Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Medicine

Prostat Kanseri Hasta Üretimi Tümör Hücreleri Sirkülasyon gelen Xenograftlarında Modeller Türetilmiş

doi: 10.3791/53182 Published: October 20, 2015

ERRATUM NOTICE

Introduction

or Start trial to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

Hasta kaynaklı ksenogratflardır kanser araştırmaları için kullanılan giderek daha popüler deneysel modellerdir. Onlar biyomarkerların ve biyolojik yollar, klinik öncesi ilaç etkinliğinin değerlendirilmesi ve kişiselleştirilmiş kanser tedavilerinin 1,2 avatars oluşturulması karakterizasyonu için kullanılabilir. Daha önce, diğer araştırma grupları implante veya immün sistemi baskılanmış farelerin 1 içine tek tümör hücre süspansiyonları veya tüm tümör eksplantlar enjekte edilerek ya PDX modeller geliştirdik. Bu PDX Modeller taze katı tümörün cerrahi koleksiyonu, malign asiti veya masraflı hem de ve iatrojenik morbidite riski hastayı gösterir bir cerrahi prosedür geçiren bir hastanın plevral sıvı gerektirir.

Kanser araştırmalarında çok belirgin bir gelişme dolaşan tümör hücrelerinin tespit, izolasyon ve karakterizasyonudur. Bu tümör hücreleri primer tümör kitlesi kaçmak ve dolaşıma gireronlar metastaz ve nüks önemli bir rol oynar nerede, kanserin en sık nedeni mortalite 3 ile ilgili. Birkaç solid tümör türlerinden kapalı zaman eğrilerinin değerlendirilmesi ve karakterizasyonu tanısı, prognozu ve rezidüel hastalık 3 izlemek için klinik bilgiler sağlamıştır. Ya da fiziksel özellikleri, biyo-ifadesi veya kapalı zaman eğrilerinin fonksiyonel özelliklerine dayanan şu anda kullanılan çeşitli yaklaşımlar verimli kapalı zaman eğrilerinin 4 izole etmek için kullanılabilir. Mevcut macroscale CTC izolasyon yöntemleri yüzey moleküllerine karşı yoğunluk gradyan santrifüj filtre gözenekleri fiziksel filtrasyon ve ayırma bulunmaktadır. En yaygın olarak kullanılan CTC izolasyon yöntemleri kapalı zaman eğrilerinin antikor bazlı yakalama dayanmaktadır. Her iki hücre yüzeyi markerlerinin pozitif ve negatif seçim periferal kandan izole edilmesi için kapalı zaman eğrilerinin kullanılabilir. Periferik dolaşımdaki kapalı zaman eğrilerinin için pozitif seçim yaygın epitel belirteçleri (örneğin, EpCAM) kullandığı birkapalı zaman eğrilerinin ancak hematopoietik olmayan hücreler üzerinde eksprese edilen yeniden. Bu yöntemin dezavantajı, metastatik potansiyele sahip kapalı zaman eğrilerinin genellikle epitelyal to-mezenkimal 3 epitel yüzey belirteçleri aşağı doğru düzenleyen bir geçiş (EMT) geçirmiş olması. Metastatik potansiyele sahip CTCS izole etmek amacıyla, hematopoietik bir yüzey işaretleyici CD45 kullanan bir negatif seçim yöntemi, lökositlerin normal hücre popülasyonu 5 kullanılabilir tüketmek için.

