Overview
이 비디오는 마취없이 인클로저 사이에 곤충을 전송하는 데 사용할 수있는 플라이 흡인기를 구축하는 한 가지 방법을 설명합니다. 예제 프로토콜의 흡인기는 개별 그루밍 동작을 정량화하는 실험을 위해 준비되었습니다.
Protocol
이 프로토콜은 바라데일 외에서발췌. Drosophila 그루밍 행동의 정량화, J. Vis. Exp. (2017).
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문화 바이알에서 그루밍 챔버로 라이브 드로소필라를 이동하기위한 흡인기를 준비합니다. 호흡보호구는 마취가 후속 행동 관찰에 영향을 미치지 않도록 의식하는 동물을 행동 챔버로 옮길 수 있게 합니다.
- 가위를 사용하여 1.5 피트의 타이곤 튜브 ID 1/8", OD 1/4"를 잘라냅니다. 1 mL 일회용 마이크로 파이프 팁의 끝에서 적어도 1 인치를 잘라냅니다. 컷 팁 위에 1cm 정사각형 메쉬 조각(0.196인치 열기)을 잡습니다.
참고: 대부분의 1mL 팁에는 팁이 패키지 상자에 있는 그라데이션 라인이 있으며 일반적으로 해당 줄로 잘라냅니다. - 메쉬/컷 팁 위에 신선한 1mL 마이크로피펫 팁을 배치합니다. 두 팁 사이에 좁은 장벽을 형성하는 메시를 관찰합니다. 새로운 팁의 내부는 파리를 위한 지주 챔버를 만듭니다.
- 새로운 마이크로파이펫 팁의 극단적인 끝을 잘라 서 개구부를 넓어 단일 플라이의 통과를 허용 합니다. 구멍은 대략 그루밍 챔버 (직경 약 1.5-2mm)의 오프닝과 일치합니다.
- 중첩 된 팁에 딱 맞게 타이곤 튜브의 끝에 맞습니다. 팁을 튜브에 밀어 넣고 진공 압력을 가할 수 있도록 단단히 맞습니다.
- 튜브의 다른 쪽 끝에, 200 μL 마이크로 파이펫 팁의 끝을 잘라 튜브에 좁은 컷 끝을 맞춥다. 이것은 흡구의 "입"측면입니다.
- 가위를 사용하여 1.5 피트의 타이곤 튜브 ID 1/8", OD 1/4"를 잘라냅니다. 1 mL 일회용 마이크로 파이프 팁의 끝에서 적어도 1 인치를 잘라냅니다. 컷 팁 위에 1cm 정사각형 메쉬 조각(0.196인치 열기)을 잡습니다.
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Materials
Name | Company | Catalog Number | Comments |
High-Flex Tygon PVC Clear Tubing | McMaster-Carr | 5229K54 | ID 1/8", OD 1/4", used with micropipettor tips and mesh to construct mouth aspirators |
Micropipette tips (1 mL and 200 μL) | Genesee Scientific | 24-165, 24-150R | |
Nylon Mesh Screen, 2 x 2.6" | McMaster-Carr | 9318T44 | Used to construct grooming chamber and mouth aspirators |