Introduction
हेपैटोसेलुलर कार्सिनोमा (एचसीसी) के पांचवें सबसे अधिक प्रचलित कैंसर दुनिया भर में, और कैंसर से संबंधित मृत्यु का तीसरा प्रमुख कारण है, यह एक महत्वपूर्ण स्वास्थ्य चिंता का विषय 1,2 बना रही है। रोगियों जो ट्यूमर लकीर, या उन का इंतजार कर जिगर प्रत्यारोपण, locoregional चिकित्सा transarterial embolization (TAE) या transarterial chemoembolization (TACE) को शामिल करने के लिए पात्र नहीं हैं के लिए मानक उपशामक देखभाल 3,4 के रूप में लागू कर रहे हैं। इन उपचारों, जिगर जिससे ट्यूमर यकृत धमनी रक्त प्रवाह से लगभग विशेष रूप से तंग आ चुके हैं में दोहरी रक्त की आपूर्ति की अनूठी विशेषता शोषण, जबकि आसपास के जिगर से पोर्टल शिरा 5,6 उसके रक्त की आपूर्ति के बहुमत प्राप्त करता है।
एचसीसी के लिए स्थापित चिकित्सा के अत्यंत सीमित efficacies के कारण, oncolytic वायरस होनहार वैकल्पिक चिकित्सा के रूप में उभरा है। JX-594, हाल ही में Pexa-वीइसी नाम, एक thymidine काइनेज-हटाए चेचक वेक्टर, granulocyte-M के साथ हथियारों से लैस हैacrophage कॉलोनी उत्तेजक कारक (जीएम-सीएसएफ), जो एचसीसी 7 के लिए द्वितीय चरण चिकित्सीय परीक्षण पूरा कर लिया है। अभी हाल ही में एक पुनः संयोजक vesicular stomatitis वायरस वेक्टर (VSV) मानव इंटरफेरॉन बीटा व्यक्त sorafenib-दुर्दम्य एचसीसी (NCT01628640) के लिए एक चरण मैं चिकित्सीय परीक्षण में प्रवेश किया है। oncolytic वायरस रोगियों में एचसीसी के लिए नैदानिक आवेदन के लिए अनुमोदन प्राप्त करने के करीब ले जाने के रूप में, एक प्रभावी प्रशासन के लिए आवश्यकता के मार्ग को निशाना बनाने मल्टीफोकल रोग स्पष्ट है। जबकि प्रणालीगत वितरण अक्षम ट्यूमर पारगमन के कारण काफी हद तक अप्रभावी है, intratumoral अनुप्रयोगों इंजेक्शन ट्यूमर के उपचार के प्रभावकारिता को सीमित कर सकता है, uninjectable सूक्ष्म घावों रोग प्रगति के लिए अतिसंवेदनशील जा रही है।
हम चूहों में यकृत धमनी को अलग-थलग एक locoregional ढंग से oncolytic वायरस चिकित्सा प्रशासन के लिए ओर्थोटोपिक एचसीसी को निशाना बनाने की एक विधि की स्थापना की है। हमने दिखा दिया है कि सुरक्षित और प्रभावकारिता में इस प्रशासन मार्ग परिणाममल्टीफोकल एचसीसी पिंड के पारगमन ve, प्रतिरक्षा सक्षम चूहों 8-10 में महत्वपूर्ण अस्तित्व मोहलत में जिसके परिणामस्वरूप। यहाँ, हम, पहुँचने विदारक, और चूहों में यकृत धमनी में इंजेक्शन लगाने की विधि का वर्णन है। प्रक्रिया की एक योजना चित्र 1 में दिखाया गया है (पहले प्रकाशित 9)
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Protocol
नोट: निम्न चरणों में हमारी संस्था के दिशा निर्देशों और बावरिया, जर्मनी की स्थानीय सरकार के अनुसार में प्रदर्शन किया गया है। इस प्रोटोकॉल को पुन: पेश करने के लिए सभी प्रयास के रूप में स्थानीय पशु की देखभाल और उपयोग समिति द्वारा तय, पशुओं के मानवीय उपचार के लिए स्थानीय दिशा निर्देशों के पालन में किया जाना चाहिए। उदाहरण के लिए, कई संस्थानों की आवश्यकता है कि बाँझ दस्ताने कृंतक सर्जरी के दौरान पहने जाते हैं। इसके अलावा, वायरस के साथ काम व्यक्तिगत और पर्यावरण सुरक्षा के लिए देखभाल कर रही स्थानीय नियमों के अनुसार किया जाना चाहिए। देखभाल ठीक से दूषित कचरे के निपटान के लिए और उपकरणों और कार्यक्षेत्र साफ करने के लिए (यानी, autoclaving और निर्माता के निर्देशों के अनुसार एक उपयुक्त एंटीवायरल कीटाणुनाशक के साथ सफाई) के द्वारा लिया जाना चाहिए।
