Overview
يصف هذا الفيديو طريقة واحدة لبناء متنفس ذبابة ، والتي يمكن استخدامها لنقل الحشرات بين المرفقات دون تخدير. تم إعداد الطامح في بروتوكول المثال لتجربة لتحديد سلوكيات الاستمالة الفردية
Protocol
هذا البروتوكول هو مقتطف من Barradale وآخرون.، القياس الكمي لسلوك الاستمالة Drosophila، J. Vis. Exp. (2017).
-
إعداد الطامح لنقل Drosophila حية من قارورة الثقافة إلى غرفة الاستمالة. يسمح الطامحون بنقل الحيوانات الواعية إلى الغرف السلوكية لضمان عدم تأثير التخدير على الملاحظة السلوكية اللاحقة.
- باستخدام مقص قطع 1.5 قدم من تايغون أنبوب معرف 1/8", OD 1/4". قطع ما لا يقل عن 1 بوصة من غيض من طرف micropipette 1 مل المتاح. عقد 1 سم مربع قطعة من شبكة (فتح 0.196 بوصة) على طرف قطع.
ملاحظة: تحتوي معظم نصائح 1mL على خط تدرج حيث يجلس الطرف في مربع الحزمة ، وعادة ما يتم قطعه إلى هذا الخط. - وضع مريح الطازجة 1 مل micropipette تلميح على شبكة / قطع تلميح. مراقبة شبكة تشكل حاجزا ضيقا بين اثنين من النصائح. داخل طرف جديد يخلق غرفة عقد للذباب.
- قطع غيض المدقع من طرف micropipette جديدة لتوسيع فتح ما يكفي للسماح بمرور ذبابة واحدة. سوف يطابق الثقب تقريبا افتتاح غرفة الاستمالة (قطرها 1.5-2 مم تقريبا).
- تناسب بشكل مريح نصائح متداخلة على نهاية أنابيب تايغون. دفع النصائح في أنبوب لضمان تناسب ضيق للسماح للضغط فراغ.
- على الطرف الآخر من الأنابيب، وقطع غيض من طرف micropipette 200 ميكروبايت μL وتناسب نهاية قطع ضيقة في الأنابيب. هذا هو الجانب "الفم" من الطامح.
- باستخدام مقص قطع 1.5 قدم من تايغون أنبوب معرف 1/8", OD 1/4". قطع ما لا يقل عن 1 بوصة من غيض من طرف micropipette 1 مل المتاح. عقد 1 سم مربع قطعة من شبكة (فتح 0.196 بوصة) على طرف قطع.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| High-Flex Tygon PVC Clear Tubing | McMaster-Carr | 5229K54 | ID 1/8", OD 1/4", used with micropipettor tips and mesh to construct mouth aspirators |
| Micropipette tips (1 mL and 200 μL) | Genesee Scientific | 24-165, 24-150R | |
| Nylon Mesh Screen, 2 x 2.6" | McMaster-Carr | 9318T44 | Used to construct grooming chamber and mouth aspirators |
