라이트 현미경과 연구 Presynaptically 사일런트 시냅스
Summary
Glutamatergic 시냅스는 자동 모드로 활성 모드에서 전환할 수 있습니다. 우리는 쥐 뉴런의 dissociated 문화에 presynaptic 활동 상태를 보여주는 것은 적극적인 시냅스를 시각화하는 FM1 - 43 염료의 고칠수 양식을 사용하여 모든 글루 탐 산염 시냅스를 시각화하는 vGluT – 1 항체와 immunostaining 시각이다.
Abstract
시냅스 소성 가능성 underlies 학습과 기억 또한 neurotoxic되는 것을 달리 손상 모욕을 방지 적응력을 나타내는 5 신경계의 능력. 그것이 신경 전달 물질의 글루 탐 산염을 포함한 vesicles 발표 presynaptic 터미널의 능력의 디지털 전환 및 해제로 표현되기 때문에 우리는 부분적으로 흥미로운 presynaptic 소성의 형태를 공부하고 있습니다. 여기서 우리는 설치류의 해마에서 준비 dissociated 셀 문화에 presynaptic 터미널의 활동 상태를 시각화를위한 프로토콜을 보여줍니다. 이 메서드는 일반적으로 시냅스 vesicles 레이블을하는 데 사용되는 styryl 염료의 고칠수 형태 FM1 - 43와 얼룩을 사용하여 활성 시냅스를 감지에 의존합니다. 이 얼룩 프로필은 기공을 갖는 글루 탐 산염 수송 1 (vGluT – 1)에 관계없이 정품 인증 상태의 라벨 모두 글루 탐 산염 시냅스를위한 얼룩에 대한 감독 항체와 같은 단말기의 immunostaining와 비교됩니다. 우리는 depolarizing 자극이 presynaptic 입을를 유도 것을 발견했습니다. 기준 조건 하에서 침묵 시냅스의 인구는 장시간 전기 입을 또는 CAMP 신호 통로의 활성화에 의해 활성화할 수 있습니다.
Protocol
Discussion
의미
- 일반적으로 시냅스는 측정 확률과 송신기를 출시하여 작동하는 생각되고 있습니다. 자신과 다른 사람이 작업은 기공을 갖는 신경 전달 물질의 수송과 다른 주요 presynaptic 마커 2, 6-8의 전체 보완에도 불구하고, 일부 시냅스가 신경 전달 물질을 방출하는 내화물하는 그것이 분명합니다. 우리는 뉴런의 기초 네트워크 활동이 비활성 시냅스의 인구를 유지하는 것이 중요합니다 …
Acknowledgements
이 작품은 워싱턴 대학에 NIH 보조금 DA018109과 MH78823, 그리고 NIH 신경 과학 청사진 코어 부여 P30NS057105에 의해 지원되었다.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| FM1-43FX | Invitrogen | F-35355 | A red-shifted FM4-64FX is also available, but has not proven as amenable to assays of presynaptic silencing. | |
| Advasep-7 | CyDex | AR-0A7-001 | ||
| vGluT-1 | Millipore | AB5905 | ||
| Alexa 647-conjugated anti-GP | Invitrogen | A-21450 | ||
| Fluoromount-G | Southern Biotechnology Associates | 0100-01 |
References
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