التشكيل المكاني من الذاكرة التي تعتمد على العمل hippocampally بواسطة حقن مكروي intrahippocampal المباشرة، يرافقه ويليه<em> في الجسم الحي</em> microdialysis لالأيضات في الحيوانات، واعية يتصرف.
ايض الجلوكوز هو علامة مفيدة للنشاط العصبي المحلية، التي تشكل أساس طرق مثل 2-deoxyglucose والتصوير بالرنين المغناطيسي الوظيفي. ومع ذلك، واستخدام مثل هذه الأساليب في النماذج الحيوانية يتطلب التخدير وبالتالي يغير كل دولة الدماغ ويمنع تدابير سلوكية. طريقة بديلة هو استخدام الجسم الحي في microdialysis لاتخاذ القياس المستمر لتركيزات الدماغ السائل خارج الخلية من نواتج الأيض الجلوكوز، اللاكتات، وذات الصلة في الحيوانات، مستيقظا غير المقيد. هذه التقنية مفيدة بشكل خاص عندما يقترن المهام مصممة للاعتماد على مناطق محددة في الدماغ و / أو التلاعب الدوائية الحادة، على سبيل المثال، وقياسات الحصين خلال مهمة الذاكرة العاملة المكانية (تداول عفوية) تظهر انخفاضا في نسبة الجلوكوز خارج الخلية وارتفاع اللاكتات التي هي توحي 1،2 تحلل المعززة، وintrahippocampal الإدارة الانسولين يحسن الذاكرة على حد سواء، ويزيد جليكول قرن آمونysis 3. يمكن أن يتم تسليم المواد مثل الانسولين عن طريق الحصين إلى التحقيق microdialysis نفسها التي استخدمت لقياس نواتج الأيض. تم تصميم استخدام التناوب التلقائي كإجراء وظيفة قرن آمون لتجنب أي تفنيد من المحفزات المجهدة (مثل footshock)، وضبط النفس، أو المكافآت (مثل المواد الغذائية)، والتي يمكن أن تغير كل من الأداء والتمثيل الغذائي المهمة؛ هذه المهمة كما يوفر قياس النشاط الحركي الذي يسمح لمراقبة آثار غير محددة من العلاج. مجتمعة، هذه الأساليب تسمح القياس المباشر للمتغيرات الكيميائية العصبية والأيضية التي تنظم السلوك.
يجب أن تتم تصفيته جميع الحلول المستخدمة في microdialysis فورا قبل الاستخدام، وذلك باستخدام ميكرومتر 0.2 التصفية. بعد الإدراج من التحقيق في قنية دليل، ومراقبة للتأكد من تدفق دون عوائق وجمع العينات والتي تحدث. إذا توقف تدفق بعد الإدراج، والسبب الأكثر ترجيحا هو الأضرار التي لح…
The authors have nothing to disclose.
وأيد هذا العمل من قبل المعاهد الوطنية للصحة / NIDDK (DK077106 إلى ECM).
The majority of reagents are standard laboratory grade and can be obtained from a supplier of choice. Similarly, equipment such as syringe pumps and tubing can be used from any of several manufacturers. Specific items used here for which details are important include: |
|||
CMA 12 microdialysis probes | CMA/ Microdialysis | CMA-12-XXX | These are available in various membrane lengths and cutoffs, indicated by specific codes in the ‘XXX.’ |
Human insulin (Humulin) | Eli Lilly | N/a | |
Liquid swivel | Instech | 375/D/22QM | This specific swivel has very low torque and internal volume, as well as a nonreactive quartz lining. |