Summary
Neointimal hyperplasia arterialized रगों में एक प्रकार का रोग का प्राथमिक कारण है. हम एक नए प्रोटोकॉल जिससे सही बाहरी गले नस grafted है Sprague Dawley चूहों के आम मन्या धमनी में कफ तकनीक का उपयोग का प्रस्ताव है. बलिदान के समय बिंदु पर जीवित रहने की दर 100% थी.
Abstract
Neointimal hyperplasia arterialized नसों कि धमनी कोरोनरी बाईपास सर्जरी में महान के रूप में के रूप में अच्छी तरह से arteriovenous fistulas में परिधीय धमनी बाईपास सर्जरी में, महत्व के हैं में एक प्रकार का रोग के मुख्य कारणों में 1-5 आम मन्या धमनी में नस भ्रष्टाचार क्षेपक की प्रयोगात्मक प्रक्रिया कफ तकनीक का उपयोग करके कई अनुसंधान परियोजनाओं में लागू किया गया है neointimal hyperplasia और चिकित्सीय विकल्पों में यह पता करने की aetiology की जांच 6-8 कफ पोत शाखामिलन संबंधी remodeling रोकता है और अनुचित लाभ कमाने की चेष्टा करना भीतर अशांति लाती है और इस तरह neointimal hyperplasia के विकास.
का प्रयोग बेहतर caval नस भ्रष्टाचार शिरापरक उपर्युक्त क्रिया प्रयोग के लिए एक स्थापित छोटे पशु मॉडल है 9-11 यह वर्तमान प्रोटोकॉल एक स्थापित कंठ का नस भ्रष्टाचार क्षेपक पहले Zou एट अल द्वारा वर्णित तकनीक. 9 के रूप में के रूप में अच्छी तरह से दूसरों के लिए संदर्भित करता है. 12-14
प्रक्रिया को सरल बनाने के लिए और के लिए प्रयोगात्मक जरूरत जानवरों की संख्या कम से कम, वीडियो प्रशिक्षण के द्वारा एक विस्तृत आपरेशन प्रोटोकॉल प्रस्तुत किया है. इस वीडियो नौसिखिए सर्जन की मदद करने के लिए दोनों कफ तकनीक और नस भ्रष्टाचार क्षेपक सीखना चाहिए. इसके द्वारा, सही बाहरी गले नस कफ तकनीक में 21 महिला Sprague Dawley कि 21 दिन, 42 और 84, क्रमशः पर बलिदान किया गया तीन बराबर समूहों में वर्गीकृत चूहों के आम मन्या धमनी में grafted किया गया था. विशेष रूप से, कोई दाता जानवरों की जरूरत थे और है क्योंकि ऑटो प्रत्यारोपण प्रदर्शन किया गया. बलिदान के समय बिंदु पर जीवित रहने की दर 100% थी. इसके अलावा, भ्रष्टाचार प्रत्यक्षता दर पहले 10 जानवरों के लिए संचालित 60% और शेष 11 जानवरों के लिए 82% थी. बलिदान के समय रक्त के प्रवाह 8 ± 3 मिलीग्राम / मिनट था. अंत में इस शल्य चिकित्सा प्रोटोकॉल काफी सरल, अनुकूलन, और इस COMP मानकीकरणप्रक्रिया licated. यह नौसिखिए सर्जनों आसान, कदम दर कदम अनुदेश देता है, संभव नुकसान समझा, जिससे उन्हें विशेषज्ञता हासिल करने के लिए तेजी से और प्रायोगिक पशुओं के बेकार बलिदान से बचने में मदद.
Protocol
1. प्रायोगिक पशुओं
- सभी प्रयोगों जो पशु संरक्षण FELASA दिशा निर्देशों के साथ अनुसार, प्रदर्शन के लिए एक स्थानीय आचार समिति अनुमोदन प्राप्त है.
