Sinek Aspiratör Tüpü: Canlı Drosophila Aktarmak için Basit Bir Araç

Overview

Bu video, böcekleri anestezi olmadan muhafazalar arasında aktarmak için kullanılabilecek bir sinek aspiratörü oluşturmak için bir yöntemi açıklar. Örnek protokoldeki aspiratör, bireysel tımar davranışlarını ölçmek için bir deney için hazırlandı

Protocol

Bu protokol Barradale ve ark., Drosophila Tımar Davranışının Nicelleştirilmesi, J. Vis. Exp. (2017) bir alıntıdır.

1. Canlı Drosophila'yı bir kültür şişesinden tımar odasına taşımak için bir aspiratör hazırlayın. Aspiratörler, anestezinin sonraki davranışsal gözlemi etkilememesini sağlamak için bilinçli hayvanların davranış odalarına aktarılmasına izin verir.
   1. Makas kullanılarak 1,5 feet tygon boru kimliği 1/8", OD 1/4". 1 mL'lik tek kullanımlık mikropipette ucunun ucundan en az 1 inç kesin. Kesme ucunun üzerinde 1 cm karelik bir ağ parçası (0,196 inç açıklığı) tutun.
      NOT: Çoğu 1mL ipucu, ucun paket kutusuna oturduğu bir derecelendirme çizgisine sahiptir ve genellikle bu satıra kesilir.
   2. Ağ/kesim ucunun üzerine 1 mL'lik taze bir mikropipette ucu sıkıca yerleştirin. Ağın iki uç arasında sıkı bir bariyer oluşturduğunu gözlemleyin. Yeni ucun içi sinekler için bir tutma odası oluşturur.
   3. Tek bir sineğin geçişine izin edecek kadar açıklığı genişletmek için yeni mikropipette ucunun uç ucunu kesin. Delik kabaca tımar odasının açıklığıyla eşleşecektir (yaklaşık 1,5-2 mm çapında).
   4. İç içe uçları tygon borunun ucuna sıkıca takın. Vakum basıncına izin vermek için sıkı bir uyum sağlamak için uçları tüpe itin.
   5. Borunun diğer ucunda, 200 μL'lik bir mikropipette ucun ucunu kesin ve dar kesim ucunu boruya takın. Bu aspiratör'ün "ağız" tarafıdır.

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
High-Flex Tygon PVC Clear Tubing	McMaster-Carr	5229K54	ID 1/8", OD 1/4", used with micropipettor tips and mesh to construct mouth aspirators
Micropipette tips (1 mL and 200 μL)	Genesee Scientific	24-165, 24-150R
Nylon Mesh Screen, 2 x 2.6"	McMaster-Carr	9318T44	Used to construct grooming chamber and mouth aspirators