Prostat kanseri, en sık görülen kanserdir ve erkeklerde 6 kansere bağlı ölümlerin önemli bir nedenidir. Tümör ilerlemesi ve saldırganlık mekanizmaları tam olarak anlaşılamamıştır ve bu nedenle üretim ve prostat kanserinin moleküler heterojenite özetlemek deneysel modellerin karakterizasyonu önemli ilgi konusudur. Prostat kanserinin PDX model olmuştur immunocom, insan prostat kanseri hücrelerinin nakli yoluyla daha önce oluşturulansöz fareler 7,8. Ancak bu tür modellerin üretimi öncelikle hastalığın tembel doğası atfedilen immün sistemi baskılanmış farelere prostat kanserinin düşük engraftmant oranı, engel olmuştur. Son zamanlarda, kapalı zaman eğrilerinin meme kanseri 9, akciğer kanseri ve prostat kanseri 10 11 PDX modelini oluşturmak için kullanıldı. Bunlar proof-of-concept çalışmalar cerrahi numune toplama ihtiyacı PDX modelleri bağımsız üretme olasılığını tanıttı. Bu yazıda ayrıntılı olarak yeni bir deneysel model üretimi için bir yöntem açıklanmaktadır.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

or Start trial to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

Bu protokol kurumsal araştırma etik kurulu onayı ile kurumumuza yürütülen ve insan refahı için tüm kurumsal, ulusal ve uluslararası kurallar ile uyumlu değil.

Gelişmiş Prostat Kanseri Hastalarında gelen Periferik Kan 1. Koleksiyonu

Not: metastatik prostat kanserli hasta seçin. Yazılı hasta rızasını ve izolasyon yaşı ve önceki kemoterapi ve hormonal tedaviler de dahil olmak üzere hastaların klinik özelliklerini, kaydedin. Metastatik hastalığı olan hastalar potansiyel periferik kanda kapalı zaman eğrilerinin en yüksek konsantrasyonuna sahip olacaktır.

  1. Aydınlatılmış onam sonra uygun bir Kurumsal İnceleme Kurulu protokolü onayladı altında kan örnekleri toplamak. Lateks eldiven ve prosedür boyunca laboratuvar önlüğü giyin.
  2. Iğne tutucu 25 G kelebek iğne ve tüp bağlayın. Alanını temizlemek için alkol bez kullanınpazı ve önkol arasında antekübital ven, daha sonra hastanın üst koluna turnike uygulanır.
  3. Antekübital ven içine kelebek iğne takın ve toplama başlatmak için iğne tutucu içine kan toplama tüpü itin. Pıhtılaşmasını önlemek için etilendiamintetraasetik asit (EDTA) içeren toplama tüplerinde kan yaklaşık 10 ml toplayın.
  4. Hastadan kelebek iğne çıkarın ve 1 dakika boyunca damar delinme sitesi üzerinden steril gazlı bezle basınç uygulayın. Steril bandaj ile Kapak sitesi.

Mononükleer Hücreleri 2. İzolasyon

Not: 1 aşamasından gelen toplanan kan mononükleer kapalı zaman eğrilerinin ilave olarak çevresel kan mononükleer hücreleri (PBMC) (örneğin, lenfositler ve monositler) ihtiva edecektir.

