Der CApillary FEeder (CAFE) Assay: Eine Methode zur Verfolgung des Lebensmittelkonsums und der Präferenz bei Drosophila

Abstract

Quelle: Diegelmann, S., et al. Der CApillary FEeder Assay misst die Nahrungsaufnahme bei Drosophila melanogaster. J. Vis. Exp. (2017).

Dieses Video beschreibt den CApillary FEeder oder CAFE-Assay, eine Verhaltensmethode, die die Nahrungsaufnahme und -präferenz von ungezügelten Fruchtfliegen misst. Das vorgestellte Protokoll zeigt, wie der Assay mit minimaler Verdunstung aus den flüssigkeitsgefüllten Kapillaren durchgeführt wird, die zur Abgabe der Nahrung und zur Verfolgung ihrer Aufnahme verwendet werden.

Protocol

Dieses Protokoll ist ein Auszug aus Diegelmann et al., The CApillary FEeder Assay Measures Food Intake in Drosophila melanogaster, J. Vis. Exp. (2017).

1. Assemblierung und Durchführung des CApillary FEeder-Assays

1. Wenn das Fasten nicht erforderlich ist, werden die Versuchsfliegen durch Klopfen oder Blasrohr in den Assay überführt. Stellen Sie sicher, dass Sie drei Kontrollfläschchen ohne Fliegen enthalten, um die Verdunstung zu quantifizieren.
2. Entfernen Sie vorsichtig eine Pipettenspitze (2 - 20 μl Volumen), die eine der äußeren Öffnungen verschließt, und führen Sie mit dem unteren Ende zuers....

Results

Abbildung 1: Der Drosophila melanogaster CApillary FEeder Assay. A) Der Fütterungstest mit Fliegen. Angefeuchtetes Filterpapier sorgt für Wasser am Boden des Fläschchens. Während des Experiments werden vier Kapillaren zur Verfügung gestellt (rot und blau gefärbte Nahrung in gegenüberliegenden Kapillaren). Beachten Sie, dass die Kapillaren durch eine zweite Pipettenspitze in Position gehalten .......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
Fläschchen (Zucht)	Greiner Bio-One	960177	www.greinerbioone.com
Fläschchen (CAFE-Assay)	Greiner Bio-One	217101	www.greinerbioone.com
Lid-CAFE-Assay	Werkstatt	–	–
Kunststoffbox, niedrige Wand	Plastime	353	www.plastime.it
Abdeckung für die Kunststoffbox	Werkstatt	–	–
kapillaren	BLAUBRAND	REF 7087 07	www.brand.de
Pipettenspitzen	Greiner Bio-One	Artikel-Nr.: 771290	www.greinerbioone.com
Filtern von Papierkreisen	Whatman	Tel.: 10 311 804	www.sigmaaldrich.com
D(+)-Saccharose	AppliChem	57-50-1	www.applichem.com
Ethanol absolut	VWR Chemikalien	20.821.330	www.vwr.com
Lebensmittelfarbe (rot, E124)	Rückenspaß	Nr. 10027	www.backfun.de
Lebensmittelfarbe (blau, E133)	Rückenspaß	Nr. 10030	www.backfun.de
Seifenlösung (CVK 8)	CVH	Artikel-Nr.: 103220	www.cvh.de
Digitaler Messschieber	GARANT	412.616	www.hoffmann-group.com
Fläschchen (Zucht)			Höhe 9,8 cm, Durchmesser 4,8 cm
Fläschchen (CAFE-Assay)			Höhe 8 cm, Durchmesser 3,3 cm
Lid-CAFE-Assay			Hergestellt in der Universitätswerkstatt, technische Zeichnung geliefert Bitte klicken Sie hier, um diese Datei herunterzuladen.
Kunststoffbox, niedrige Wand			Eine Gittereinlage aus Kunststoff wurde speziell für 8 x 10 Vial-Positionen angefertigt
Abdeckung für die Kunststoffbox			Abmessungen (37 x 29 x 18 cm)
kapillaren			DIN ISO 7550 Norm, IVD-Richtlinie 98/79 EG, Enden poliert
Pipettenspitzen			Pipetten für den äußeren Kreis werden entsprechend dem Deckel geschnitten
Filtern von Papierkreisen			45 mm Durchmesser funktioniert gut, wenn es für die verwendeten Fläschchen gefaltet
D(+)-Saccharose			Nicht schädlich
Ethanol absolut			Leicht entzündliche Flüssigkeit und Dämpfe
Lebensmittelfarbe (rot, E124)			Nicht angegeben
Lebensmittelfarbe (blau, E133)			Nicht angegeben
Seifenlösung (CVK 8)			Geruchsneutrale Seife
Digitaler Messschieber
Standard-Fliegenfutter			(für 20 L)
Agar			ca. 160 Gramm
Bierhefe			299,33 Gramm
Maismehl			ca. 1.200 g
Melasse			1,6 L
Propionsäure			57,3 mL
Nipagin 30%			ca. 160 mL