1. शुरुआत सर्जरी से पहले तैयारी
- शल्य चिकित्सा उपकरणों जीवाणुरहित (यानी, autoclaving द्वारा)।
- appropr के लिए वायरस पतलादेर हो गई एकाग्रता, जो विशिष्ट वायरस इस्तेमाल किया जा रहा की विषाक्तता और चूहा तनाव की संवेदनशीलता के आधार पर अलग अलग होंगे।
नोट: उदाहरण के लिए, जब पुरुष भैंस के चूहों में vesicular stomatitis वायरस का उपयोग कर, हम आम तौर पर एक 1 मिलीलीटर मात्रा है, जो कि मॉडल में अधिकतम सहन खुराक में 10 7 pfu इंजेक्षन।- 1 मिलीलीटर सीरिंज में वायरस (सड़न रोकनेवाला तकनीक का उपयोग) prefill, और 30 जी सुइयों देते हैं, सिरिंज और सुई से हवा को खत्म करने का ख्याल रख रही है।
- सभी सामग्री और उपकरणों की आवश्यकता के साथ शल्य अंतरिक्ष तैयार है, और इथेनॉल कीटाणुरहित करने के साथ क्षेत्र स्प्रे। धुंध swabs और कपास इत्तला दे दी applicators moistening के लिए बाँझ खारा समाधान (0.9% NaCl) के साथ एक छोटे से गोदाम भरें।
2. चूहा की तैयारी
- एक एनाल्जेसिक प्रशासन (के रूप में स्थानीय पशु की देखभाल और उपयोग समिति द्वारा निर्दिष्ट), उचित खुराक 30 मिनट पर शल्य चिकित्सा की प्रक्रिया शुरू करने से पहले। उदाहरण के लिए,metamizole के एक उच्च खुराक (100-200 मिलीग्राम / किग्रा) प्रशासन।
- चूहा साँस लेना (isoflurane) या इंजेक्शन (यानी, () Medetomidine का एक मिश्रण 0.15 मिलीग्राम / किग्रा, Midazolam (2 मिलीग्राम / किग्रा), और Fentanyl (0.005 मिलीग्राम / किग्रा), भी MMF के रूप में जाना जाता है) संज्ञाहरण का उपयोग anesthetize। 1-3% से कम एक vaporizer के माध्यम से isolflurane प्रशासन और सामान्य श्वसन और हृदय की दर को बनाए रखने के लिए आवश्यक के रूप में समायोजित करें।
- आगे बढ़ने से पहले, यह सुनिश्चित करें कि चूहा पूरी तरह से बेहोश और पैर पैड बन्द रखो और एक प्रतिक्रिया के लिए देख द्वारा दर्द को महसूस करने में असमर्थ है।
- संज्ञाहरण के दौरान सूखापन को रोकने के लिए एक पशु चिकित्सा आंख मरहम लागू करें।
- सिर्फ एक छोटे पशु चिकित्सा बाल क्लिपर का उपयोग कर गुप्तांग ऊपर से नीचे उरोस्थि से पेट क्षेत्र दाढ़ी। त्वचा घायल हुए बिना एक करीबी दाढ़ी को प्राप्त करने के लिए ध्यान रखना।
- शल्य बिस्तर fore- और hindlimbs पर टेप का उपयोग करने के लिए चूहे को ठीक करें, और, यदि साँस लेना संज्ञाहरण का उपयोग कर, एक उपयुक्त आकार नाक शंकु में थूथन जगह है। एक हीटिंग पैड की जगहचूहे के नीचे शरीर के तापमान को बनाए रखने के लिए। पेट क्षेत्र एक शल्य ग्रेड कीटाणुनाशक का उपयोग कर, एक शराब कुल्ला और एक एंटीसेप्टिक रंग के आवेदन के बाद कीटाणुरहित।
3. Laparotomy
