR. American journal of neuroradiology. 32, 772-777 (2011).
  3. Frosen, J., et al. Contribution of mural and bone marrow-derived neointimal cells to thrombus organization and wall remodeling in a microsurgical murine saccular aneurysm model. Neurosurgery. 58, 936-944 (2006).
  4. Marjamaa, J., et al. Mice with a deletion in the first intron of the Col1a1 gene develop dissection and rupture of aorta in the absence of aneurysms: high-resolution magnetic resonance imaging. at 4.7 T, of the aorta and cerebral arteries. Magn Reson Med. 55, 592-597 (2006).
  5. Oyamada, S., et al. Trans-iliac rat aorta stenting: a novel high throughput preclinical stent model for restenosis and thrombosis. The Journal of surgical research. 166-191 (2011).
  6. Lowe, H. C., James, B., Khachigian, L. M. A novel model of in-stent restenosis: rat aortic stenting. Heart. 91, 393-395 (2005).
  7. Marjamaa, J., et al. Occlusion of neck remnant in experimental rat aneurysms after treatment with platinum- or polyglycolic-polylactic acid-coated coils. Surg Neurol. 71, 458-465 (2009).
  8. with the support of the NC3Rs. Aseptic Technique in Rodent Surgery. Newcastle University. cited 2014 Oct 3] Available from: http://www.procedureswithcare.org.uk/aseptic-technique-in-rodent-surgery (2014).
  9. Bernal, J., et al. Guidelines for rodent survival surgery. Journal of investigative surgery : the official journal of the Academy of Surgical Research. 22, 445-451 (2009).
  10. Pritchett-Corning, K. R., Luo, Y., Mulder, G. B., White, W. J. Principles of rodent surgery for the new. (2011).
  11. Marbacher, S., et al. Loss of mural cells leads to wall degeneration, aneurysm growth, and eventual rupture in a rat aneurysm model. Stroke. 45, 248-254 (2014).
  12. Frosen, J., et al. Remodeling of saccular cerebral artery aneurysm wall is associated with rupture: histological analysis of 24 unruptured and 42 ruptured cases. Stroke. 35, 2287-2293 (2004).
  13. Frosen, J., et al. Saccular intracranial aneurysm: pathology and mechanisms. Acta neuropathologica. 123-773 (2012).
  14. Ysuda, R., Strother, C. M., Aagaard-Kienitz, B., Pulfer, K., Consigny, D. A large and giant bifurcation aneurysm model in canines: proof of feasibility. AJNR Am J Neuroradiol. 33, 507-512 (2012).
  15. Sherif, C., et al. Microsurgical venous pouch arterial-bifurcation aneurysms in the rabbit model: technical aspects. Journal of visualized experiments : JoVE. (2011).
  16. Marjamaa, J., et al. High-resolution TOF MR angiography at 4.7 Tesla for volumetric and morphologic evaluation of coiled aneurysm neck remnants in a rat model. Acta Radiol. 52, 340-348 (2011).

Comments

0 Comments


    Post a Question / Comment / Request

    You must be signed in to post a comment. Please or create an account.

    Video Stats