  1. : 1 oranında Pipet bütün 5 ml serolojik pipetle 50 ml polistiren konik tüp içine, kan ve 1 Hanks Dengeli Tuz Solüsyonu (HBSS) ekleyin. Yavaşça pipet karışımı homojenize etmek.
  2. Boş 50 ml polistiren konik tüp düşük hızlı yoğunluk gradyan santrifüjü ile kan bileşiklerinin ayrılması için bir ticari olarak hazırlanmış solüsyonu (Ficoll-Paque) 15 ml ilave edilir.
  3. Yavaşça farklı üst tabaka oluşturmak üzere, aşama 2,2 polistiren tüp içine, Aşama 2.1, tam kan ve HBSS karışımı pipetle. Çözümlerin karıştırma en aza indirmek için en düşük ayara ayarlayın pipet, bu verimli ayrılmasını sağlayacaktır.
  4. Oda sıcaklığında 30 dakika boyunca 400 x g'de (25 ° C) santrifüje tabi tutulur. En düşük ayara yavaşlama ayrıldıktan sonra çözümlerin karıştırma önlemek için. Hızlanma herhangi hıza ayarlanmış olabilir.
  5. Santrifüj işleminden sonra tüpün alt kısmında üst ve ayırma çözüm üzerinde plazma arasındaki PBMC'Ier ve KTC sandviç tabakasının ince beyaz-gri şerit tespit.
  6. Plastik transfer pipet kullanarak 50 ml polistiren tüp içine adım 2.5 beyaz-gri şerit hücreleri toplayın.
  7. PBMC'leri ve kapalı zaman eğrilerinin ve c 50 ml polistiren konik tüp HBSS ekle10 dk RT yıkamak için 400 xg'de tekrar entrifuge.
  8. Yıkamak için oda sıcaklığında 3 dakika boyunca 400 x g hızında tekrar santrifüj HBSS ve 50 ml sıvı ve tekrar süspansiyon pelet boşaltacaktır.
  9. Süpernatant atılır, kırmızı kan hücre lisis tamponu, 5 ml kalan pelet tekrar süspansiyon ve oda sıcaklığında 5 dakika boyunca çözelti inkübe edin.
  10. Oda sıcaklığında 3 dakika boyunca 400 x g'de santrifüj ile kırmızı kan hücre parçalama tamponu çıkarın.
  11. Süpernatant atılır ve önceden antikor boyama engellemek için,% 10 fetal sığır serumu (FBS) ile desteklenmiş 1 ml PBS 1X pelletini.

Kontrol THP için CD45-FITC antikoru 3. boyanması Tek Çekirdekli Hücreleri (FACS)

  1. Hemasitometre veya otomatik hücre sayacı kullanılarak (adım 2.11 itibaren) canlı (tripan mavi-negatif) hücrelerin sayısını ölçmek. (% 10 FBS ile PBS 1x), 1 x 10 6 hücre / ml'lik bir süspansiyon hazırlayın ve 1 saat boyunca buz üzerine yerleştirin.
  2. Sayısal Dağıtiki tüp içine, önceki aşamada elde edilen hücre süspansiyonu. Kontrol ve CD45 boyanma olarak Etiket tüpleri.
  3. 250: kontrol tüpüne 1, bir seyreltme IgG1κ-FITC (2,5 ug / ml) ekleyin. CD45 boyama tüpü, 1 bir seyreltme CD45 FITC (2,5 ug / ml) konjüge birincil antikor ekleyin: 250 ve 30 dakika boyunca buz üzerinde inkübe hücre süspansiyonları. CD45 antijeni markalama hematopoietik hücreleri için de kullanılır.
  4. 4 ° C'de 3 dakika boyunca 400 x g'de santrifüj hücreleri ve süpernatant atılır.
  5. Steril 1 x PBS ile her pelet süspanse edilmesi suretiyle, hücreler iki kez yıkanır, 4 ° C'de 3 dakika boyunca 400 x g'de santrifüj ile ve ardından,% 10 FBS ile takviye edilmiştir.
  6. 10 ug / ml'lik bir konsantrasyonda 4 ', 6-diamidino-2-fenilindol (DAPI) içeren PBS 1x 1 ml çözelti içinde tekrar süspansiyon hücreleri.
  7. 12 mm x 75 mm polistiren tüpler içine 35 mikron süzgeç kapaklar sayesinde nihai çözüm Filtre.

Prostat kapalı zaman eğrilerinin 4. İzolasyon tarafındanFACS

Not: Canlı CD45 negatif CTCS toplamak için bir akış sitometresinin yararlanın.

  1. Etiketli tüpten hücreleri kullanılarak Set tazminat kontrolleri "Denetim".
  2. Enkaz ve uygun ileriye dağılım ve yan dağılım parametreleri kullanılarak hücrelerin kümelenmeleri hariç kapıları oluşturun.
  3. Etiketli tüp, hücre süspansiyonları kullanılarak FITC kapıları kurulması "CD45-FITC."
  4. Pasifik mavi-A kanalı kullanılarak Kapısı canlı (DAPI-negatif) hücreleri.
  5. % 10 FBS ile takviye edilmiş Roswell Park Memorial Institute (RPMI) 1640 2 ml ihtiva eden steril bir 15 ml polistiren konik tüp içine CD45 negatif popülasyonu toplayın.
  6. % 10 FBS ile takviye edilmiş RPMI 500 ul - santrifüj 3 dakika boyunca 400 x g'de kriteri prostat tümörü hücre süspansiyonu daha sonra 200 pelet tekrar süspansiyon.

