Summary

Измерение Тактильная аллодиния в мышиной модели бактериальный простатит

Published: January 16, 2013
doi:

Summary

Инфицирование предстательной железы может быть фактором в посредничестве тазовой боли при хроническом простатите. Мы описываем порядок подготовки стандартизированных бактериальной посевной, инстилляции бактерий в мочеиспускательный канал самцов мышей и методологии для измерения тактильной аллодинии у мышей с течением времени.

Abstract

Uropathogenic кишечной палочки (УПЭК) являются патогенные микроорганизмы, которые играют важную роль в инфекции мочевыводящих путей и бактериальный простатит 1. Недавно мы показали, что УПЭК играют важную роль в инициировании хронической тазовой боли 2, особенностью хронического простатита / синдрома хронической тазовой боли (CP / CPPS) 3,4. Инфекция простаты клинически значимых УПЭК могут инициировать и установить хронических болей с помощью механизмов, которые могут включать повреждения тканей и начала механизмы аутоиммунных 5.

Задача для понимания патогенеза УПЭК в предстательной железе является относительной недоступности предстательной железы манипуляции. Мы использовали ранее описанный метод внутримочеиспускательные инфекции от 6 до доставки клинического штамма УПЭК в самцах мышей таким образом устанавливая восходящей инфекции предстательной железы. Здесь мы описываем наши протоколы для стандартизации баcterial посевной 7, а также процедура катетеризации наркозом мышей-самцов для закапывания бактерий.

CP / CPPS в первую очередь характеризуется наличием тактильной аллодинии 4. Поведение тестирование на основе концепции кожной гипералгезии в результате упомянутых висцерального 8-10 боли. Раздражительным фокус в висцеральных тканях снижает болевой порог кожной позволяет преувеличенной реакции на нормально не болезненные раздражители (аллодиния). Применение нормальной силы на кожу приводит к ненормальной реакции, которые имеют тенденцию к увеличению с интенсивностью основного висцеральной боли. Мы описываем методологию в NOD / ShiLtJ мышей, которые используют Фрея волокон количественно тактильной аллодинии с течением времени в ответ на одну инфекцию УПЭК бактерий.

Protocol

1. Бактерии Подготовка к мышь Прививка Следующее должно быть сделано в асептических условиях. Возьмите один 17 х 100 мм трубы из полипропилена с крышками и добавить 3 мл свежего бульона Лурия (LB) средства массовой информации. Использование автоклавного советы, принять…

Representative Results

Мы рассмотрели NOD / ShiLtj и C57BL/6J самцов мышей на наличие хронической боли при бактериальной инфекции. Самцы мышей (5 до 7 недель) были заложены с физиологическим раствором или бактерий в мочеиспускательный канал (рис. 1). Механическое раздражение тазовой области с фон нитей Frey за…

Discussion

Инфекция простаты мыши с УПЭК позволяет в естественных условиях моделирования событий, которые могут быть задействованы в патогенезе бактериального простатита, CP / CPPS или предрасполагающие события в хроническое воспаление. Методов, описанных для бактериального препарата и зака?…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Это исследование было поддержано грантом 1K01DK079019A2 (PT) от NIH / NIDDK.

Materials

Name of the reagent Company Catalogue number
Culture tubes BD Falcon 352059
LB Broth Miller EMD EM1.10285.0500
Nalgene Centrifuge Tubes Thermo 3118-0050
Isoflurane Butler Schein NDC 11695-6776-1
Catheter needle 30G Hamilton 91030
PE10 tubing BD intramedic 427400
Von Frey Filaments Stoelting 58025-31

