Fly Aspirator Tube: Ein einfaches Werkzeug, um Live Drosophila zu übertragen

Overview

Dieses Video beschreibt eine Methode zum Bau eines Fliegensaugers, mit dem Insekten ohne Anästhesie zwischen Gehegen übertragen werden können. Der Aspirator im Beispielprotokoll wurde für ein Experiment zur Quantifizierung des individuellen Pflegeverhaltens vorbereitet.

Protocol

Dieses Protokoll ist ein Auszug aus Barradale et al., Quantification of Drosophila Grooming Behavior, J. Vis. Exp. (2017).

1. Bereiten Sie einen Aspirator für den Umzug live Drosophila von einer Kultur-Fläschigkeit in die Pflegekammer. Aspiratoren ermöglichen die Übertragung bewusster Tiere in die Verhaltenskammern, um sicherzustellen, dass die Anästhesie die nachfolgende Verhaltensbeobachtung nicht beeinträchtigt.
   1. Mit Schere geschnitten 1,5 Fuß Tygon-Schlauch-ID 1/8", OD 1/4". Schneiden Sie mindestens 1 Zoll von der Spitze einer 1 ml Einweg-Mikropipette-Spitze ab. Halten Sie ein 1 cm großes Stück Mesh (Öffnung 0,196 Zoll) über die geschnittene Spitze.
      HINWEIS: Die meisten 1ml-Spitzen haben eine Abstufungslinie, in der sich die Spitze in der Paketbox befindet, die in der Regel auf diese Linie geschnitten wird.
   2. Eine frische 1 ml Mikropipette-Spitze über die Netz-/Schnittspitze legen. Beobachten Sie, dass das Netz eine enge Barriere zwischen den beiden Spitzen bildet. Die Innenseite der neuen Spitze schafft eine Haltekammer für Fliegen.
   3. Schneiden Sie die extreme Spitze der neuen Mikropipette-Spitze, um die Öffnung so weit zu erweitern, dass sie den Durchgang einer einzelnen Fliege ermöglicht. Das Loch entspricht in etwa der Öffnung der Pflegekammer (ca. 1,5-2 mm Durchmesser).
   4. Die verschachtelten Spitzen an das Ende der Tygon-Schläuche passen. Drücken Sie die Spitzen in das Rohr, um eine enge Passform zu gewährleisten, um Vakuumdruck zu ermöglichen.
   5. Am anderen Ende des Schlauches die Spitze einer 200-L-Mikropipette-Spitze schneiden und das schmal geschnittene Ende in den Schlauch einbauen. Dies ist die "Mund"-Seite des Aspirators.

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
High-Flex Tygon PVC Clear Tubing	McMaster-Carr	5229K54	ID 1/8", OD 1/4", used with micropipettor tips and mesh to construct mouth aspirators
Micropipette tips (1 mL and 200 μL)	Genesee Scientific	24-165, 24-150R
Nylon Mesh Screen, 2 x 2.6"	McMaster-Carr	9318T44	Used to construct grooming chamber and mouth aspirators