- महिला Sprague-Dawley चूहों के लिए किसी भी व्यावसायिक ब्रीडर (जैसे चार्ल्स नदी Wiga GmbH, Sulzfeld, जर्मनी) से खरीद के लिए उपलब्ध का प्रयोग करें. हम 21 7 कि प्रत्येक 6 3, और 12 सप्ताह में बलिदान किया गया postoperatively जानवरों के तीन समूहों में विभाजित जानवरों का इस्तेमाल किया. खरीद के समय जानवरों को उम्र के 12 सप्ताह हो सकता है और 250-300 जी तौलना चाहिए.
- जलवायु नियंत्रित 21 के एक परिवेश के तापमान वाले कमरे में जानवरों रखें डिग्री सेल्सियस, 60% सापेक्ष आर्द्रता और भोजन और पानी के लिए स्वतंत्र पहुँच के साथ एक 12-घंटे प्रकाश अंधेरे चक्र.
2. संज्ञाहरण और ऑपरेटिव तैयारी
- एक Plexiglas संज्ञाहरण मशीन से जुड़ा है, 1 एल / मिनट की एक ऑक्सीजन का प्रवाह दर पर सेट बॉक्स का उपयोग करके सामान्य संज्ञाहरण प्रेरित और एक isofluorane vaporizer with 5% चतनाशून्य करनेवाली औषधि गैस.
- 1.5% पर isofluorane vaporizer के साथ के रूप में पशुओं की गहरी संवेदी सजगता के रूप में जल्द ही दबा दिया संज्ञाहरण बनाए रखें.
- एक शरीर वार्मिंग प्लेट पर लापरवाह स्थिति में चूहों को ठीक करें.
- एक depilation क्रीम के साथ अपने फर हटाने, जबड़े कोण से नीचे 2 सेमी manubrium sterni नीचे प्रत्येक जानवर के आपरेशन क्षेत्र तैयार.
- शल्य चिकित्सा के क्षेत्र, पशु और सर्जन के सामने पर तैयार क्षेत्र ध्यान देकर एक बाँझ शल्य क्षेत्र तैयार:
- एक निस्संक्रामक के साथ benchtop साफ.
- शल्य चिकित्सा रगडें समाधान के कई अनुप्रयोगों (जैसे chlorhexidine और 70% isopropyl शराब) का उपयोग करके चीरा साइट तैयार करें. Chlorhexidine 1 लागू, शराब, 2 और अंत में, साफ़ समाधान.
- एक डिस्पोजेबल सर्जिकल गाउन और सर्जिकल दस्ताने या वैकल्पिक रूप से, परीक्षा के दस्ताने है कि पहले किया गया है w धोया पहनेंith एक शल्य निस्संक्रामक.
- आपरेशन प्रक्रिया में बाँझ microsurgery उपकरणों का प्रयोग करें.
- 10-20-गुना बढ़ाई में एक आपरेशन माइक्रोस्कोप (वन्य Heerbrugg M650, Gais, स्विट्जरलैंड) का प्रयोग करें.
3. शरीर - रचना
चित्रा 1 चूहा गर्दन के शरीर रचना विज्ञान दर्शाया गया है:
1a सही sternocleidomastoid की मांसपेशी के transection पहले situs).
1b) सही sternocleidomastoid की मांसपेशी के transection बाद situs.
4. गिरफ्तार तैयारी
हाथ से एक प्लास्टिक की ट्यूब (Portex, भीतरी व्यास 0.75 मिमी, बाहरी व्यास 0.94 मिमी, Smiths चिकित्सा, ब्रिटेन) से 3 मिमी की लंबाई में कफ काटें. ये कफ प्लास्टिक ट्यूब की पूरी मात्रा सहित एक ट्यूबलर कफ, शरीर और एक कफ कफ मात्रा के आधे के मिलकर संभाल से मिलकर बनता है. दोनों कफ शरीर और कफ संभाल समान रूप से लंदन होना चाहिएजी. कफ संभाल शल्य प्रक्रिया के दौरान कफ से छेड़छाड़ करने के लिए आवश्यक है. बाद कफ पोत पर फिसल गया है, एक मिनी बुलडॉग क्लैंप के साथ कफ संभाल और पोत पर रखा गया है, क्रम में खून बह रहा से रोकने के लिए, स्थिति में कफ रखने और स्थिरता सुनिश्चित करने के लिए.
