Overview
Questo video descrive un metodo per costruire un aspiratore di mosca, che può essere utilizzato per trasferire gli insetti tra recinti senza anestesia. L'aspiratore nel protocollo di esempio è stato preparato per un esperimento per quantificare i singoli comportamenti di toelettatura
Protocol
Questo protocollo è un estratto da Barradale et al., Quantificazione del comportamento di toelettatura drosophila, J. Vis. Exp.
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Prepara un aspiratore per spostare drosophila dal vivo da una fiala culturale alla camera di toelettatura. Gli aspiratori consentono il trasferimento di animali coscienti alle camere comportamentali per garantire che l'anestesia non influenzi la successiva osservazione comportamentale.
- Usando le forbici tagliate 1,5 piedi di tigon tubing ID 1/8", OD 1/4". Tagliare almeno 1 pollice dalla punta di una punta in micropipetta usa e getta da 1 mL. Tenere un pezzo quadrato di rete di 1 cm (apertura 0,196 pollici) sopra la punta tagliata.
NOTA: La maggior parte delle punte da 1 mL ha una linea di gradazione in cui la punta si trova nella scatola del pacchetto, in genere tagliata a quella linea. - Posizionare comodamente una nuova punta in micropipetta da 1 mL sulla punta della rete/taglio. Osservare la rete formare una stretta barriera tra le due punte. L'interno della nuova punta crea una camera di tenuta per le mosche.
- Tagliare la punta estrema della nuova punta in micropipetta per allargare l'apertura abbastanza da consentire il passaggio di una singola mosca. Il foro corrisponderà approssimativamente all'apertura della camera di toelettatura (circa 1,5-2 mm di diametro).
- Si adattano perfettamente alle punte nidificate all'estremità del tubo del tigono. Spingere le punte nel tubo per garantire una vestibilità aderente per consentire la pressione sottovuoto.
- All'altra estremità del tubo, tagliare la punta di una punta in micropipetta da 200 μL e inserire l'estremità stretta nel tubo. Questo è il lato "bocca" dell'aspiratore.
- Usando le forbici tagliate 1,5 piedi di tigon tubing ID 1/8", OD 1/4". Tagliare almeno 1 pollice dalla punta di una punta in micropipetta usa e getta da 1 mL. Tenere un pezzo quadrato di rete di 1 cm (apertura 0,196 pollici) sopra la punta tagliata.
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Materials
Name | Company | Catalog Number | Comments |
High-Flex Tygon PVC Clear Tubing | McMaster-Carr | 5229K54 | ID 1/8", OD 1/4", used with micropipettor tips and mesh to construct mouth aspirators |
Micropipette tips (1 mL and 200 μL) | Genesee Scientific | 24-165, 24-150R | |
Nylon Mesh Screen, 2 x 2.6" | McMaster-Carr | 9318T44 | Used to construct grooming chamber and mouth aspirators |