비 침습 M-모드 초음파 심장 검진 법에 의한 마우스의 심장 박동의 자궁 측정
Summary
매우 높은 주파수의 초음파는 작은 동물의 심장 이상을 검사 할 수있는 강력한 라이브 이미징 도구입니다. 그 noninvasiveness는 태아의 생리 학적 상태를 유지 할 수 있습니다. 여기서, 우리는 자궁에서 E18.5에서 태아의 심장 박동수를 측정하는 M-모드 초음파의 사용을 보여줍니다.
Abstract
선천성 심장 질환 (CHD)의 출생에서 사망의 가장 흔한 감염성 원인이다. CHD의 발생 빈도는 4 ~ 50 / 1, 000의 출생 (질병 및 상해 지역 추정, 세계 보건기구, 2004)까지입니다. 종종 삶의 질을 손상 수술은 관상 동맥 질환의 원인을 발견의 중요성을 우리에게 상기시켜, 심장 결함을 해결하는 데 필요한. 돌연변이 마우스 모델과 라이브 영상 기술이 질병의 원인을 연구하는 중요한 도구가되었다. 고급 방법은 태아의 비정상적인 마음의 라이브 영상을 할 수 있지만, 후자의 생리 학적 및 혈역학 적 상태는 종종 인해 수술 및 / 또는 긴 절차에 손상됩니다. 비 침습 초음파 영상은, 그러나, 수술함으로써 그들의 생리 기능을 유지, 배아를 노출하지 않고 사용할 수있다. 여기서, 우리는 자궁에서 E18.5에서 태아의 심장 박동을 평가하기 위해 간단한 M-모드 초음파를 사용합니다. 비정상적인 심장 박동의 검출은 참으로 좋은 인디입니다따라서 심장의 기능 장애의 산 및 심장 마비로 이어질 수 있습니다 발달 결함의 식별의 첫 번째 단계를 구성한다.
Introduction
CHD는 출생 1에서 사망의 가장 흔한 감염성 원인이다. 여러 수술은 종종 삶의 질 1을 손상 남아있을 수 있습니다 주제의 구조적 결함을 해결하기 위해 필요합니다. CHD를 가진 아이들은 자주 개발 2,3에 자궁의 결과에 중요한 나타내는, 그들은 수술을하지 않은 경우에도 신경 장애를 개발한다. 이러한 임신 중 바이러스 나 화학 물질 (알코올)에 노출, 원인 CHD로 모두 유전과 환경 요인. 유전 적 기여를 공부하는 것은 초기 단계에서 아직이지만, 빠르게 성장. 이 참여자를 식별하고 간단하고 강력한 도구와 돌연변이 생쥐를 표현형, 심장 개발에 자신의 역할을 이해하는 것은 매우 도움이 될 것입니다.
마우스는 실제로 CHD을 연구하는 선택의 동물 모델이며, 인간의 대부분의 경우는 마우스 4,5에서 재현 할 수 있습니다. 결과적으로, 태아의 심장 마우스 표현형은 INC되고있다reasingly 중요한 인간의 관상 동맥 질환의 원인을 조사하고 적절한 도구가 필요합니다. 고정 표본에 대한 조직 학적 연구는 매우 중요한 있지만, 살아있는 동물의 실시간 영상은 심장의 생리를 이해하는 것이 중요합니다. 비디오 현미경 라이브 영상을 제공합니다. 그러나, 따라서 자신의 생리 학적 및 혈역학 적 상태를 손상, 배아를 노출하는 개복 수술이 필요합니다. 최근 심 초음파 검사는 병원에서뿐만 아니라 생쥐의 심장 평가를위한 표준 영상 기술이되고있다.
마우스 태아 심장 초음파 검사는 표준 임상 초음파 시스템뿐 아니라 초고 주파수 초음파 시스템을 이용하여 수행된다. 후자는 30 MHz 또는 이차원 화상을 생성하고, 초기 배아 단계의 평가를 허용 고주파 트랜스 듀서를 제공한다. 이 트랜스 듀서는, 그러나, 적절한 영상 평면을 획득하고 근본적인 심장 PA를 결정하기에 충분하다 상대적으로 가난한 침투 깊이 (~ 13mm)을 가지고심장 박동, 심장 확장 및 수축기 및 격벽 및 벽 두께에 좌우 심실 내경, 개복술을 수행하지 않고 같은 rameters.
우리의 연구는 배아 일 E18.5에서 마우스 태아의 심장 박동수를 평가하기 위해 매우 높은 주파수의 초음파 시스템을 사용했습니다. 우리는 12.7 mm의 초점 거리를 가진 태아의 크기, 주어진 이상적인 20mm × 20 mm의 필드보기를 제공하는 30 MHz의 변환기를 선택했다. 그러나, 높은 주파수 변환기는 초기 발달 단계를 분석하기 위해 선택 될 수있다. 선택한 M-모드는 1000 프레임 / 초 높은 시간 해상도에 모션 덕분에 조직의 시각화를 할 수 있습니다. 전체 절차는 간단하고 태아의 생리 학적 및 혈역학 적 상태의 교란을 방지하기 위해 가능한 한 빨리 수행되어야한다. 약 8 배아의 분석은 약 1 시간이 필요합니다.
Protocol
Representative Results
Discussion
M-모드 초음파 심장 검진 법은 마우스 배아의 자궁 내 심장 요금에 측정 할 수있는 효과적이고 간단한 방법입니다. 시판 트랜스 듀서는 작은 고동 치는 마음을 시각화하기에 충분한 해상도를 제공합니다. 따라서, 그런 펄스 측정과 같은 다른 방법에 비해, 매우 정확한 심박수 측정을 허용하고, 고해상도 비디오 현미경을 대체 할 수있다. 그러나, 현재의 도구는 배아의 각을 시각화하는 지루?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
우리는 그림 1과 2의 사진 촬영을 위해 심 초음파 앤 Chamberland에서 훈련 마농 Laprise 감사합니다. 이 작품은 건강 연구 보조금 MOP 44,363의 캐나다 연구소와 캐나다 의자 950-216684에 의해 지원되었다.
Materials
| Isoflurane | Pharmaceutical Partners of Canada Inc. | CP0406v2 | 1-chloro-2,2,2-trifluoroethyl difluoromethyl ether |
| Ultrasound gel | Parker Laboratories Inc. | Aquasonic Clear | |
| Electrode gel | Parker Laboratories Inc. | Spectra 360 | |
| Ophthalmic gel | Novartis | Tear-Gel | |
| Depilatory cream | Church & Dwight Co., Inc. | Nair | |
| Hair clipper | |||
| Gauze/cotton swap | Q-tips | ||
| Permanent marker | |||
| High-Resolution In vivo Ultrasound Imaging System | Visual Sonics | Vevo770 | |
| 30 MHz Transducer | Visual Sonics | RMV707B | |
| Imaging platform and physiology controller unit | Visual Sonics | ||
| Anesthetic System | Cyprane North America Inc. | 312462 | |
| Infrared heating lamp |
References
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