Modulering av hippocampally-beroende rumsliga arbetsminne genom direkt intrahippocampal mikroinjektion tillsammans och följdes av<em> In vivo</em> Mikrodialys för metaboliter i medvetna, beter djur.
Glukosmetabolismen är en användbar markör för lokal neural aktivitet, som utgör grunden för metoder såsom 2-deoxiglukos och funktionell magnetisk resonanstomografi. Men användning av sådana metoder i djurmodeller kräver narkos och därmed både förändrar hjärnans tillstånd och förhindrar beteendemässiga åtgärder. En alternativ metod är användningen av in vivo-mikrodialys att ta kontinuerlig mätning av hjärnans extracellulära vätska koncentrationer av glukos, laktat, och relaterade metaboliter i Vakna, ohämmad djur. Denna teknik är speciellt användbar när den kombineras med uppgifter som syftar till att förlita sig på specifika delar av hjärnan och / eller akut farmakologisk manipulation, exempelvis hippocampus mätningar under en rumslig arbetsminne uppgift (spontan växling) visar ett dopp i extracellulär glukos och ökad laktat som är tyder på ökad glykolys 1,2 och intrahippocampal insulin administration både förbättrar minnet och ökar hippocampus glykolysis 3. Ämnen såsom insulin kan avges till hippocampus via samma mikrodialyssond används för att mäta metaboliter. Användningen av spontana växling som ett mått på hippocampus funktion är utformad för att undvika förväxla från stressiga motivationsfaktorer (t.ex. fotchock), fasthållning, eller belöningar (t.ex. livsmedel), som alla kan ändra både uppgift prestanda och metabolism, denna uppgift ger också en mått på motorisk aktivitet som medger kontroll för ospecifika effekter av behandling. Tillsammans dessa metoder medger direkt mätning av neurokemiska och metaboliska variabler reglerar beteende.
Alla lösningar som används i mikrodialys bör filtreras omedelbart före användning, med användning av en 0,2 | im filter. Efter insättning av sonden i styrningen kanylen, observera att bekräfta att flödet obehindrad och provsamling sker. Om flödet avbryts efter införandet, är den troligaste orsaken skador på sonden membranet som orsakas av otillräcklig vård på insättning, och en ny sond måste ersättas.
Som nämnts ovan är en viktig fördel med dessa metoder bristen på fö…
The authors have nothing to disclose.
Detta arbete stöddes av NIH / NIDDK (DK077106 till ECM).
The majority of reagents are standard laboratory grade and can be obtained from a supplier of choice. Similarly, equipment such as syringe pumps and tubing can be used from any of several manufacturers. Specific items used here for which details are important include: |
|||
CMA 12 microdialysis probes | CMA/ Microdialysis | CMA-12-XXX | These are available in various membrane lengths and cutoffs, indicated by specific codes in the ‘XXX.’ |
Human insulin (Humulin) | Eli Lilly | N/a | |
Liquid swivel | Instech | 375/D/22QM | This specific swivel has very low torque and internal volume, as well as a nonreactive quartz lining. |