5. गिरफ्तार तकनीक
- पोत से अधिक कफ पर्ची.
- तुरंत बाद, पोत एवर्ट, यह कफ शरीर के बाहर पर खींच और यह एक 7-0 रेशम संयुक्ताक्षर के साथ ठीक. इस तरीके में, कफ के लुमेन endothelium के साथ कवर किया जाता है. इसके बाद, कफ शरीर पर शिरापरक अनुचित लाभ कमाने की चेष्टा करना पर्ची और यह एक नई 7-0 रेशम संयुक्ताक्षर के साथ ठीक. Thrombus गठन को रोकने के लिए, यह नस भ्रष्टाचार बहुत कफ मार्जिन करीब टाई जकड़ना के क्रम में जगह में धमनी धारण टाई से संपर्क से खून से बचने के लिए आवश्यक है. यह रक्त प्रवाह की दिशा के कारण बाहर का सम्मिलन के लिए महत्वपूर्ण है. हालांकि, लेखकों के अनुसार, यह नहीं माना जाता हैएक ही कारण के लिए समीपस्थ सम्मिलन के लिए आवश्यक है.
6. शल्य चिकित्सा की प्रक्रिया
सही बाहरी गले नस के 6.1 तैयारी
- एक अनुमानित 2.5 सेमी लंबे प्रत्यक्ष manubrium sterni के ऊपर औसत गर्भाशय ग्रीवा चीरा बनाओ.
- पूरी तरह से सही बाहरी गले नस के आसपास के ऊतकों से 1 सेमी लंबे खंड अलग
- 7-0 रेशम sutures के साथ शिरापरक सहायक नदियों कटी घमनी को बांधना.
सही आम मन्या धमनी के 6.2 तैयारी
- मांसपेशी sternocleidomastoid तैयार है और यह बीच में आड़ा काट.
- सही आम मन्या धमनी सावधानी से तैयार है, धमनी या Vagus तंत्रिका सेक नहीं यकीन कर रही है. ट्रंक brachiocephalic करने के लिए नीचे मन्या द्विशाखन से यह जुटाने.
- बाद में, यह दो बार 7-0 transection पहले रेशम sutures के साथ बीच में कटी घमनी को बांधना.
- एक नायलॉन कफ consisti स्लिपएक शरीर के एनजी और आम मन्या धमनी, जिससे यह सुनिश्चित करना महत्वपूर्ण है कि कफ संभाल पोत (चित्रा 2b) के पीछे है की बाहर अंत पर एक हैंडल (2a चित्रा).
- कफ (चित्रा 2c) स्थिरता सुनिश्चित करने के हैंडल पर वास्तव में एक मिनी बुलडॉग क्लैंप के साथ बाहर का आम मन्या धमनी के cuffed अंत क्लैंप करें.
- बाद में, धमनी सीधे कटौती संयुक्ताक्षर, जिससे परिणामस्वरूप धमनी स्टंप के रूप में कफ शरीर के रूप में लंबे समय के रूप में होना चाहिए के पीछे.
- हेपरिन नमकीन घोल (20 / आइयू हेपरिन मिलीलीटर 0.9% NaCl) के साथ धमनी लुमेन कुल्ला. बाद में उपयोग के लिए उचित स्थिति में एक ligation पाश अलग सेट.
- धमनी स्टंप ऊपर खींचो और कफ के शरीर पर एक आस्तीन की तरह पर्ची.
- बाद में, ligation पाश और यह कसकर गाँठ खींच.
- अपनी आस्तीन से बाहर होता जा रहा है से धमनी को रोकने के लिए, आप एक चाल को लागू हो सकता है: दोनों धमनी और दाहिने हाथ के साथ सीवन दीवार समझimultaneously और बाएँ हाथ संदंश के साथ (चित्रा 2d) गाँठ (चित्रा 2e).
- समीपस्थ धमनी स्टंप (चित्रा 2 एफ) के लिए एक ही प्रक्रिया को दोहराएँ.
