Fly Aspirator Tube: Et enkelt verktøy for å overføre Live Drosophila

Overview

Denne videoen beskriver en metode for å bygge en flyaspirator, som kan brukes til å overføre insekter mellom innkapslinger uten anestesi. Aspiratoren i eksempelprotokollen ble utarbeidet for et eksperiment for å kvantifisere individuell grooming atferd

Protocol

Denne protokollen er et utdrag fra Barradale et al.,Kvantifisering av Drosophila Grooming Behavior, J. Vis. Exp. (2017).

1. Forbered en aspirator for å flytte levende Drosophila fra et kultur hetteglass til grooming kammeret. Aspiratorer tillater overføring av bevisste dyr til atferdskamrene for å sikre at anestesi ikke påvirker etterfølgende atferdsobservasjon.
   1. Bruk saks kuttet 1,5 fot tygonrør ID 1/8", OD 1/4". Klipp minst 1 tomme av spissen av en 1 ml engangs mikropipettespiss. Hold et 1 cm firkantet nett (åpning 0,196 tommer) over klippespissen.
      MERK: De fleste 1ml-tips har en graderingslinje der spissen sitter i pakkeboksen, vanligvis kuttet til den linjen.
   2. Plasser en frisk 1 ml mikropipettespiss over netting/kuttet spiss. Vær oppmerksom på at nettet danner en tett barriere mellom de to spissene. Innsiden av den nye spissen skaper et holdekammer for fluer.
   3. Klipp den ekstreme spissen av den nye mikropipettespissen for å utvide åpningen nok til å tillate passasje av en enkelt flue. Hullet vil omtrent samsvare med åpningen av pleiekammeret (ca. 1,5-2 mm i diameter).
   4. Monter de nestede spissene godt på enden av tygonslangen. Skyv spissene inn i røret for å sikre en tett passform for å tillate vakuumtrykk.
   5. I den andre enden av slangen, kutt spissen av en 200 μL mikropipettespiss og monter den smale kuttenden i slangen. Dette er "munn"-siden av aspiratoren.

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
High-Flex Tygon PVC Clear Tubing	McMaster-Carr	5229K54	ID 1/8", OD 1/4", used with micropipettor tips and mesh to construct mouth aspirators
Micropipette tips (1 mL and 200 μL)	Genesee Scientific	24-165, 24-150R
Nylon Mesh Screen, 2 x 2.6"	McMaster-Carr	9318T44	Used to construct grooming chamber and mouth aspirators