Tubo de aspirador de mosca: uma ferramenta simples para transferir drosophila ao vivo

Overview

Este vídeo descreve um método para construir um aspirador de mosca, que pode ser usado para transferir insetos entre gabinetes sem anestesia. O aspirador no protocolo de exemplo foi preparado para um experimento para quantificar comportamentos individuais de preparação

Protocol

Este protocolo é um trecho de Barradale et al., Quantificação do Comportamento de Aliciamento de Drosophila, J. Vis. Exp. (2017).

1. Prepare um aspirador para mover Drosophila ao vivo de um frasco de cultura para a câmara de preparação. Os aspiradores permitem a transferência de animais conscientes para as câmaras comportamentais para garantir que a anestesia não afete a observação comportamental subsequente.
   1. Usando tesouras cortou 1,5 pés de tubo de tygon ID 1/8", OD 1/4". Corte pelo menos 1 polegada da ponta de uma dica de micropipette descartável de 1 mL. Segure um pedaço quadrado de 1 cm de malha (abrindo 0,196 polegadas) sobre a ponta de corte.
      NOTA: A maioria das pontas de 1mL tem uma linha de gradação onde a ponta fica na caixa de pacotes, normalmente cortada para essa linha.
   2. Coloque uma dica fresca de micropipette de 1 mL sobre a ponta de malha/corte. Observe a malha formar uma barreira apertada entre as duas pontas. O interior da nova ponta cria uma câmara de espera para moscas.
   3. Corte a ponta extrema da nova ponta de micropipette para ampliar a abertura o suficiente para permitir a passagem de uma única mosca. O orifício corresponderá aproximadamente à abertura da câmara de preparação (aproximadamente 1,5-2 mm de diâmetro).
   4. Snugly encaixar as pontas aninhadas na extremidade da tubulação de tygon. Empurre as pontas para dentro do tubo para garantir um ajuste apertado para permitir a pressão do vácuo.
   5. Na outra extremidade da tubulação, corte a ponta de uma ponta de micropipette de 200 μL e encaixe a extremidade estreita do corte na tubulação. Este é o lado "boca" do aspirador.

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
High-Flex Tygon PVC Clear Tubing	McMaster-Carr	5229K54	ID 1/8", OD 1/4", used with micropipettor tips and mesh to construct mouth aspirators
Micropipette tips (1 mL and 200 μL)	Genesee Scientific	24-165, 24-150R
Nylon Mesh Screen, 2 x 2.6"	McMaster-Carr	9318T44	Used to construct grooming chamber and mouth aspirators