6.3 शिरापरक अनुचित लाभ कमाने की चेष्टा करना पोजीशनिंग
- आबकारी एक 1 सेमी लंबे खंड बाहरी गले नस clamped
- चूंकि दो cuffed धमनियों एक दूसरे से बहुत दूर अलावा शिरापरक दखल के लिए कर रहे हैं, इस प्रक्रिया के लिए लगभग सही दूरी 3-0 Vicryl सीवन है जिसके उपयोग से आप प्रत्येक मिनी बुलडॉग क्लैंप आसपास पाश चाहिए.
- दोनों sutures criss-पार.
- बाद में, विपरीत दिशाओं में sutures खींच, cuffed धमनी स्टंप की उचित स्थिति (चित्रा 2 जी) को सक्षम
- हेपरिन खारा समाधान के साथ नस खंड कुल्ला.
- Cuffed बाहर का मन्या धमनी पर पहले उलट नस खंड के एक छोर पर्ची और यह सही स्थिति में सुरक्षितएक रेशम संयुक्ताक्षर 7-0 के साथ tion.
- यह महत्वपूर्ण है यहाँ ध्यान दें कि नस की परिधि पूरी तरह से समझा और समान रूप से होना चाहिए.
- कुल्ला हेपरिन खारा समाधान के साथ नस खंड, और समीपस्थ मन्या स्टंप पर नस खंड के दूसरे छोर पर्ची.
- Ligation (चित्रा 2) पूरा;
- मिनी बुलडॉग clamps एक अन्य, बाहर का मन्या धमनी स्टंप पर पहले और फिर बाद समीपस्थ एक पर निकालें, जिससे unobstructed रक्त प्रवाह और शिरापरक अनुचित लाभ कमाने की चेष्टा करना (चित्रा 2i) धमनीचक्र संयोजन की अनुमति. सर्जरी सफल माना जाता है अगर रक्त प्रवाह और धड़कन भ्रष्टाचार और आम मन्या धमनी (नेत्रहीन) मूल्यांकन के भीतर मनाया जाता है.
6.4. घाव बंद
चमड़े के नीचे चल रहा है सिवनी के लिए, 4-0 Vicryl का उपयोग करें. एक cutaneous चल सीवन, 3-0 Vicryl का उपयोग करें.
7. रिकवरी और पश्चात प्रबंधन </ P>
- चलो जानवरों एक अवरक्त वार्मिंग चिराग के तहत एक फ्लैट कागज बिस्तर पर संज्ञाहरण से उबरने. पशु जोत क्षेत्र वापस मत संचालित जानवर जब तक सभी जानवरों सामान्य दिखाई देते हैं.
- Postoperatively 0.03-0.05 मिलीग्राम / किग्रा bw 2 दिनों के लिए हर 8-12 घंटा सुप्रीम कोर्ट की एकाग्रता में Buprenorphine (Temgesic) प्रशासन. Buprenorphine isofluorane प्रेरण से पहले सिर्फ प्रशासित किया जा सकता है.
- उनकी सामान्य हालत और बीमारी या संक्रमण के लक्षण के लिए जानवरों postoperatively मॉनिटर.
8. रक्त प्रवाह मापन
भ्रष्टाचार के पश्चात प्रत्यक्षता रक्त प्रवाह माप के द्वारा सिद्ध किया गया था एक शोध Transonic रक्त प्रवाह माप प्रणाली (मॉडल: TS420, Transonic सिस्टम यूरोप बी.वी., Maastricht, नीदरलैंड्स) का उपयोग करके, एक perivascular flowprobe (3 मिमी, MA3PSB) के साथ. प्रणाली डॉपलर सिद्धांत पर आधारित है.
9. प्रतिनिधि परिणाम
एफ द्वाराaithfully निर्देश aforementioned रखने, शल्यक्रिया का मतलब अवधि 65 मिनट के बारे में था. जानवरों प्रस्तुत एक उत्कृष्ट शारीरिक हालत और वजन प्राप्त के रूप में पूरे प्रयोग के दौरान उम्मीद: आपरेशन के प्रारंभिक बिंदु पर जानवरों 312 तौला ± 20.39 जी. 3 सप्ताह के बलिदान के समय बिंदु पर बाद operatively जानवरों 6 सप्ताह में 325.2 ± 28.7 जी, तौला 333 ± 39.9 ग्राम और 12 सप्ताह में 362.22 ± 29 जी.
