Abstract
Eine große Herausforderung in der Neurophysiologie war es, die Reaktionseigenschaften und Funktion der zahlreichen hemmenden Zelltypen in der Großhirnrinde zu charakterisieren. Wir teilen hier unsere Strategie für den Erhalt von stabilen, gut isolierten Single-Unit-Aufnahmen von identifizierten hemmenden Inter im narkotisierten Maus Kortex mit Hilfe eines von Lima und Kollegen 1 entwickelten Methode. Die Aufnahmen werden in Mäusen, Channelrhodopsin-2 (ChR2) in bestimmten neuronalen Subpopulationen durchgeführt. Mitglieder der Population werden durch ihre Reaktion auf einen kurzen Blitz aus blauem Licht identifiziert. Diese Technik - genannt "PINP" oder Photostimulation gestützte Identifizierung von neuronalen Populationen - Verwendbar mit Standard extrazellulären Kontrollgerät durchgeführt werden. Es kann als kostengünstige und leicht zugängliche Alternative zu Calcium Imaging oder visuell geführte Patch dienen, zum Zwecke der Ausrichtung der extrazellulären Aufnahmen genetisch identifizierten Zellen. Hehe wir bieten eine Reihe von Leitlinien für die Optimierung der Verfahren in der täglichen Praxis. Wir verfeinert unsere Strategie speziell für Targeting Parvalbumin-positive (PV +) Zellen, haben aber festgestellt, dass es für andere Intern Typen sowie wie Somatostatin-exprimierenden (SOM +) und Calretinin-exprimierenden (CR +) Inter.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| ChR2-EYFP Line | Jackson Colonies | 12569 | |
| Pvalb-iCre (PV) Line | Jackson Colonies | 8069 | |
| Sst-iCre (SOM) Line | Jackson Colonies | 13044 | |
| Cr-iCre (CR) Line | Jackson Colonies | 10774 | |
| Agarose | Sigma-Aldrich | A9793 | Type III-A, High EEO |
| Micro Point (dural hook) | FST | 10066-15 | |
| Surgical Scissors | FST | 14084-09 | |
| Scalpel | FST | 10003-12 (handle), 10011-00 (blades) | |
| Puralube Ophthalmic Ointment | Foster & Smith | 9N-76855 | |
| Homeothermic Blanket | Harvard Apparatus | 507220F | |
| Tungsten Microelectrodes | A-M Systems | 577200 | 12 MΩ AC resistance, 127 μm diameter, 12° tapered tip, epoxy-coated |
| Capillary Glass Tubing | Warner Instruments | G150TF-3 | |
| Heat Shrink Tubing | DigiKey | A332B-4-ND | |
| Zapit Accelerator | DVA | SKU ZA/ZAA | Use with standard Super Glue. |
| Microelectrode AC Amplifier 1800 | AM Systems | 700000 | |
| MP-285 Motorized Micromanipulator | Sutter | MP-285 | |
| 4-channel Digital Oscilloscopes | Tektronix | TDS2000C | |
| Powered Speakers | Harman | Model JBL Duet | |
| Manual Manipulator | Scientifica | LBM-7 | |
| 800 µm Fiber Optic Patch Cable | ThorLabs | FC/PC BFL37-800 | |
| Power Meter | ThorLabs | PM100D (Power Meter), S121C (Standard Power Sensor) | |
| 475 nm Cree XLamp XP-E | DigiKey | XPEBLU-L1-R250-00Y01DKR-ND | LED power and efficiency are continually increasing, so we recommend checking for the latest products (www.cree.com). |
| Arduino UNO | DigiKey | 1050-1024-ND |
References
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