फ्लाई एस्पिरेटर ट्यूब: लाइव ड्रोसोफिला स्थानांतरित करने के लिए एक सरल उपकरण

Overview

यह वीडियो एक फ्लाई एस्पिरेटर बनाने के लिए एक विधि का वर्णन करता है, जिसका उपयोग संज्ञाहरण के बिना बाड़ों के बीच कीड़ों को स्थानांतरित करने के लिए किया जा सकता है। उदाहरण प्रोटोकॉल में एस्पिरेटर व्यक्तिगत ग्रूमिंग व्यवहारों की मात्रा निर्धारित करने के लिए एक प्रयोग के लिए तैयार किया गया था

Protocol

यह प्रोटोकॉल बारराडेल एट अल(2017) का एक अंश है, जो ड्रोसोफिला ग्रूमिंग बिहेवियर, जे विस एक्सपी (2017) का क्वांटिफिकेशन है।

1. एक संस्कृति शीशी से ग्रूमिंग चैंबर में लाइव ड्रोसोफिला ले जाने के लिए एक एस्पिरेटर तैयार करें। एस्पिरेटर सचेत जानवरों को व्यवहार कक्षों में स्थानांतरित करने की अनुमति देते हैं ताकि यह सुनिश्चित किया जा सके कि संज्ञाहरण बाद के व्यवहार अवलोकन को प्रभावित नहीं करता है।
   1. कैंची का उपयोग कर 1.5 फीट tygon टयूबिंग आईडी 1/8 ", OD 1/4" काट दिया । 1 एमएल डिस्पोजेबल माइक्रोपिपेट टिप की नोक से कम से कम 1 इंच की दूरी काटें। कट टिप पर जाल का 1 सेमी वर्ग टुकड़ा (0.196 इंच खोलना) रखें।
      नोट: अधिकांश 1mL युक्तियों में एक ग्रेडेशन लाइन होती है जहां टिप पैकेज बॉक्स में बैठती है, आमतौर पर उस लाइन में कटौती होती है।
   2. Snugly जाल पर एक ताजा 1 एमएल माइक्रोपिपेट टिप जगह/ जाल का निरीक्षण करें दो सुझावों के बीच एक तंग बाधा के रूप में। नई टिप के अंदर मक्खियों के लिए एक होल्डिंग कक्ष बनाता है।
   3. एक ही मक्खी के पारित होने की अनुमति देने के लिए पर्याप्त खोलने को चौड़ा करने के लिए नए माइक्रोपिपेट टिप के चरम टिप को काटें। छेद मोटे तौर पर ग्रूमिंग चैंबर (व्यास में लगभग 1.5-2 मिमी) के उद्घाटन से मेल खाता है।
   4. नीट ने नेस्टेड टिप्स को टायगॉन ट्यूबिंग के अंत में फिट करें। वैक्यूम दबाव के लिए अनुमति देने के लिए एक तंग फिट सुनिश्चित करने के लिए ट्यूब में सुझावों को पुश करें।
   5. टयूबिंग के दूसरे छोर पर, 200 माइक्रोपिपेट टिप की नोक काटें और संकीर्ण कट एंड को टयूबिंग में फिट करें। यह एस्पिरेटर का "मुंह" पक्ष है।

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
High-Flex Tygon PVC Clear Tubing	McMaster-Carr	5229K54	ID 1/8", OD 1/4", used with micropipettor tips and mesh to construct mouth aspirators
Micropipette tips (1 mL and 200 μL)	Genesee Scientific	24-165, 24-150R
Nylon Mesh Screen, 2 x 2.6"	McMaster-Carr	9318T44	Used to construct grooming chamber and mouth aspirators