Il test CApillary FEeder (CAFE): un metodo per monitorare il consumo e la preferenza alimentare in Drosophila

Abstract

Fonte: Diegelmann, S., et al. Il test CApillary FEeder misura l'assunzione di cibo in Drosophila melanogaster. J. Vis. Exp. (2017).

Questo video descrive il test CApillary FEeder, o CAFE, un metodo comportamentale che misura l'assunzione di cibo e la preferenza dei moscerini della frutta non frenati. Il protocollo presentato mostra come eseguire il test con un'evaporazione minima dai capillari pieni di liquido utilizzati per erogare il cibo e monitorarne l'assunzione.

Protocol

Questo protocollo è un estratto da Diegelmann et al., The CApillary FEeder Assay Measures Food Intake in Drosophila melanogaster, J. Vis. Exp. (2017).

1. Assemblaggio ed esecuzione del test FEeder CApillary

1. Se il digiuno non è necessario, trasferire le mosche sperimentali al saggio picchiettando o mediante cerbottana. Assicurati di includere tre fiale di controllo senza mosche per quantificare l'evaporazione.
2. Rimuovere con cautela il puntale della pipetta (volume da 2 a 20 μl) che chiude una delle aperture esterne e inserire un capillare di vetro riempito, con l'estremità inferiore. Fissare i....

Results

Figura 1: Il saggio CApillary FEeder di Drosophila melanogaster. A) Il test di alimentazione con le mosche. La carta da filtro inumidita fornisce acqua sul fondo della fiala. Durante l'esperimento vengono forniti quattro capillari (cibo di colore rosso e blu nei capillari opposti). Si noti che i capillari sono fissati in posizione da un secondo puntale per pipetta e che le posizioni inutilizzate.......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
Fiale (allevamento)	Greiner Bio-One	960177	www.greinerbioone.com
Fiale (saggio CAFE)	Greiner Bio-One	217101	www.greinerbioone.com
Saggio Lid-CAFE	officina	–	–
Scatola di plastica, muretto	Piattaforma	353	www.plastime.it
Coperchio per la scatola di plastica	officina	–	–
Capillari	BLAUBRAND	RIFERIMENTO 7087 07	www.brand.de
Puntali per pipette	Greiner Bio-One	Codice: 771290	www.greinerbioone.com
Cerchi di carta da filtro	Whatman	10 311 804	www.sigmaaldrich.com
D(+)-Saccarosio	AppliChem	57-50-1	www.applichem.com
Etanolo assoluto	Prodotti chimici VWR	20.821.330	www.vwr.com
Colorante alimentare (rosso, E124)	Divertimento sulla schiena	Codice 10027	www.backfun.de
Colorante alimentare (blu, E133)	Divertimento sulla schiena	Codice: 10030	www.backfun.de
Soluzione di sapone (CVK 8)	CVH	Codice 103220	www.cvh.de
Calibro digitale	GARANT	412.616	www.hoffmann-group.com
Fiale (allevamento)			Altezza 9,8 cm, diametro 4,8 cm
Fiale (saggio CAFE)			Altezza 8 cm, diametro 3,3 cm
Saggio Lid-CAFE			Prodotto in officina universitaria, disegno tecnico fornito Per favore clicca qui per scaricare questo file.
Scatola di plastica, muretto			Un inserto a griglia in plastica è stato realizzato su misura per le posizioni delle fiale 8 x 10
Coperchio per la scatola di plastica			Dimensioni (37 x 29 x 18 cm)
Capillari			Norma DIN ISO 7550, direttiva IVD 98/79 EG, estremità lucidate
Puntali per pipette			Le pipette per il cerchio esterno vengono tagliate in base al coperchio
Cerchi di carta da filtro			Il diametro di 45 mm funziona bene se piegato per le fiale utilizzate
D(+)-Saccarosio			Non dannoso
Etanolo assoluto			Liquidi e vapori altamente infiammabili
Colorante alimentare (rosso, E124)			Non dichiarato
Colorante alimentare (blu, E133)			Non dichiarato
Soluzione di sapone (CVK 8)			Sapone inodore neutro
Calibro digitale
Cibo standard per mosche			(per 20 L)
agar			160 g
Lievito di birra			299,33 g
Mais			1.200 g
melassa			1,6 L
Acido propionico			57,3 ml
Nipagin 30%			160 ml