Encyclopedia of Experiments: Biology
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- Experimentos para quantificar a colocação de óvulos revelaram os componentes neurológicos e as pistas ambientais que afetam esse comportamento. Mudanças no comportamento de colocação de ovos podem indicar efeitos tóxicos nos sistemas neuromusculares ou reprodutivos.
Para testar a toxicidade, levante os ovos sincronizados em termos de desenvolvimento em placas de mídia de crescimento de nematoides com e sem o composto de interesse. Esses experimentos usam alimentos para vermes bacterianos mortos pelo calor para evitar que as bactérias metabolizem o composto.
Em seguida, mova os vermes para novas placas sob o controle apropriado ou condições experimentais, e deixe-os colocar ovos por 24 horas. Todos os dias, transfira os adultos para uma nova placa, e conte os ovos na placa anterior. Continue até que os adultos parem de colocar, cerca de cinco dias para vermes do tipo selvagem. Calcule o número de ovos colocados por verme adulto todos os dias, e adicione o total no final do experimento.
No protocolo de exemplo, usaremos o ensaio de colocação de óvulos C. elegans para testar etoposide- uma droga de quimioterapia - para toxicidade reprodutiva.
- Incubar os ovos sincronizados por idade na placa NGM contendo DMSO ou etoposide a 20 graus Celsius por 64 horas, até o estágio adulto jovem. Transfira cinco vermes adultos para novas placas de GNM sem produtos químicos ou novas placas de GNM contendo o mesmo pré-tratamento químico, e incuba-os por 24 horas.
Transfira os adultos para novas placas de NGM, como apenas demonstrado, e conte o número de ovos todos os dias. Além disso, conte os vermes que rastejaram, morreram ou foram eclodidos internamente. Realizar cálculos de acordo com o protocolo de texto.