- ऐसे # 15 के रूप में, एक छोटी सी घुमावदार छुरी का प्रयोग, त्वचा की परत सीधे midline के साथ में एक छोटे से खड़ी चीरा बनाते हैं। xyphoid प्रक्रिया के लिए ऊपर चीरा बढ़ाएँ। इसके बाद, धीरे Adson संदंश की एक जोड़ी एक छुरी चीरा बनाने के साथ ऊपर उठाने के द्वारा पेशी परत काटकर अलग कर देना, और फिर शल्य कैंची के साथ xyphoid प्रक्रिया के लिए ऊपर चीरा का विस्तार। उदर गुहा के अंगों को पंचर करने के लिए या xyphoid प्रक्रिया के दोनों तरफ छोटे जहाजों को नुकसान नहीं ख्याल रखना।
- मांसपेशियों और त्वचा में फैला है और पूरे पेट क्षेत्र बेनकाब करने के लिए पेट भर में एक प्रतिकर्षक रखें।
- बाँझ शारीरिक खारा के साथ दो 7.5 x 7.5 सेमी 2 धुंध swabs गीला और शल्य चिकित्सा के शीर्ष भर में एक फैलखोलने और नीचे भर में एक है, के रूप में चित्रा 2A में दिखाया गया है।
4. यकृत धमनी के अलगाव
- दो सिक्त कपास applicator बाँझ शारीरिक खारा के साथ सिक्त swabs का प्रयोग, धीरे उदर गुहा के बाहर आंतों और अंधान्त्र उठा, और कम धुंध झाड़ू पर उन्हें जगह है। खत्म धुंध मोड़ो अंगों नम रखने के लिए और उन्हें जिस तरह की पकड़ से बाहर है।
- दो सिक्त कपास applicator के फाहे का प्रयोग, धीरे बाएं पार्श्व जिगर पालि, जो इस स्तर पर दृश्य में सबसे प्रमुख पालि हो जाएगा उठा। ऊपर की तरफ पालि फ्लिप, और, वसंत कैंची का एक छोटा सा जोड़ी, पालि के नीचे पर रेशेदार झिल्ली के माध्यम से कटौती का उपयोग कर, की अनुमति पालि पूरी तरह से ऊपर की तरफ से फ़्लिप किया और पहले से रखा धुंध झाड़ू के शीर्ष पर आराम करने के लिए। पालि के ऊपर धुंध झाड़ू मोड़ो यह जगह में पकड़ करने के लिए।
- अगले पालि (पूर्वकाल पूंछवाला) है, जो अब विचार में सबसे पूर्वकाल पालि है के साथ जारी रखें। वें के साथएक विदारक माइक्रोस्कोप और ठीक संदंश की ई सहायता, ताकि इसे जारी है और यह स्वतंत्र रूप से ऊपर की तरफ से फ़्लिप किया जा करने के लिए अनुमति देने के लिए पालि आसपास पतली झिल्ली काटना। बाएं पार्श्व पालि के साथ एक साथ धुंध झाड़ू नीचे पालि रखें।
- पीछे पूंछवाला पालि, जो अब दिखाई जाएगी निरीक्षण करें। दोहराएँ कदम 4.3 पूरी तरह से पीछे पूंछवाला लोब काटना और ऊपर की तरफ और धुंध के अंदर पहले से रखा जिगर पालियों के साथ मिलकर यह फ्लिप करने के लिए।
- बस पूंछवाला पालि की मूल स्थिति के नीचे, आम यकृत धमनी, जो अब दिखाई दे रहा है और आसानी से अपनी मजबूत धड़कन द्वारा मान्यता प्राप्त हो जाएगा पाते हैं। संरचनात्मक सही करने के लिए धमनी के बाद, मोटी झिल्लीदार सामग्री देखने से gastroduodenal और उचित यकृत धमनियों ढक निरीक्षण करते हैं। ठीक संदंश का प्रयोग, इस सामग्री को ऊपर उठा और धीरे यह आंसू, देखभाल करने के लिए इस क्षेत्र में किसी भी छोटे जहाजों से बचने के लिए। किसी भी खून बह रहा है जो हो सकता है को रोकने के लिए कपास swabs applicator का प्रयोग करें।
- एक का पता लगाएँrterial शाखाएं है, जो एक विदारक माइक्रोस्कोप की सहायता से स्पष्ट रूप से दिखाई जाएगी जब झिल्ली ठीक से विच्छेदित कर रहे हैं।