References

  1. Yamamoto, S. Molecular epidemiology of uropathogenic Escherichia coli. Journal of infection and chemotherapy official journal of the Japan Society of Chemotherapy. 13, 68-73 (2007).
  2. Rudick, C. N., et al. Uropathogenic Escherichia coli induces chronic pelvic pain. Infect. Immun. 79, 628-635 (2011).
  3. Pontari, M. A., Ruggieri, M. R. Mechanisms in prostatitis/chronic pelvic pain syndrome. The Journal of urology. 172, 839-845 (2004).
  4. Schaeffer, A. J. Clinical practice. Chronic prostatitis and the chronic pelvic pain syndrome. The New England journal of medicine. 355, 1690-1698 (2006).
  5. Rudick, C. N., Schaeffer, A. J., Thumbikat, P. Experimental autoimmune prostatitis induces chronic pelvic pain. American journal of physiology. Regulatory, integrative and comparative physiology. 294, R1268-R1275 (2008).
  6. Elkahwaji, J. E., Ott, C. J., Janda, L. M., Hopkins, W. J. Mouse model for acute bacterial prostatitis in genetically distinct inbred strains. Urology. 66, 883-887 (2005).
  7. Hultgren, S. J., Porter, T. N., Schaeffer, A. J., Duncan, J. L. Role of type 1 pili and effects of phase variation on lower urinary tract infections produced by Escherichia coli. Infect. Immun. 50, 370-377 (1985).
  8. Jarrell, J., Giamberardino, M. A., Robert, M., Nasr-Esfahani, M. Bedside testing for chronic pelvic pain: discriminating visceral from somatic pain. Pain research and treatment. 2011, 692102 (2011).
  9. Jarrell, J. Demonstration of Cutaneous Allodynia in Association with Chronic Pelvic Pain. J. Vis. Exp. (28), e1232 (2009).
  10. Giamberardino, M. A., et al. Viscero-visceral hyperalgesia: characterization in different clinical models. Pain. 151, 307-322 (2010).
  11. Laird, J. M., Martinez-Caro, L., Garcia-Nicas, E., Cervero, F. A new model of visceral pain and referred hyperalgesia in the mouse. Pain. 92, 335-342 (2001).
  12. Laird, J. M., Souslova, V., Wood, J. N., Cervero, F. Deficits in visceral pain and referred hyperalgesia in Nav1.8 (SNS/PN3)-null mice. J. Neurosci. 22, 8352-8356 (2002).
  13. Chaplan, S. R., Bach, F. W., Pogrel, J. W., Chung, J. M., Yaksh, T. L. Quantitative assessment of tactile allodynia in the rat paw. Journal of neuroscience. 53, 55-63 (1994).
  14. Schaeffer, A. J., Schwan, W. R., Hultgren, S. J., Duncan, J. L. Relationship of type 1 pilus expression in Escherichia coli to ascending urinary tract infections in mice. Infect. Immun. 55, 373-380 (1987).
  15. Boehm, B. J., Colopy, S. A., Jerde, T. J., Loftus, C. J., Bushman, W. Acute bacterial inflammation of the mouse prostate. The Prostate. 72, 307-317 (2012).
  16. Rivero, V. E., Cailleau, C., Depiante-Depaoli, M., Riera, C. M., Carnaud, C. Non-obese diabetic (NOD) mice are genetically susceptible to experimental autoimmune prostatitis (EAP). Journal of autoimmunity. 11, 603-610 (1998).
  17. Pakarainen, T., Zhang, F. P., Makela, S., Poutanen, M., Huhtaniemi, I. Testosterone replacement therapy induces spermatogenesis and partially restores fertility in luteinizing hormone receptor knockout mice. Endocrinology. 146, 596-606 (2005).
  18. Taguchi, O., Kojima, A., Nishizuka, Y. Experimental autoimmune prostatitis after neonatal thymectomy in the mouse. Clinical and experimental immunology. 60, 123-129 (1985).

Play Video

Cite This Article
Quick, M. L., Done, J. D., Thumbikat, P. Measurement of Tactile Allodynia in a Murine Model of Bacterial Prostatitis. J. Vis. Exp. (71), e50158, doi:10.3791/50158 (2013).

View Video