צינור שאיפה לטוס: כלי פשוט להעביר Drosophila חי

Overview

סרטון זה מתאר שיטה אחת לבניית שאפתן זבובים, שניתן להשתמש בה להעברת חרקים בין מתחמים ללא הרדמה. השואף בפרוטוקול הדוגמה הוכן לניסוי לכימות התנהגויות טיפוח בודדות

Protocol

פרוטוקול זה הוא קטע מתוך Barradale et al., כימות של התנהגות טיפוח Drosophila, J. Vis. Exp. (2017).

1. הכינו שאיפה להעברת דרוזופילה חיה מבקבוקון תרבות לתא הטיפוח. שאיפות מאפשרות העברת בעלי חיים מודעים לתאי ההתנהגות כדי להבטיח שהרדמת ההרדמות לא תשפיע על התצפית ההתנהגותית שלאחר מכן.
   1. באמצעות מספריים לחתוך 1.5 מטרים של מזהה צינורות טיגון 1/8", OD 1/4". חותכים לפחות 1 אינץ ' מהקצה של קצה מיקרופיפט חד פעמי 1 מ"ל. החזק פיסת רשת מרובעת בגודל 1 ס"מ (פתיחה של 0.196 אינץ') מעל קצה החתך.
      שים לב: לרוב העצות של 1mL יש קו הדרגתי שבו הקצה יושב בתיבת החבילה, בדרך כלל חתוך לקו זה.
   2. מניחים בנוחות קצה מיקרופיפט טרי של 1 מ"ל מעל קצה הרשת/חתוך. שימו לב שהרשת יוצרה מחסום הדוק בין שני הטיפים. החלק הפנימי של הקצה החדש יוצר תא מעצר לזבובים.
   3. חותכים את הקצה הקיצוני של קצה micropipette החדש כדי להרחיב את הפתח מספיק כדי לאפשר מעבר של זבוב אחד. החור יתאים בערך לפתיחת תא הטיפוח (בקוטר של כ-1.5-2 מ"מ).
   4. מתאימים בנוחות את הטיפים המקוננים לקצה צינורות הטיגון. לדחוף את הטיפים לתוך הצינור כדי להבטיח התאמה הדוקה כדי לאפשר לחץ ואקום.
   5. בצד השני של הצינור, לחתוך את הקצה של קצה micropipette 200 μL ולהתאים את הקצה לחתוך צר לתוך הצינור. זהו צד ה"פה" של השואף.

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
High-Flex Tygon PVC Clear Tubing	McMaster-Carr	5229K54	ID 1/8", OD 1/4", used with micropipettor tips and mesh to construct mouth aspirators
Micropipette tips (1 mL and 200 μL)	Genesee Scientific	24-165, 24-150R
Nylon Mesh Screen, 2 x 2.6"	McMaster-Carr	9318T44	Used to construct grooming chamber and mouth aspirators