- दो ठीक, atraumatic संदंश का प्रयोग, ध्यान आम यकृत धमनी, gastroduodenal धमनी, और उचित यकृत धमनी ऐसी है कि वे आसपास के झिल्ली (चित्रा 2 बी) से मुक्त कर रहे हैं काटना।
5. इंजेक्शन के लिए धमनी की तैयारी
- Gastroduodenal धमनी के नीचे एक 7-0 Prolene सिवनी पास है, और बाहर अंत में एक स्थायी संयुक्ताक्षर टाई करने के लिए, बस विभाजन (उचित स्थान के लिए चित्रा 1 देखें) के ऊपर एक सूक्ष्म सुई धारक का उपयोग करें। सिरों पर शेष सिवनी सामग्री के लगभग 2 इंच की अनुमति दें, और उन्हें धमनी सिखाया खींचने के लिए चित्रा -2 सी के रूप में एक सुई धारक के साथ दबाना।
- आम यकृत धमनी अस्थायी रूप से रक्त का प्रवाह (चित्रा -2) को ब्लॉक करने पर एक छोटे से दबाना रखें।
नोट: यह छोटा सा भूत हैortant भारी रक्तस्राव को रोकने के लिए एक बार सुई धमनी से निकाल दिया जाता है। इसके अलावा, धमनी रक्त प्रवाह की रुकावट धीमी वायरस प्रशासन और बेहतर पारगमन दक्षता के लिए अनुमति देगा।- महत्वपूर्ण: काम जल्दी समय की राशि है कि रक्त के प्रवाह को बंद कर दिया है सीमित करने - आम यकृत धमनी clamping के 5 मिनट के भीतर इंजेक्शन और धमनी के बाद बंधाव प्रदर्शन करते हैं।
- यदि संभव हो तो, विदारक माइक्रोस्कोप पर बढ़ाई बढ़ाने के लिए, कि इस तरह के gastroduodenal धमनी तेज ध्यान में है और काफी बड़े सही 30 जी सुई डालने के लिए प्रकट होता है। इंजेक्शन सिरिंज की सुई gastroduodenal धमनी के लुमेन में रखें और सवार पर धीरे-धीरे धक्का।
नोट: सुई के उचित स्थान इंजेक्शन समाधान उचित यकृत धमनी के माध्यम से और जिगर की ओर सीधे बहने का परिणाम देगा।- पारगमन क्षमता को अधिकतम करने के लिए बहुत धीरे धीरे इंजेक्शन प्रदर्शन करना।
<li> एक बार पूरे इंजेक्शन की मात्रा प्रशासित किया गया है, धीरे-धीरे धमनी से सुई वापस लेना।
नोट: इंजेक्शन साइट से कोई खून बह रहा नहीं होना चाहिए। मामला यह है कि खून बह रहा होती है में, यह इंगित करता है कि दबाना ठीक से नहीं रखा गया है और जल्दी से समायोजित किया जाना चाहिए।
6. समापन
- gastroduodenal धमनी के नीचे एक दूसरे 7-0 Prolene सिवनी पास है, और इंजेक्शन स्थल के ऊपर एक दूसरा स्थायी संयुक्ताक्षर टाई।
- आम यकृत धमनी से दबाना निकालें। जिगर की दिशा में उचित यकृत धमनी के माध्यम से उस रक्त के प्रवाह की पुष्टि बहाल कर दिया गया।
- संयुक्ताक्षर की बिखरी कट।
- पुष्टि उदर गुहा को आंतों और जिगर लौटने से पहले कोई खून बह रहा है कि वहाँ। ध्यान रखना है कि परिशिष्ट अपने मूल ओरिएंटेशन में वापस आ रहा है ले लो।
- मांसपेशियों और एक घुमावदार सुई के साथ 4-0 vicryl सीवन सामग्री का उपयोग कर अलग परतों में त्वचा सीवन। प्लेस continuouएस टांके लगभग 1 मिमी के अलावा और कसकर खींच।
- suturing चरण के दौरान, एक एनाल्जेसिक इस तरह के (0.05 मिलीग्राम / किग्रा) buprenorphine के रूप में प्रशासन।
