במאמר זה אנו מציגים את פרוטוקול כללי למדידת אורך החיים של נמטודות שמרו על התקשורת עם מזון מוצק-UV הרג חיידקים.
הזדקנות היא תהליך ניוונית המאופיינת הידרדרות מתקדמת של רכיבים סלולריים האברונים וכתוצאה מכך התמותה. נמטודות<em> Caenorhabditis elegans</em> התפתחה כמודל העיקריים המשמשים כדי לחקור את הביולוגיה של ההזדקנות. כי כמעט כל המשנה הביולוגי עובר ירידה תפקודית עם העלייה בגיל, תוחלת החיים היא נקודת הסיום הראשונית של עניין כאשר בהתחשב בשיעור כולל של הזדקנות. ב נמטודות, תוחלת חיים מוגדרת בדרך כלל כמספר ימים חיה נותר תגובה לגירויים חיצוניים. נמטודות יכול להיות מופצות גם בתקשורת נוזל או מוצק מדיה צלחות, טכניקות פותחו למדידת תוחלת החיים בתנאים שניהם. כאן אנו מציגים פרוטוקול כללית למדידת אורך החיים של נמטודות שמרו על התקשורת צמיחה מוצקה נמטודות והאכילה דיאטה של UV-הרג חיידקים. נהלים אלה יכולים בקלות להיות מותאם תוחלת החיים assay בתנאים משותף שונים, כולל תזונה המורכבת של חיידקים חיים, הגבלה תזונתיים, ואת התערבות RNA.
הבקרה הגנטית של אריכות ימים, נחקרה בהרחבה ב C. elegans, בעיקר בשל הקלות ואת המהירות שבה תוחלת החיים ניתן לקבוע. פרוטוקול שנדונו במאמר זה מתאר המסגרת הבסיסית להשגת לשחזור נתונים תוחלת החיים ב C. elegans והוא יכול לחול גם על מינים relatednematode. 2 על ידי ביצוע כמה שינוי?…
עבודה זו נתמכה על ידי פריצות דרך גלן / מרחוק פרס גרונטולוגיה ו-NIH גרנט 1R01AG031108-01 ל MKGS נתמך על ידי NIH הכשרה מענק P30AG013280. ח"כ הוא רפואי אליסון קרן מלומד חדש הזדקנות.
Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
---|---|---|---|---|
Agar | Reagent | Fisher Scientific (BD Diagnostic Systems) | DF0145-17-0 (214530) | |
Ampicillin | Reagent | MidSci | 0339 | |
BactoTryptone | Reagent | Fisher Scientific (BD Diagnostic Systems) | DF0123-17-3 (211705) | |
BactoPeptone | Reagent | Fisher Scientific (BD Diagnostic Systems) | DF0118-17-0 (211677) | |
CaCl2 | Reagent | Fisher Scientific (JT Baker) | NC9699248 (1332-01) | |
Carbenicillin | Reagent | Gold BioTechnology (GBT) | C0109 | |
Cholesterol | Reagent | Sigma-Aldrich | C75209 | |
Fluorodeoxyuridine (FUDR) | Reagent | Sigma-Aldrich | F0503 | |
Isopropyl β-d-Thiogalactopyranoside (IPTG) | Reagent | Gold BioTechnology (GBT) | I2481C5 | |
KPi Dibasic | Reagent | Fisher Scientific (JT Baker) | 5087862 (3252-01) | |
KPi Monobasic | Reagent | Fisher Scientific (JT Baker) | 5087861 (3246-01) | |
MgSO4 | Reagent | Fisher Scientific (JT Baker) | NC9561800 (2500-01) | |
NaCl | Reagent | Fisher Scientific | S251 | |
Tris | Reagent | Sigma-Aldrich | T1503 | |
Yeast Extract | Reagent | Fisher Scientific (BD Diagnostic Systems) | DF0886-17-0 (288620) |