तंत्रिका-बख्शते मध्य मूत्रमार्ग महिला छोटे चूहे में बाधा (निमो)
Summary
कृन्तकों में आंशिक मूत्राशय निकास रुकावट के पारंपरिक मॉडलिंग पशु मृत्यु दर से भरा है। समीपस्थ मूत्रमार्ग और मूत्राशय गर्दन के चारों ओर विच्छेदन से एक वितंत्रीभवन चोट प्रमुख चिंता का विषय भी है। हम विकसित किया है और एक सुरक्षित और विश्वसनीय मध्य मूत्रमार्ग बाधा मॉडल का मूल्यांकन किया, पारंपरिक मॉडल की कमियों से परहेज।
Abstract
आंशिक मूत्राशय निकास रुकावट (pBOO) एक उच्च व्याप्ति है, महत्वपूर्ण रोगी बोझ, और विशाल स्वास्थ्य देखभाल की लागत का कारण बनता है। pBOO में मूत्राशय remodeling जांच करने के लिए सबसे आम पशु मॉडल महिला समीपस्थ मूत्रमार्ग में आंशिक रुकावट के दौर से गुजर मूषक है। रुकावट और पशु मृत्यु दर की डिग्री में परिवर्तनशीलता समीपस्थ रुकावट के साथ प्रमुख चिंताएं हैं। इसके अलावा, समीपस्थ मूत्रमार्ग और मूत्राशय गर्दन के चारों ओर चीर-फाड़ मूत्राशय इन्नेर्वतिओन को जोखिम में डाल।
हम pBOO के लिए एक तंत्रिका बख्शते मध्य मूत्रमार्ग बाधा (निमो) मॉडल पारंपरिक मॉडल का नुकसान से बचने का विकास किया। हम मूत्रमार्ग सिर्फ जघन सहवर्धन, जो laparotomy के लिए और साथ ही इस क्षेत्र में विच्छेदन के लिए की जरूरत नहीं रही करने के लिए अवर संपर्क किया; भी, धारीदार मूत्रमार्ग दबानेवाला यंत्र अछूता बना रहा। हम महिला Sprague-Dawley चूहों में निमो प्रदर्शन (12 अवरोधों, 6 नकली जानवरों) और साथ ही में महिला C57 / BL6 चूहों (20 रुकावटरों, 18 दिखावा जानवरों)। दो सप्ताह के बाद, हम मूत्राशय समारोह, मूत्राशय बड़े पैमाने पर, और शरीर द्रव्यमान का मूल्यांकन किया।
हम obstructed- या दिखावा संचालित मादा चूहों के बीच में कोई मौत नहीं हुई; के रूप में पारंपरिक समीपस्थ pBOO-विधि के लिए वर्णित है, हम समीपस्थ मूत्रमार्ग के आसपास टांका बंधे और एक अस्थायी रूप से 0.9 मिमी धातु की छड़ रखा। निमो दो सप्ताह के बाद मूत्राशय मास में एक 85% वृद्धि प्रेरित, औसत अवशिष्ट मूत्र की मात्रा, जबकि केवल 0.03 एमएल दिखावा पशुओं में आंशिक रूप से बाधित चूहों में 0.4 एमएल था। चूहों में, हम cannulas कि हम मूत्रमार्ग के साथ रखा जब टांका बांधने के 3 आकारों का परीक्षण किया। हमने पाया है कि एक 27 गेज प्रवेशनी का उपयोग कर 50% पशु मृत्यु दर अधिक हुई; 25 गेज प्रवेशनी रखने में वृद्धि मूत्राशय मास में वांछित प्रतिक्रिया उपज नहीं था; एक 26 गेज प्रवेशनी का उपयोग कम से कम पशु मृत्यु दर (1/8) अभी तक मूत्राशय जन में एक महत्वपूर्ण 2 गुना वृद्धि के साथ अनुकूल परिणाम सामने आए।
Introduction
आंशिक मूत्राशय निकास रुकावट (pBOO) एक उच्च व्याप्ति है और गंभीर मूत्राशय रोग 1 में परिणाम कर सकते हैं; स्पेक्ट्रम ऐसी पीछे मूत्रमार्ग वाल्व या अधोमूत्रमार्गता के रूप में जन्मजात विरूपताओं, सुसाध्य प्रोस्टेटिक हाइपरप्लासिया को प्राप्त कर लिया मूत्रमार्ग बाध्यताओं से अधिक से पर्वतमाला। बाद पुरुषों साठ साल के 30% से अधिक और पुराने 2 को प्रभावित करने वाले। ग्रेट रोगी बोझ और विशाल स्वास्थ्य देखभाल pBOO के साथ जुड़े लागत काफी अनुसंधान प्रयास वृद्धि हुई बहिर्वाह प्रतिरोध 3 के जवाब में अध्ययन कर मूत्राशय remodeling में डाल दिया वारंट। 2006 से 2015 तक, 220 से अधिक PubMed अनुक्रमित लेख मूत्राशय पर pBOO के प्रभाव के विषय में प्रकाशित किए गए थे।