- संज्ञाहरण से चूहे निकालें। isoflurane इस्तेमाल किया गया है, तो चूहे कई मिनट के भीतर चेतना हासिल करना चाहिए। MMF एक इंजेक्शन संज्ञाहरण के रूप में इस्तेमाल किया गया है, तो Atipamezole (0.75 मिलीग्राम / किग्रा), Flumazenil (0.2 मिलीग्राम / किग्रा), और Naloxone (9.12 मिलीग्राम / किग्रा) के एक चमड़े के नीचे इंजेक्शन के साथ यह विरोध है, जो संज्ञाहरण के प्रभाव रिवर्स जाएगा और जानवरों के 20 मिनट के भीतर चेतना हासिल करने के लिए अनुमति देते हैं। प्रारंभिक जागरण चरण के दौरान एक अवरक्त वार्मिंग दीपक के साथ गर्म चूहों रखें।
- एक जानवर की पहुंच से बाहर छोड़ जब तक यह पर्याप्त होश आ गया है स्टर्नल लेटना बनाए रखने के लिए नहीं है।
- एक जानवर जब तक पूरी तरह से ठीक है कि अन्य जानवरों की कंपनी के लिए सर्जरी आया है वापस नहीं है।
- संकट के रोग के लक्षण के लिए चूहों पर नजर रखने के बाद operatively, और अनुवर्तीदर्दनाशक दवाओं के साथ ही स्थानीय पशु की देखभाल और उपयोग समिति द्वारा आवश्यक है। उदाहरण के लिए, buprenorphine / 0.05 मिलीग्राम से प्रशासित किया जा सकता हर 12 घंटा किलो।
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Representative Results
अनुभव के साथ, एक लगभग 100% सफलता दर (जिसका अर्थ है कि धमनी सफलतापूर्वक विच्छेदित किया गया था और इंजेक्शन, और पशु शल्य चिकित्सा बच गया) प्राप्त किया जा सकता है। हालांकि, चूहे सर्जरी (ट्यूमर बोझ की डिग्री है, अंतर्निहित जिगर समारोह, आदि) के लिए पहले के स्वास्थ्य की स्थिति को स्पष्ट रूप से शल्य चिकित्सा हस्तक्षेप के परिणाम में एक भूमिका निभानी होगी। सर्जरी के बाद, चूहों क्षणिक वजन घटाने और एक शांत, लीवर एंजाइम के क्षणिक ऊंचाई अनुभव करने के लिए, भले ही अकेले बफर, वायरस के बिना, इंजेक्ट किया गया था उम्मीद की जा सकती।
हम पहले से दिखा दिया है कि oncolytic vesicular stomatitis वायरस (VSV) या कुशल ट्यूमर पारगमन और ट्यूमर विशिष्ट वायरस प्रतिकृति, एक orthotopic, मल्टीफोकल एचसीसी मॉडल 8,9 में में न्यूकासल रोग वायरस (NDV) परिणामों की ट्रांस-यकृत धमनी प्रशासन। हालांकि दो वायरस अपने intratumoral कैनेटीक्स में मतभेदवायरस नकल की, अधिक से अधिक वायरस प्रतिकृति, वायरस के प्रसार के कई foci, के रूप में lacZ रिपोर्टर जीन के लिए सकारात्मक एंजाइमी धुंधला द्वारा सबूत के संबंधित समय अंक पर, विशेष रूप से एचसीसी पिंड भीतर देखा जा सकता है, जबकि आसपास के यकृत वायरस का कोई सबूत नहीं दिखाया प्रतिकृति (चित्रा 3 और 4, पहले प्रकाशित डेटा 8,9)। इसके अतिरिक्त, बेतरतीब ढंग से चुनी VSV इलाज ट्यूमर पिंड के morphometric विश्लेषण प्रदर्शन किया है कि ट्यूमर पारगमन दक्षता ट्यूमर के आकार (चित्रा 3) के साथ संबंध स्थापित नहीं करता।
इसके अलावा, यकृत धमनी के माध्यम से चिकित्सीय एजेंट देने की क्षमता भी TACE के लिए एक विकल्प के रूप में एक embolization एजेंट के साथ चिकित्सा गठबंधन करने की संभावना प्रदान करता है। हमने दिखा दिया है कि, एक 1 पर oncolytic VSV के मिश्रण से: एक सड़ सकने स्टार्च microsphere (डीएसएम) embolization एजेंट के साथ 1 के अनुपात और निलंबन thr infusingयकृत धमनी ough, हम बड़े पैमाने पर ट्यूमर नेक्रोसिस और चूहों में बहुत ही महत्वपूर्ण अस्तित्व मोहलत असर मल्टीफोकल एचसीसी पिंड 11 को प्राप्त कर सकता है। डीएसएम के ट्रांस-यकृत धमनी प्रशासन, ट्यूमर पिंड के एक लगभग पूरा embolization में हुई है, जबकि सामान्य जिगर ऊतक के छिड़काव पर एक न्यूनतम प्रभाव होने के रूप में गतिशील विपरीत बढ़ाकर चुंबकीय अनुनाद इमेजिंग (डीसीई-एमआरआई) द्वारा प्रदर्शन एक gadolinium विपरीत का उपयोग एजेंट (चित्रा 5, पहले प्रकाशित डेटा 11)।