Xenograftlarında Büyüme Fareler ve İzleme içine kapalı zaman eğrilerinin 5. Enjeksiyon

Not:Kurumsal hayvan bakım komitesi tarafından onaylanmış protokoller uyarınca tüm hayvan prosedürleri yürütün. Bu protokol tüm ilgili düzenleyici ve kurumsal kurumlar, yönetmelik ve yönergelere uygun olarak ve uygun bizim Hayvan Bakım Komitesi tarafından onaylanan belirli Hayvan Kullanımı Protokolü kapsamındaki bizim kurumda yapılmıştır.

  1. Buz üzerinde 1 oranında ve yeri: 1 hücre dışı matriks ile sıralanmış prostat tümör hücre süspansiyonu karıştırın.
  2. Oksijen / dak, 1 L% 5 (h / h) inhale izofluran sağlayan bir oda içinde deri altından implante edilmesinden önce fare anestezisi. Fare kornea ve ayak refleks kaybı için kontrol ederek uygun anestezi sağlamak.
  3. Bir 25 G iğne ve 1 ml şırınga kullanarak, 8-10 haftalık erkek bağışıklık yetersizliği olan fare hem üst yanları içine prostat tümörü hücre ve hücre-dışı matris hücre süspansiyonu deri altından 250 ul enjekte edilir. Enjeksiyon hacmi i olarak 250 ul bakılmaksızın CTC konsantrasyonu enjektemportant değer. Farede maksimum SQ uygulanması en fazla 1 ml'dir.  
  4. Subkutan nodüler yoğunlukları büyümesi için fare enjeksiyon siteleri haftalık palpasyonu yaparak ve haftada iki kez fareler ağırlık ölçerek fareler izleyin.
  5. Tümör büyüklüğü, moleküler analiz ve seri pasaj için yeterli tümör dokusu sağlamak için en fazla 0.5 cm ve en büyük çapı en az 1 cm servikal dislokasyon ile hasat deri altı hümen prostat kanseri ksenograftları ardından karbon dioksit ile boğarak fareler öldürülür. Hiçbir tümör rağmen sıkıntı ya da% 15 kilo kaybı belirtileri ile fareler Euthanize hissediliyor.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

or Start trial to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

Bu protokol izole CD45 negatif prostat kanseri kapalı zaman eğrilerinin gelen PDX modellerinin oluşmasına yol açacaktır. Protokolde kullanılan negatif seçim yöntemine dayanarak DAPI leke kullanılarak ölü hücreleri hariç gereklidir. Akış sitometrisi ile tespit CD45 negatif hücrelerin yüzdesi değişkendir ve hasta (Şekil 1A) tümör yükünün bağlıdır. Beyaz oklar (Şekil 1B) ile belirtildiği gibi (hücre çekirdekleri belirlemek için) CD45 ve DAPI kullanılarak sıralanmamış hücrelerin immünofloresan boyama, CD45 negatif hücrelerin ortaya koymaktadır. Şekil 1C, deri altından nodüler yoğunlukları fare iki yan tarafları üzerinde görülebilir. Her nodüler yoğunluk ksenogref büyümesini temsil ve fare dorsal kas çıkıntı ve doku sıkı olduğu gibi sağlıklı dokudan farklı olarak takdir edilebilir. Implantasyon ve ksenogreft gelişimi arasındaki zaman aralığı Patie CTC yükü bağlı olarak büyük ölçüde değişebilirnt örnek nakledilen hücrelerin sayısı ve kapalı zaman eğrilerinin biyolojik agresiflik. Kapalı zaman eğrilerinin elde edilen prostat PDX hematoksilin ve eozin boyama tarafından görüldüğü gibi, insan prostat tümörü özetlemek ve androjen reseptörü (AR) ve prostata özel zar antijeni (PSMA) (Şekil 1D) ve prostata spesifik hücresel belirteçler, immünohistokimyasal olarak.