PBOO के लिए पशु मॉडल इस तरह के चूहे 5, खरगोश 6, सुअर 7, और समझौता ज्ञापनों के रूप में कई प्रजातियों 4, में तैयार किया गया है हालांकिई 8, 9, यकीनन सबसे अधिक इस्तेमाल किया पशु मॉडल हालांकि महिला समीपस्थ मूत्रमार्ग के आंशिक रुकावट के दौर से गुजर चूहों कर रहे हैं; मूत्राशय गर्दन के चारों ओर पशुओं के पेट के लिए उपयोग, मूत्राशय के exteriorizing, और विच्छेदन इस पारंपरिक समीपस्थ मूत्रमार्ग बाधा तकनीक के साथ अपरिहार्य हैं। रुकावट और पशु मृत्यु दर की डिग्री में परिवर्तनशीलता हैं केवल इस प्रक्रिया 10, 11 के साथ जुड़े चिंताओं में से कुछ; हम पता चला है कि नकली संचालित पशुओं में, समीपस्थ मूत्रमार्ग के आसपास विच्छेदन शारीरिक परिवर्तन है कि मूत्राशय गर्दन 12 में तंत्रिका तंतुओं के नुकसान के साथ संबंध स्थापित करने के लिए ले जाता है। यह निष्कर्ष इंगित करता है, कि सबसे अधिक इस्तेमाल किया pBOO पशु मॉडल है, जो महिला कृन्तकों में समीपस्थ मूत्रमार्ग तक पहुँचने शामिल है,, मूत्राशय के संबद्ध संरचनात्मक और कार्यात्मक परिवर्तनों के साथ एक वितंत्रीभवन चोट की ओर जाता है को प्रभावित करने वालेदिखावा और बाधित जानवरों। इसलिए, एक वैकल्पिक दृष्टिकोण से परहेज वितंत्रीभवन चोट की जरूरत थी। हमारी प्रयोगशाला विकसित और, एक तंत्रिका-बख्शते मध्य मूत्रमार्ग बाधा (निमो) दृष्टिकोण का मूल्यांकन किया, इस तरह के अंग बड़े पैमाने पर और अवशिष्ट मूत्र में वृद्धि के रूप में मूत्राशय में होने की उम्मीद बाधा जुड़े परिवर्तन उत्प्रेरण में प्रभावी जबकि दिखावा संचालित जानवरों unoperated नियंत्रण जानवरों से पृथक थे । इसके अलावा, धारीदार मूत्रमार्ग दबानेवाला यंत्र अछूता बने रहे के रूप में यह विच्छेदन के स्तर तक समीपस्थ निहित है। इसके अलावा, मूत्राशय मास में रुकावट प्रेरित वृद्धि में परिवर्तनशीलता पारंपरिक समीपस्थ मूत्रमार्ग बाधा में तुलना में कम थी और पशु मृत्यु दर शून्य था।
हम भी सफलतापूर्वक निमो महिला चूहों में बाधित पशुओं में एक 10% से कम मृत्यु दर के साथ, लागू किया, जबकि तारीख को वर्णित चूहों के लिए सभी pBOO मॉडल 50% के आसपास एक मृत्यु दर के साथ जुड़े थे। चूहों में pBOO के संदर्भ में मूत्राशय remodeling अध्ययन applicabil से लाभ होगाट्रांसजेनिक संशोधनों के पूरे स्पेक्ट्रम के ity।
महिला कृन्तकों में मध्य मूत्रमार्ग के आसपास चीर-फाड़ पारंपरिक समीपस्थ बाधा मॉडल में मनाया मूत्राशय में अवांछनीय और तर्क गुमराह संरचनात्मक या कार्यात्मक परिवर्तनों उत्पन्न नहीं करता है। फिर भी, मध्य मूत्रमार्ग स्तर पर एक आंशिक रुकावट उत्प्रेरण अभी भी मूत्राशय अतिवृद्धि को प्रेरित करता है और अवशिष्ट मूत्र वृद्धि हुई है, pBOO के लिए एक पशु मॉडल से अपेक्षा के अनुरूप। महत्वपूर्ण रूप से, चूहों में निमो प्रदर्शन ट्रांसजेनिक विधियों, जो बड़े कृन्तकों में लगभग करने के लिए उपलब्ध नहीं हैं pBOO में मूत्राशय remodeling की जांच खोलता है।