चित्रा 1. यकृत धमनी निषेचन प्रक्रिया के योजनाबद्ध प्रतिनिधित्व। यकृत वाहिकाओं (आम यकृत धमनी, उचित यकृत धमनी, और gastroduodenal धमनी) एक विदारक माइक्रोस्कोप की सहायता से विच्छेदित कर रहे हैं। gastroduodenal धमनी के बंधाव और आम यकृत धमनी के अस्थायी ब्लॉक के बाद,पीबीएस या VSV वेक्टर के 1 मिलीलीटर उचित यकृत धमनी के माध्यम से gastroduodenal धमनी के माध्यम से प्रशासित रहे हैं। इंजेक्शन के बाद, gastroduodenal धमनी के समीपस्थ साइट रक्तस्राव को रोकने के लिए ligated है, आम यकृत धमनी के ब्लॉक जारी की है, और यकृत रक्त के प्रवाह की पुनारंभ पुष्टि की है। यह आंकड़ा पहले 9 प्रकाशित किया गया है। यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।
चित्रा 2 यकृत धमनी निषेचन प्रक्रिया के फोटोग्राफ। ए laparotomized चूहे पेट की दीवार प्रतिकर्षक और धुंध swabs (ए) के स्थान को दर्शाता है। यकृत पालियों, आम यकृत धमनी (नामित) और चा gastroduodenal धमनी (जीए नामित) की पहचान कर रहे हैं और जिले से बाहर उठाने के बादsected (बी)। Gastroduodenal धमनी के बाहर का अंत ligating के बाद, आम यकृत धमनी अस्थायी रूप से (सी) clamped है। Gastroduodenal धमनी अब इंजेक्शन के लिए तैयार है। यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।
चित्रा 3. पारगमन और मल्टीफोकल एचसीसी असर चूहों में यकृत धमनी के बाद प्रशासन VSV के ट्यूमर चयनात्मक प्रतिकृति। जानवरों के समूह (एन = 3 / समय बिंदु) दिन 1 पद वायरस पर 30 मिनट के लिए और (बी) (ए) बलिदान किया गया आसव, और जमे हुए जिगर वर्गों β-लड़की अभिव्यक्ति के लिए दाग रहे थे। प्रतिनिधि वर्गों कम (बाएं) और उच्च आवर्धन (दाएं) पर दिखाया गया है। तीर ट्यूमर घावों और HEPA के बीच की सीमाओं से संकेत मिलता हैटिक पैरेन्काइमा। (सी) ट्यूमर के आकार और पारगमन क्षमता के बीच संबंध। एचसीसी युक्त जिगर वर्गों morphometric विश्लेषण द्वारा विश्लेषण किया गया कुल ट्यूमर और एक्स-लड़की पॉजिटिव क्षेत्रों यों की। यह आंकड़ा पहले 9 प्रकाशित किया गया है। यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।
चित्रा 4. NDV / F3aa (L289A) हेपैटोसेलुलर कार्सिनोमा में ट्यूमर विशिष्ट वायरस प्रतिकृति में उपचार के परिणाम (एचसीसी) -bearing चूहों। असर मल्टीफोकल ओर्थोटोपिक एचसीसी पिंड नर भैंस के चूहों rNDV / F3aa (L289A) (10 8 TCID 50) के साथ इलाज किया गया यकृत धमनी अर्क से, और संकेत समय में मारे गए अंक के बाद इलाज (एन = 3)। ट्यूमर युक्त जिगर वर्गों अधीन थेबीटा लड़की धुंधला करने के लिए। प्रतिनिधि वर्गों 5X (अवलोकन) और 20X (ट्यूमर और जिगर वर्गों की बढ़ाई) बढ़ाई दिखाए जाते हैं। वायरल titers जिगर और ट्यूमर lysate के TCID 50 विश्लेषण द्वारा मात्रा निर्धारित किया गया है, और ± एसडी मतलब के रूप में व्यक्त कर रहे हैं। NDV, न्यूकासल रोग वायरस; TCID 50, 50% टिशू कल्चर संक्रामक खुराक। ध्यान दें, यह आंकड़ा अपने मूल रूप 8 से संशोधित किया गया है। यह आंकड़ा पहले से 8 प्रकाशित किया गया है। यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।
