Fly Aspirator Tube: een eenvoudig hulpmiddel om live drosophila over te dragen

Overview

Deze video beschrijft één methode om een vliegenaspirator te bouwen, die kan worden gebruikt om insecten zonder anesthesie tussen behuizingen over te brengen. De aspirator in het voorbeeldprotocol was voorbereid op een experiment om individueel verzorgingsgedrag te kwantificeren

Protocol

Dit protocol is een fragment uit Barradale et al., Quantification of Drosophila Grooming Behavior, J. Vis. Exp. (2017).

1. Bereid een aspirator voor op het verplaatsen van levende Drosophila van een cultuurflacon naar de verzorgingskamer. Aspirators maken overdracht van bewuste dieren naar de gedragskamers mogelijk om ervoor te zorgen dat anesthesie geen invloed heeft op latere gedragsobservatie.
   1. Met behulp van een schaar gesneden 1,5 voet van tygon buizen ID 1/8", OD 1/4". Snijd ten minste 1 inch van de punt van een 1 ml wegwerp micropipet tip. Houd een vierkant stuk gaas van 1 cm (opening 0,196 inch) over de snijpunt.
      OPMERKING: De meeste 1mL-tips hebben een gradatielijn waar de tip in de verpakkingsdoos zit, meestal gesneden tot die lijn.
   2. Plaats een verse 1 ml micropipet tip goed over de mesh/cut tip. Let erop dat het gaas een strakke barrière vormt tussen de twee uiteinden. De binnenkant van de nieuwe tip creëert een houdkamer voor vliegen.
   3. Snijd de uiterste punt van de nieuwe micropipettip om de opening voldoende te verbreden om doorgang van een enkele vlieg mogelijk te maken. Het gat komt ongeveer overeen met de opening van de trimkamer (ongeveer 1,5-2 mm in diameter).
   4. Plaats de geneste uiteinden goed op het uiteinde van de tygonslang. Duw de uiteinden in de buis om een strakke pasvorm te garanderen om vacuümdruk mogelijk te maken.
   5. Snijd aan de andere kant van de slang de punt van een micropipetpunt van 200 μL en plaats het smalle snijuiteinde in de slang. Dit is de "mond" kant van de aspirator.

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
High-Flex Tygon PVC Clear Tubing	McMaster-Carr	5229K54	ID 1/8", OD 1/4", used with micropipettor tips and mesh to construct mouth aspirators
Micropipette tips (1 mL and 200 μL)	Genesee Scientific	24-165, 24-150R
Nylon Mesh Screen, 2 x 2.6"	McMaster-Carr	9318T44	Used to construct grooming chamber and mouth aspirators