figür 1
İnsan Prostat Kanseri kapalı zaman eğrilerinin gelen Prostat Kanseri PDX Modelleri 1. Üretimi Şekil. (A) Prostat kanseri olan bir hastanın periferal kanından belirli CD45 lekeli hücre popülasyonlarının gösteren arsa akım sitometrisi. . Pozitif DAPI leke hücreler ölü ve sadece canlı hücreler izole olmasını sağlamak için yolluk tarafından dışlanan olan ayıklanmamış nüfusun (B) CD45 immünofloresan boyama CD45 varlığını doğrular -. Hücreleri (beyaz oklar) (C) in vivo ve tümör hasattan sonra temsili PDX tümör gösterir geleneksel hematoksilen ve eozin ve spesifik prostat işaretlerini kullanarak CTC PDX modellerinin (D) analizi.; androjen reseptörü (AR) ve prostat spesifik membran antijen (PSMA). Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

or Start trial to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

Bu yazıda kapalı zaman eğrilerinin prostat kanseri PDX modellerin üretimi için bir yöntem tarif eder. PDX üretimi için kapalı zaman eğrilerinin kullanılması Mevcut yöntemlerle karşılaştırıldığında modelleri birçok potansiyel önemli avantajlara sahiptir. İlk olarak, periferal kan, kapalı zaman eğrilerinin erişilebilir toplanması, farklı hastalık safhalarında aynı hastadan alınan deney modellerinde üretilmesini sağlar. İkinci olarak, kan toplama tümör hücrelerinin toplanması için cerrahi işlem gerektirir, mevcut yöntemlere kıyasla, tümör hücreleri izole etmek için daha güvenli ve pahalı olmayan bir yöntemi temsil eder.

CTC zenginleştirme Çoklu yöntemleri birçok nedeni finansman ve kaynak sınırlamaları her laboratuvara erişilebilir değil ancak tarif edilmiştir. Biz FACS, birçok laboratuvarlar için uygun, ekonomik ve erişilebilir metodolojinin kullanımı yararlanmak olabilir Laboratuvarımızda bir test geliştirmek için çalıştı. Bu metodolojinin bir potansiyel sınırlamadıryüksek tümör yükü olan hastalarda bu protokol kullanımını sınırlamak ender hücrelerin saptanması için yetersiz duyarlılık. Epitel hücrelerinin fiziksel ya da biyolojik özelliklere kullanan çeşitli ek teknolojiler üzerinden bu sınırlama hafifletmek ve bu nadir bir hücre popülasyonu 4 tespiti ve izolasyonu arttırmak için kullanılabilir. Bu protokol açıklanan CTC zenginleştirme yöntemi negatif seçim kullanır; CD45 + lökosit atılır ve CD45 vardır - KTC korunur. Elemanları, hücre süspansiyonları flow sitometri göre sıralama yapılırken (örneğin, cansız hücreler.) - Bu CD45 kirletici potansiyel kaldırmak için önemlidir. Özellikle, kırmızı kan hücre parçalama tamponu kullanımı ve DAPI lekelemesi yoluyla cansız hücreler ihmal kritik faktörlerdir. Bu tedbirlerin olmayan CTC elemanları CD45 kontamine olmadığını garanti olmasa da - nüfus, bizim önceki çalışmalar göstermektedir ki istenilen hücre population yeterince bu yöntemlerle 11 ile zenginleştirilmiştir. Bu CTC nüfusun saflığı prostat kanseri hücreleri 3 özgü yüzey belirteçleri hücre antikorları kullanılarak, pozitif seçim yoluyla geliştirilebilir mümkündür. Buna ek olarak, numunede bulunan epitel hücreleri CTC heterojenliği ve sayı EpCAM ya da diğer uygun boyalar kullanılarak test edilebilir. Genel veriminin azalmasına Ancak periferal kan örneğinin ek işlem sonunda saflık arttırabilir.

