Fly Aspirator Tube: Et simpelt værktøj til at overføre Live Drosophila

Overview

Denne video beskriver en metode til at opbygge en flue aspirator, som kan bruges til at overføre insekter mellem indhegninger uden bedøvelse. Aspiratoren i eksempelprotokollen blev forberedt til et eksperiment for at kvantificere individuel plejeadfærd

Protocol

Denne protokol er et uddrag fra Barradale et al.,Kvantificering af Drosophila Grooming Behavior, J. Vis. Exp. (2017).

1. Forbered en aspirator til at flytte levende Drosophila fra et kulturglas til plejekammeret. Aspiratorer tillader overførsel af bevidste dyr til adfærdskamrene for at sikre, at anæstesi ikke påvirker efterfølgende adfærdsmæssig observation.
   1. Brug saks skåret 1,5 meter tygon slange ID 1 / 8 ", OD 1 / 4". Skær mindst 1 tomme ud af spidsen af en 1 mL engangs mikropipette spids. Hold et 1 cm kvadratisk stykke maske (åbning 0,196 tommer) over snitspidsen.
      BEMÆRK: De fleste 1mL tips har en graduering linje, hvor spidsen sidder i pakkeboksen, typisk skåret til denne linje.
   2. Placer en frisk 1 mL mikropipettespids over maske-/snitspidsen. Overhold masken danner en stram barriere mellem de to spidser. Indersiden af den nye spids skaber et holdekammer til fluer.
   3. Skær den ekstreme spids af den nye micropipette spids til at udvide åbningen nok til at tillade passage af en enkelt flue. Hullet vil stort set matche åbningen af plejekammeret (ca. 1,5-2 mm i diameter).
   4. Sæt de indlejrede spidser tæt på enden af tygonrøret. Skub spidserne ind i røret for at sikre en tæt pasform for at give mulighed for vakuumtryk.
   5. I den anden ende af slangen skæres spidsen af en 200 μL mikropipettespids og monteres i den smalle afskårne ende i slangen. Dette er "munden" side af aspiratoren.

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
High-Flex Tygon PVC Clear Tubing	McMaster-Carr	5229K54	ID 1/8", OD 1/4", used with micropipettor tips and mesh to construct mouth aspirators
Micropipette tips (1 mL and 200 μL)	Genesee Scientific	24-165, 24-150R
Nylon Mesh Screen, 2 x 2.6"	McMaster-Carr	9318T44	Used to construct grooming chamber and mouth aspirators