Fly Aspirator Tube: Una herramienta sencilla para transferir Drosophila en vivo

Overview

Este video describe un método para construir un aspirador de moscas, que se puede utilizar para transferir insectos entre recintos sin anestesia. El aspirante en el protocolo de ejemplo estaba preparado para un experimento para cuantificar los comportamientos individuales de aseo

Protocol

Este protocolo es un extracto de Barradale et al., Cuantificación del comportamiento de aseo de Drosophila, J. Vis. Exp. (2017).

1. Prepare un aspirador para mover Drosophila en vivo de un vial de cultivo a la cámara de aseo. Los aspirantes permiten la transferencia de animales conscientes a las cámaras conductuales para asegurarse de que la anestesia no afecte la observación conductual posterior.
   1. Usando tijeras cortadas 1.5 pies de tubo de tygon ID 1/8", OD 1/4". Corte al menos 1 pulgada de la punta de una punta de micropipette desechable de 1 ml. Sostenga una pieza cuadrada de malla de 1 cm (abertura de 0,196 pulgadas) sobre la punta de corte.
      NOTA: La mayoría de las puntas de 1mL tienen una línea de gradación donde la punta se encuentra en el cuadro de paquete, normalmente cortada a esa línea.
   2. Coloque cómodamente una punta de micropipette fresca de 1 ml sobre la punta de malla/corte. Observe la malla formar una barrera apretada entre las dos puntas. El interior de la nueva punta crea una cámara de sujeción para moscas.
   3. Corte la punta extrema de la nueva punta de micropipette para ampliar la abertura lo suficiente como para permitir el paso de una sola mosca. El agujero coincidirá aproximadamente con la abertura de la cámara de aseo (aproximadamente 1,5-2 mm de diámetro).
   4. Ajuste cómodamente las puntas anidadas en el extremo del tubo de tygon. Empuje las puntas hacia el tubo para garantizar un ajuste ajustado para permitir la presión de vacío.
   5. En el otro extremo del tubo, corte la punta de una punta de micropipette de 200 μL y ajuste el extremo de corte estrecho en el tubo. Este es el lado "boca" del aspirador.

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
High-Flex Tygon PVC Clear Tubing	McMaster-Carr	5229K54	ID 1/8", OD 1/4", used with micropipettor tips and mesh to construct mouth aspirators
Micropipette tips (1 mL and 200 μL)	Genesee Scientific	24-165, 24-150R
Nylon Mesh Screen, 2 x 2.6"	McMaster-Carr	9318T44	Used to construct grooming chamber and mouth aspirators