A Radyo-telemetrik Sistemi Omurilik transeksiyonu ve Embriyonik Nöral Hücre Greftler Kök Sıçanlarda Kardiyovasküler Fonksiyonu Monitör
Summary
Biz lezyon yerinde içine aşılama sekiz hafta embriyonik beyin nöral kök hücre T4 omurilik kesilen sıçanlarda kardiyovasküler parametreleri kaydetmek için bir radyo-telemetrik sisteminin kullanılması için bir protokol mevcut. Telemetri doğru bilinçli serbestçe hareket spinal kord yaralı sıçanlarda kardiyovasküler fonksiyonu değerlendirmek için gelişmiş bir tekniktir.
Abstract
Yüksek torasik veya servikal spinal kord yaralanması (SKY) kardiyovasküler fonksiyon bozukluğuna yol açabilir. Kardiyovasküler parametreleri izlemek için, biz ya da yeşil floresan proteinini ifade embriyonik beyin sapı kaynaklı nöral kök hücrelerin aşılama olmadan T4 omurilik kesiye uygulanan sıçanların femoral artere bir radyo vericisi bağlı bir kateter yerleştirildi. Böyle kanül yerleştirilmesi veya kuyruk-manşet gibi diğer yöntemlerle karşılaştırıldığında, telemetri sürekli serbestçe hareket hayvanlarda kan basıncını ve kalp hızını izlemek için avantajlıdır. Ayrıca, uzun süreli, birden fazla veri satın alma yeteneğine sahiptir. Spinal kord yaralı sıçanlarda, kolorektal distansiyona yanıt dizginlenmemiş durumuna ve otonom disrefleksi'ye altında bazal kardiyovasküler verileri başarıyla kaydedildi. Bir verici, bir omurilik transeksiyonu önce yerleştirilmiş, buna ek olarak, önceki ve omurilik yaralanması sonrasında Kalp damarı parametreler, aynı farede karşılaştırılabilir. Anlatılan telemet bir sınırlamary prosedür femoral artere implantasyonu ipsilateral hindlimb için kan akımını etkileyebilir olmasıdır.
Introduction
Kardiyovasküler disfonksiyon yüksek seviyelerde spinal kord yaralanması (SKY) sonra oluşur. Bu düzensiz kan basıncı ve kalp hızı istirahat, ortostatik hipotansiyon, egzersiz kaynaklı hipotansiyon ve yaralanma seviyesinin 1,2 altında duyusal uyaranlara yanıt olarak hipertansiyon ve barorefleks bradikardi atakları ile karakterize otonom disrefleksi'ye tecelli. Bu belirtiler spinal kord yaralı hastaların günlük yaşam müdahale. Böylece, SCI ve deneysel tedaviler hayvanlarda kardiyovasküler değişikliklerin araştırılması için etkili araçlar oluşturulması önem taşımaktadır.
Hayvanlarda kardiyovasküler fonksiyonu araştırmak için, çeşitli teknikler, kan basıncını ve kalp hızını izlemek için kullanılmıştır. Noninvaziv kuyruk manşetleri periferik kan basıncını 3 ölçmek için istihdam edilebilir, oysa Orta kardiyovasküler parametreler, kanül yerleştirilmesi ve telemetri ile kaydedilebilir. Diğer yöntemler, tele karşılaştırıldığındametri serbestçe hareket eden hayvanlar ve kardiyovasküler fonksiyon 4 uzun süreli izlemede sürekli olarak kaydedilmesini sağlayan temel bir avantaja sahiptir. Omurilik yaralanması, hayvan modellerinde, deneysel uyarıldıktan sonra periferal kan basıncı değişiklikleri tespit edilmesi için yeterince büyük olmayabilir. Bu duruma göre, müsait kalp izleme tekniği omurilik yaralanması olan hayvanlar için seçilmelidir.
Bu çalışmada, bir radyo-telemetrik sistem tam omurilik transeksiyondan sonra erişkin sıçanlarda kardiyovasküler fonksiyonu izlemek için tanıtıldı. Sıçanlar lezyon yerinde sinjeneiktir sıçan embriyonik gün 14 (E14) beyin sapı kaynaklı nöral kök hücreler (BS-NSC'lerde) greft aldı. Yaralanma ve hiçbir nakli ve naif, yaralanmamış sıçanlara sıçanlar kontrol olarak görev yaptı. Telemetri prosedürü verici sterilizasyon ve implantasyonu (Şekil 1), bazal kardiyovasküler parametre kayıt, distansiyon kaynaklı yanıtları, ve verici temizlik içerir vedepolama.