Protocol
Representative Results
Discussion
पशु मृत्यु दर कई रिपोर्ट 10, 11, 13 में समीपस्थ मूत्रमार्ग में pBOO के पारंपरिक मॉडल की प्रमुख चिंताओं, 15% या उससे अधिक में से एक है। निमो जब मादा चूहों में लागू न्यूनतम ?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
The work was funded by a CHIR operating grant (DJB).
Materials
| Female rat | Charles-River Canada | Sprague Dawley Rat (Crl:SD); Strain Code: 400 | about 200g |
| Isoflorane vaporizer | Benson medical industries inc. | TEC III Isoflurane; product code: 53-T3ISO | |
| Isoflorane | Fresenius Kabi Animal Health | Isoflorane; product code CP0406V2 | 250ml bottle |
| Disposable scalpell | Ted Pella, Inc. | #15 Sterile, Stainless Steel Scalpels; catalogue number 549-9-15S | |
| Microscopy forceps | Ted Pella, Inc. | Aesculap Microscopy Forceps, Finepoint, 115mm; product number 5443 | |
| Adson forceps | Ted Pella, Inc. | Aesculap Adson Dissection Forceps, Curved, 120mm; product number 5002-9 | |
| Curved surgical scissors | Ted Pella, Inc. | Surgical Scissors, Curved, S/S, 105mm; catalogue number 1376 | |
| 0.9mm inox metal rod | goodfellow.com | Stainless Steel – AISI 316L Wire Diameter:0.9mm; order code 911-684-65 | |
| Skin hooks – self made from inox steel | goodfellow.com | Stainless Steel – AISI 316L Wire Diameter:0.9mm; order code 911-684-65 | |
| 4-0 Silk suture | esutures.com | 4-0 Sofsilk black 98" strand; product number LS640 | |
| 5-0 Vicry suture | esutures.com | 5-0 Vicryl undyed 27" RB-1 taper; product number J213H | |
| Needle holder | Medsupplier.com | Integra Miltex Carb-N-Sert Baumgartner Needle Holder – 5 1/2"; product code SKU NEE4484-8-40TC SKU NEE4484-8-40TC SKU NEE4484-8-40TC |
|
| Temgesic (Buprenorphine) | first veterinary supply | Buprenex 0.3MG/ml inj amps; item #075701 | |
| 1ml syringe with 27G needle | Fisher Scientific | BD Tuberculin Syringe, BD 309623 | |
| 20G Angiocath | Fisher Scientific | Andwin Scientific ANGIOCATH 20 GA; Catalog No. NC9561906 | |
| Recovery diet | clearh2o | DietGel 31M; 72-08-5022 | |
| C57Bl/6 female mice | Charles-River Canada | C57BL/6 Mouse (C57BL/6NCrI); Strain Code: 027 | about 18g |
| 24G angiocath | Fisher Scientific | Hanna Pharmaceutical Supply Co., Inc. IV CATH ANGIOCATH 24GX3/4IN; Catalog No. NC9814340 | |
| 5-0 Ethibond | esutures.com | 5-0 Ethibond green 30" RB-1 taper; product number X550H | |
| 26G syringe needle | Sigma-Aldrich | BD Precisionglide syringe needle, Gauge 26; z192392 | |
| Normal Saline | Baxter | 0.9% Sodium Chloride Injection, USP, 100 mL MINI-BAG; product code 2B0043 |
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