Overview
このビデオでは、麻酔なしで囲いの間で昆虫を移動するために使用できるフライ吸引器を構築する1つの方法について説明します。プロトコル例の吸着器は、個々のグルーミング行動を定量化する実験のために準備された
Protocol
このプロトコルは、バラデールらからの抜粋であり、ショウジョウバエグルーミング行動の定量化、J.Vis.Exp.(2017)
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生きた ショウジョウバエ を培養バイアルからグルーミングチャンバーに移動するための吸引器を準備します。吸引器は、麻酔がその後の行動観察に影響を与えないことを確実にするために、意識的な動物を行動室に移すことを可能にする。
- はさみを使用して、タイゴンチューブID 1/8"、OD 1/4"の1.5フィートをカット。1 mL 使い捨てマイクロピペットチップの先端から少なくとも1インチを切ります。カットチップの上に1cmの正方形のメッシュ(0.196インチを開く)を持ちなさい。
注: ほとんどの1mLチップには、チップがパッケージボックスに置かれて、通常はそのラインにカットされるグラデーションラインがあります。 - メッシュ/カットチップの上に新鮮な1 mLマイクロピペットチップをぴったりと置きます。メッシュが 2 つの先端の間に強固なバリアを形成するのを観察します。新しい先端の内部はハエのためのホールディングチャンバーを作成する。
- 新しいマイクロピペットチップの極端な先端をカットして、単一のハエの通過を可能にするのに十分な開口部を広げます。穴は、約1.5-直径の穴が開いた部屋の開口部と一致します。
- 入れ子になった先端をタイゴンチューブの端にぴったりとフィットさせます。チップをチューブに押し込み、真空圧を可能にする密着性を確保します。
- チューブのもう一方の端で、200 μL マイクロピペットチップの先端を切り、狭いカット端をチューブにフィットします。これは、吸引器の「口」側です。
- はさみを使用して、タイゴンチューブID 1/8"、OD 1/4"の1.5フィートをカット。1 mL 使い捨てマイクロピペットチップの先端から少なくとも1インチを切ります。カットチップの上に1cmの正方形のメッシュ(0.196インチを開く)を持ちなさい。
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Materials
Name | Company | Catalog Number | Comments |
High-Flex Tygon PVC Clear Tubing | McMaster-Carr | 5229K54 | ID 1/8", OD 1/4", used with micropipettor tips and mesh to construct mouth aspirators |
Micropipette tips (1 mL and 200 μL) | Genesee Scientific | 24-165, 24-150R | |
Nylon Mesh Screen, 2 x 2.6" | McMaster-Carr | 9318T44 | Used to construct grooming chamber and mouth aspirators |