Bu protokolde kolay implantasyon ve gelişmekte olan tümör izlenmesi için izin verir izole kapalı zaman eğrilerinin deri altı enjeksiyonu uygulandı. Ancak, derialtı modeller tümör uyumunu ve tümör hücre alt kaybı tehlikeye atabilir yetersiz beslenme kaynağı var. Böyle succ geliştiren bir prostat mikro teşvik fare prostat (ortotrop), ve subrenal kapsül enjeksiyonu gibi alternatif enjeksiyon siteleriessful melezleme ve tümör heterojenitesini korur, araştırmacı tercihine 1,2 dayanarak yapılabilir. En uygun olarak, NOD / SCID / IL2λ reseptör boş (NTG) fare modelleri, ancak bağışıklık yetersizliği olan farelerde (Çıplak NOD / SCID ya da SCID / Bej) 'in diğer türler aynı zamanda, başarılı bir şekilde kullanılmıştır, ksenograft engraftment 12 oranını artırmak için kullanılmalıdır solid tümör oluşumunda PDX modeller 1 türevi. Oluşturulan PDX modelleri seri geçişli olabilir ve orijinal tümör özellikleri istikrar tesis genetik yöntemler 9-11,13 kullanılarak izlenir.

Canlı prostat kanseri kapalı zaman eğrilerinin yüksek sayıda kurtarma hastalık evresine bağlıdır. Kapalı zaman eğrilerinin yüksek metastatik yükü olan hastaların kanından izole zaman PDX modellerin başarıyla üretimi iyi sağlanır. Başarıyla 100 ila 10,000 kapalı zaman eğrilerinin bir dizi kan numuneleri elde PDX modelini oluşturduğu. Bizim tecrübelerimize göre, iyi eğitimli işgücü için gerekli olanatory personel kan örneklerinden prostat kapalı zaman eğrilerinin başarılı izolasyonunu sağlamak amacıyla sık sık protokol yapmak. Biz laboratuvar personeli başlangıçta tümör hücre hatları hücreler ile çivili, normal sağlıklı bireylerin kan örnekleri kullanarak bu protokolde eğitim öneririz. Yokluğu veya primer prostat kanserinde kapalı zaman eğrilerinin düşük sayıda metastatik prostat kanserine bu metodoloji kullanımını kısıtlayabilir.

CTC üretme yöntemi, daha sonra molekül prostat kanserinin karakterizasyonu, ilaç tarama, izleme tedavisi yanıt biyomarker geliştirme ve kişiye özel kanser tedavileri Diğer gelişmeler dahil olmak üzere, pek çok araştırma uygulamalarında, bu protokolde tarif PDX modelini elde.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Roswell Park Memorial Institute (RPMI) 1640 Gibco Life Technologies 11875-093
Fetal Bovine Serum (FBS) Gibco Life Technologies 10437-028
Penicillin Streptomycin Gibco Life Technologies 15140-122
Phosphate Buffered Saline (PBS) Corning Cell Gro 21-031-CM
35 µm Cell Strainer BD Falcon 352340
50 ml polystyrene conical tube Crystalgen 23-2263
Red blood cell lysing buffer Sigma R7757
DAPI Invitrogen d3571
Ficoll-Paque Plus GE Healthcare 17-1440
12 mm x 75 mm Polystyrene tubes with cell strainer cap BD Falcon 352235
BD Vacutainer Lavender Blood Collection Tubes with EDTA
BD Winged Blood Collection Set with Push Button Retract Needle 23 gauge
BD Vacutainer One Use Needle Holder
Disposable Latex Tourniquet
Latex or non-latex gloves
alcohol swabs
2 x 2 cotton gauze pads
Adhesive bandage
25 G needle
1 ml syringe

