Injection intrathoracique : administration composée au cœur du poisson-zèbre adulte

1. Préparation du poisson pour l’injection intrathoracique

1. Attrapez un poisson-zèbre adulte (Danio rerio) avec un filet et transférez-le dans la solution anesthésique.
2. Après 1 à 2 minutes, lorsque le poisson cesse de nager et que le mouvement de l’opercule est réduit, touchez le poisson avec une cuillère en plastique pour vous assurer qu’il ne réagit à aucun contact.
3. Transférez rapidement et soigneusement le poisson avec la cuillère dans la rainure de l’éponge humide, avec le côté ventral vers le haut. La tête du poisson doit être dirigée à l’opposé de la main dominante de l’opérateur.

2. Micro-injection dans le péricarde

1. Sous le stéréomicroscope, observez attentivement le mouvement du cœur battant sous la peau du poisson. Déterminer visuellement le point d’injection au-dessus du cœur battant et au milieu du triangle défini par les plaques cartilagineuses ventrales (Figure 1D). Insérez l’extrémité du capillaire à un angle de 30 à 45° par rapport à l’axe du corps (Figure 1E). Pénètre doucement la peau avec l’extrémité du microcapillaire dans le péricarde (Figure 1C). Un point d’entrée optimal est plus proche de l’abdomen que de la tête.
   note: N’insérez pas le capillaire trop profondément dans le corps et le cœur, car cela causerait des lésions à l’organe. En cas de ponction cardiaque, l’aiguille se remplit généralement de sang. Si cela se produit, retirez le capillaire et excluez le poisson de l’expérience.
2. Une fois l’aiguille à l’intérieur du péricarde, terminez l’injection en appuyant sur la pédale du dispositif de micro-injecteur.
   note: Attention à ne pas injecter d’air dans la cavité thoracique.
3. Après l’injection, retirez doucement le capillaire du thorax et transférez immédiatement le poisson dans un réservoir avec de l’eau système pour la récupération.
4. Surveillez les poissons jusqu’à ce qu’ils se remettent complètement de l’anesthésie.
5. Prélevez le cœur au moment souhaité et préparez-le pour une analyse plus approfondie.
   note: Dans le cas où le poisson ne reprend pas le mouvement de l’opercule dans les 30 s, réanimez le poisson en pressant de l’eau dans les branchies avec une pipette en plastique.