कोई संक्रमण आपरेशन साइट और कोई विकसित घावों में मनाया गया. आपरेशन घाव अपेक्षित समय में पूरी तरह से चंगा किया. स्नायविक नियंत्रण मस्तिष्क infarction या motoric कमी के कोई संकेत नहीं दिखाया. बाद में एक महत्वपूर्ण बिंदु था, क्योंकि जानवरों मन्या धमनी में संचालित किया गया और एक दो बाहरी कंठ का नसों के हटा दिया है और ऑटो प्रत्यारोपण के रूप में इस्तेमाल किया गया था. पश्चात दर्द उन्मूलन उपचार के लिए कोई एलर्जी प्रतिक्रियाओं मनाया गया.
> सभी जानवरों सतर्क किया गया और पूरे प्रयोग के दौरान सामाजिक. उनके भोजन और पानी प्राप्त करने से संबंधित आदतों के पूरे समय के दौरान अपरिवर्तित रहे.
बलिदान के समय बिंदु पर सभी प्रयोगों के जीवित रहने की दर 100% थी. भ्रष्टाचार प्रत्यक्षता दर पहले 10 जानवरों के लिए संचालित 60% और तदनुसार शेष 11 जानवरों के लिए 82% थी. कुल अनुचित लाभ कमाने की चेष्टा करना प्रत्यक्षता 71% थी. grafts में arterialized शिरापरक रक्त के प्रवाह को बलिदान के समय बिंदु पर मापा गया था और 8 था ± 3 / तीन बलिदान समय बिंदुओं के बीच किसी भी सांख्यिकीय महत्वपूर्ण अंतर के बिना मिली मिनट.
चित्रा 1 चूहा गर्दन के एनाटॉमी. 1a सही sternocleidomastoid की मांसपेशी के transection पहले situs). 1b) सही sternocleidomastoid की मांसपेशी के transection बाद situs.
, ख) कफ आम मन्या धमनी के बाहर अंत पर फिसल गया, ग) cuffed डिस्टल आम मन्या धमनी स्टंप के clamping, घ) बहिर्वतन) कफ शरीर और कफ को संभालने से मिलकर कफ: चित्रा 2 Intraoperative सूक्ष्म चित्रों कफ से अधिक आम मन्या धमनी स्टंप, ई) के साथ एक संयुक्ताक्षर everted आम मन्या धमनी स्टंप हासिल च) दोनों cuffed बाहर का और प्रॉक्सिमल आम मन्या धमनी स्टंप के बहिर्वतन के बाद situs, छ) दो cuffed criss-पार सन्निकटन के लिए तकनीक आम मन्या धमनी स्टंप, ज) शिरापरक क्षेपक बाद situs, शिरापरक क्षेपक भ्रष्टाचार के reperfusion के बाद मैं situs).
चित्रा 3 situs की योजनाबद्ध चित्रण.शिरापरक क्षेपक भ्रष्टाचार के reperfusion के बाद बड़ा आंकड़ा देखने के लिए यहां क्लिक करें .
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Discussion
आम मन्या धमनी में एक बाहरी गले नस भ्रष्टाचार Interposing एक परिष्कृत microsurgery तकनीक है. इस वीडियो में मदद करता है नौसिखिया सर्जन प्रायोगिक पशुओं के एक कम कचरे के साथ कम से कम समय में इस तकनीक गुरु.
Inhalative संज्ञाहरण इस आपरेशन के लिए सबसे अच्छा विकल्प है, के बाद से यह एक अधिक गहरी संज्ञाहरण मंच से बचा जाता है, अच्छी तरह से नियंत्रित किया जा सकता है और सर्जन पर्याप्त समय संचालित करने के लिए अनुमति देता है. इसके अलावा चूहे एक प्रयोगात्मक पशु है कि ऐसे जटिल शल्य चिकित्सा तकनीक बहुत आसान माउस की तुलना में अभ्यास के लिए एक उपयुक्त आकार प्रदान करता है.