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Hidalgo, M., et al. Patient-derived xenograft models: an emerging platform for translational cancer research. Cancer discovery. 4, 998-1013 (2014).
  2. Siolas, D., Hannon, G. J. Patient-derived tumor xenografts: transforming clinical samples into mouse models. Cancer research. 73, 5315-5319 (2013).
  3. Joosse, S. A., Gorges, T. M., Pantel, K. Biology, detection, and clinical implications of circulating tumor cells. EMBO molecular medicine. 1, 1-11 (2014).
  4. Yu, M., Stott, S., Toner, M., Maheswaran, S., Haber, D. A. Circulating tumor cells: approaches to isolation and characterization. The Journal of cell biology. 192, 373-382 (2011).
  5. Liu, Z., et al. Negative enrichment by immunomagnetic nanobeads for unbiased characterization of circulating tumor cells from peripheral blood of cancer patients. Journal of translational medicine. 9, 1-9 (2011).
  6. Siegel, R., Naishadham, D., Jemal, A. Cancer statistics , 2013. CA: a cancer journal for clinicians. 63, 11-30 (2013).
  7. Domingo-Domenech, J., et al. Suppression of acquired docetaxel resistance in prostate cancer through depletion of notch- and hedgehog-dependent tumor-initiating cells. Cancer cell. 22, 373-388 (2012).
  8. Klein, K. A., et al. Progression of metastatic human prostate cancer to androgen independence in immunodeficient SCID mice. Nature Medicine. 3, 402-408 (1997).
  9. Yu, M., et al. Cancer therapy. Ex vivo culture of circulating breast tumor cells for individualized testing of drug susceptibility. Science. 345, 216-220 (2014).
  10. Hodgkinson, C. L., et al. Tumorigenicity and genetic profiling of circulating tumor cells in small-cell lung cancer. Nature medicine. 20, 897-903 (2014).
  11. Vidal, S., et al. A Targetable GATA2-IGF2 Axis Confers Aggressiveness in Lethal Prostate Cancer. Cancer cell. 27, 223-239 (2015).
  12. Quintana, E., et al. Efficient tumour formation by single human melanoma cells. Nature. 456, 593-598 (2008).
  13. DeRose, Y. S., et al. Tumor grafts derived from women with breast cancer authentically reflect tumor pathology, growth, metastasis and disease outcomes. Nature. 17, 1514-1520 (2011).

Erratum

Formal Correction: Erratum: Generation of Prostate Cancer Patient Derived Xenograft Models from Circulating Tumor Cells
Posted by JoVE Editors on 12/01/2015. Citeable Link.

A correction was made to Generation of Prostate Cancer Patient Derived Xenograft Models from Circulating Tumor Cells. There was a spelling error in one of the authors' surname. The author's name was corrected from:

Veronica Rodriquez-Bravo

to:

Veronica Rodriguez-Bravo

Prostat Kanseri Hasta Üretimi Tümör Hücreleri Sirkülasyon gelen Xenograftlarında Modeller Türetilmiş
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Williams, E. S., Rodriguez-Bravo, V., Chippada-Venkata, U., De Ia Iglesia-Vicente, J., Gong, Y., Galsky, M., Oh, W., Cordon-Cardo, C., Domingo-Domenech, J. Generation of Prostate Cancer Patient Derived Xenograft Models from Circulating Tumor Cells. J. Vis. Exp. (104), e53182, doi:10.3791/53182 (2015).More

Williams, E. S., Rodriguez-Bravo, V., Chippada-Venkata, U., De Ia Iglesia-Vicente, J., Gong, Y., Galsky, M., Oh, W., Cordon-Cardo, C., Domingo-Domenech, J. Generation of Prostate Cancer Patient Derived Xenograft Models from Circulating Tumor Cells. J. Vis. Exp. (104), e53182, doi:10.3791/53182 (2015).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
simple hit counter