Protocol
Representative Results
Discussion
Geleneksel olarak, bir sıvı doldurulmuş kanül artere yerleştirilmiş ve her bir hayvan 11 bir uç anlık gibi kalp-damar parametrelerini kaydetmek için bir basınç transdüktörüne bağlanır. Sürekli uzun süre kardiyovasküler performansını izlemek için, radyo-telemetrik sistemler birçok laboratuvarda istihdam edilmektedir. Bu daha rafine araç serbestçe hayvanlar hareket, bilinçli kan basıncını kaydedebilirsiniz. Sıvı dolu kateterler ile karşılaştırıldığında, telemetri doğru SC…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
The work was supported by grants from NIH/NINDS (NS054883), Craig H. Neilsen Foundation (280072), and the Veterans Administration and Canadian Spinal Research Organization. We thank the Rat Resource and Research Center, University of Missouri, Columbia, Missouri, for providing GFP rats.
Materials
| Table of Specific Materials/Equipment: | |||
| Reagents | Company | Catalogue | Comment |
| Fibrinogen (rat) | Sigma | F6755-25MG | 2 hr at 37oC to dissovle |
| Thrombin (rat) | Sigma | T5772-100UN | Dissovle in 10 mM CaCl2 |
| 1% Terg-A-Zyme | Sigma | Z273287 | Enzymatic solution for telemeter cleaning |
| Fluorogold | Fluorochrome | Dissovle in distilled water and avoid light | |
| Telemeter (PA-C40) | Data Sciences International | ||
| Telementric recording and analysis system | Data Sciences International | Signal stimulator, Data Exchange Matrix, receivers, Ambient pressure reference monitor | |
| Balloon-tipped catheter | Edward Lifesciences | 111F7-P | For colorectal distension |
References
- Krassioukov, A. V., Furlan, J. C., Fehlings, M. G. Autonomic dysreflexia in acute spinal cord injury: an under-recognized clinical entity. J Neurotrauma. 20, 707-716 (2003).
- Lindan, R., Joiner, E., Freehafer, A. A., Hazel, C. Incidence and clinical features of autonomic dysreflexia in patients with spinal cord injury. Paraplegia. 18, 285-292 (1980).
- Inskip, J. A., Ramer, L. M., Ramer, M. S., Krassioukov, A. V. Autonomic assessment of animals with spinal cord injury: tools, techniques and translation. Spinal Cord. 47, 2-35 (2009).
- Mayorov, D. N., Adams, M. A., Krassioukov, A. V. Telemetric blood pressure monitoring in conscious rats before and after compression injury of spinal cord. J Neurotrauma. 18, 727-736 (2001).
- Hou, S., Tom, V. J., Graham, L., Lu, P., Blesch, A. Partial restoration of cardiovascular function by embryonic neural stem cell grafts after complete spinal cord transection. J Neurosci. 33, 17138-17149 (2013).
- Lu, P., et al. Long-distance growth and connectivity of neural stem cells after severe spinal cord injury. Cell. 150, 1264-1273 (2012).
- Akhavan, M., Hoang, T. X., Havton, L. A. Improved detection of fluorogold-labeled neurons in long-term studies. J Neurosci Methods. 152, 156-162 (2006).
- Maiorov, D. N., Fehlings, M. G., Krassioukov, A. V. Relationship between severity of spinal cord injury and abnormalities in neurogenic cardiovascular control in conscious rats. J Neurotrauma. 15, 365-374 (1998).
- Laird, A. S., Carrive, P., Waite, P. M. Cardiovascular and temperature changes in spinal cord injured rats at rest and during autonomic dysreflexia. J Physiol. 577, 539-548 (2006).
- Phillips, A. A., Krassioukov, A. V., Ainslie, P. N., Warburton, D. E. Baroreflex function after spinal cord injury. J Neurotrauma. 29, 2431-2445 (2012).
- Osborn, J. W., Taylor, R. F., Schramm, L. P. Determinants of arterial pressure after chronic spinal transection in rats. Am J Physiol. 256, 666-673 (1989).
- Rabchevsky, A. G., et al. Effects of gabapentin on muscle spasticity and both induced as well as spontaneous autonomic dysreflexia after complete spinal cord injury. Front Physiol. 3, 329 (2012).
- Hou, S., Lu, P., Blesch, A. Characterization of supraspinal vasomotor pathways and autonomic dysreflexia after spinal cord injury in F344 rats. Auton Neurosci. 176, 54-63 (2013).