कफ तकनीक का उपयोग करने का लाभ यह है है कि विभिन्न luminal diameters के साथ जहाजों anastomosed किया जा सकता है. यह cuffed और everted वाहिकाओं के पूरा परिधि कटी घमनी को बांधना reperfusion के बाद खून बह रहा से बचने के लिए महत्वपूर्ण है. यह मॉडल बहुत उच्च रक्त वेग और कम कतरनी तनाव की hemodynamics अनुकरण और अध्ययन करने के लिए उपयुक्त हैneointimal hyperplasia के विकास को प्रभावित करने वाले तंत्र है जो. कफ पोत शाखामिलन संबंधी remodeling रोकता है और अनुचित लाभ कमाने की चेष्टा करना भीतर अशांति और जिससे neointimal hyperplasia के विकास लाती है.
थ्रोम्बी के गठन को रोकने के लिए, यह जरूरी है टाई 1 जगह में धमनी जोत (चित्रा 3) के साथ रक्त के सहयोग को रोकने के लिए एक उपयुक्त स्थिति में नस भ्रष्टाचार 2 टाई जगह 9 नस भ्रष्टाचार की सिफारिश की रास्ते में बांधने thrombotic सीमा. 12-13% और भी कम अनुपात में पोत का रोड़ा घटनाओं 15 के रूप में यह ऑपरेशन के वीडियो में देखा जा सकता है, यह आसान है कि प्रस्तावित स्थिति में टाई बिल्कुल जगह नहीं है. लेखकों के बाहर का सम्मिलन के लिए महत्वपूर्ण है, विशेष रूप से, क्योंकि रक्त प्रवाह की दिशा पर विचार करें. इसके विपरीत, यह बिल्कुल एक ही कारण के लिए प्रॉक्सिमल सम्मिलन के लिए महत्वपूर्ण नहीं माना जाता है.
Caval v प्रक्रिया का उपयोग कर के विपरीतएक भ्रष्टाचार है, यह बाहरी गले नस का उपयोग कर के रूप में भ्रष्टाचार आधे से प्रायोगिक पशुओं के लिए आवश्यक संख्या को कम कर देता है स्वप्रतिरोपण के रूप Ein. अंततः, आम मन्या धमनी में एक बाहरी गले नस भ्रष्टाचार interposing एक परिष्कृत microsurgery तकनीक है. इस वीडियो में मदद करता है नौसिखिया सर्जन प्रायोगिक पशुओं के एक कम कचरे के साथ कम से कम समय में इस तकनीक गुरु. इस मॉडल नौसिखिए सर्जनों के लिए कफ तकनीक है कि वर्तमान में छोटे जानवरों में ठोस अंग प्रत्यारोपण में प्रयोग किया जाता है अभ्यास के लिए एक बहुत अच्छा साधन है.
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Disclosures
ब्याज की कोई संघर्ष की घोषणा की.
Acknowledgments
इस अध्ययन अनुसंधान RWTH आकिन विश्वविद्यालय, जर्मनी (: 690753 स्टार्ट "Arterialisation venöser Gefäße मरो" शीर्षक) की चिकित्सा संकाय के संवर्धन कार्यक्रम "स्टार्ट" द्वारा वित्त पोषित किया गया था. हम उसे उत्कृष्ट संपादन सहायता के लिए श्रीमती मैरी Joan Blümich धन्यवाद देना चाहूंगा.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Braided Silk black 7-0 | Ethicon Products | 892100 | |
| Vicryl 3-0 | Ethicon Products | J285G | |
| Vicryl 4-0 | Ethicon Products | J284G | |
| Portex non sterile nylon tubing 0.75 mm, 0.94 mm Fine-Bore Polyethylene (Polythene) Tubing | Portex UK | 800/200/175/100 | |
| Isofluorane 5 % | Any genericon | ||
| Heparin | Any genericon | ||
| 0.9% saline | Any genericon | ||
| Buprenorphine | Any genericon |
References
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