चित्रा 5. गतिशील विपरीत बढ़ाकर embolized एचसीसी। MCA-RH7777 ट्यूमर असर चूहों, या तो nonembolized या डीएसएम के साथ यकृत धमनी embolization के बाद 30 मिनट के चुंबकीय अनुनाद इमेजिंग डीसीई एमआरआई के साथ imaged थे। (<strong> ए) अक्षीय T1-तौल precontrast (ए, सी) और postcontrast (बी, डी) छवियों embolized ट्यूमर पिंड (घ) में इसके विपरीत के अभाव दिखा। (बी) डाटा मात्रात्मक ट्यूमर पिंड और आसन्न सामान्य जिगर ऊतक के हित के बराबर आकार क्षेत्रों में ग्रे पैमाने पर संकेत तीव्रता को मापने के द्वारा विश्लेषण किया गया। एक प्रतिनिधि डेटा सेट दिखाया गया है। यह आंकड़ा पहले से प्रकाशित किया गया है 11। यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।
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Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Veterinary clippers | Aesculap | GT415 | Small, cordless trimmer ideal for removing fur from surgical area |
| Stereomicroscope | Zeiss | Stemi SV6 | |
| 30 G Needles | Braun | 4656300 | 30 G x ½” |
| 1 ml syringes | Braun | 9161406V | Tuberculin syringe |
| Disposable scalpel | Feather | 2975#15 | #15 blade |
| Standard surgical scissors | Fine Science Tools | 14001-13 | Sharp/blunt, for opening skin and muscle |
| Adson forcep | Fine Science Tools | 1101-12 | With teeth, for grasping skin and muscle |
| Alm retractor | Fine Science Tools | 17008-07 | With blunt teeth, for spreading abdominal cavity open during surgery |
| Gauze swabs | Lohmann & Rauscher | 18504 | 7.5 cm x 7.5 cm, should be autoclaved prior to use |
| Cotton-tipped applicator swabs | Lohmann & Rauscher | 11970 | Sterile |
| Fine-tipped foreceps | Fine Science Tools | 11063-07 | 0.4 mm, angled tip, for dissecting hepatic artery |
| Vannas spring scissors | Fine Science Tools | 91500-09 | For delicate cutting |
| Micro-needle holder | Fine Science Tools | 12076-12 | For ligating gastroduodenal artery |
| Needle holder | Fine Science Tools | 12005-15 | Tungsten carbide jaws |
| 7-0 Prolene sutures | Ethicon | 8648H | Polypropylene suture with curved needle, for ligating gastroduodenal artery |
| 4-0 Vicryl sutures | Ethicon | V3040H | With curved needle attached |
| Infrared warming lamp | Beurer | IL11 | For maintaining body temperature post-operatively |
References
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