Summary
Questo protocollo descrive un mezzo clinicamente applicabile di dissoluzione composti idrofobici in ambiente acquoso, utilizzando combinazioni di autoassemblanti soluzioni peptidi e aminoacidi. Il nostro metodo risolve una limitazione importante di terapeutica idrofobica, che mancano mezzi sicuri, efficienti metodi di solubilità e consegna nelle regolazioni cliniche.
Abstract
I peptidi autoassemblanti (SAPs) sono promettenti veicoli per la consegna di idrofobo terapeutica per applicazioni cliniche; loro proprietà amphipathic permettono loro di sciogliere composti idrofobici in ambiente acquoso del corpo umano. Tuttavia, autoassemblanti soluzioni del peptide hanno sangue scarsa compatibilità (ad es., bassa osmolarità), ostacolando la loro applicazione clinica attraverso le amministrazioni per via endovenosa. Recentemente abbiamo sviluppato una piattaforma generalizzata per la somministrazione di farmaci idrofobici, che combina SAPs con soluzioni dell'amminoacido (SAP-AA) per aumentare la solubilità del farmaco e aumentare osmolarità di formulazione per raggiungere i requisiti per usi clinici. Questa strategia di formulazione è stata testata nell'ambito di tre composti idrofobici strutturalmente diversi – PP2, rottlerina e curcumina – al fine di dimostrare la sua versatilità. Inoltre, abbiamo esaminato gli effetti di sostituire i componenti di formulazione analizzando 6 diversi succhi, 20 aminoacidi naturalmente esistenti alle alte e basse concentrazioni e due diverse co-solventi dimetil solfossido (DMSO) ed etanolo. La nostra strategia si è dimostrata efficace nell'ottimizzazione di componenti per un dato farmaco idrofobo e funzione terapeutica dell'inibitore formulato, PP2, è stata osservata sia in vitro che in vivo. Questo manoscritto delinea il nostro metodo di formulazione generalizzata attraverso combinazioni di SAP-AA composti idrofobici e l'analisi di solubilità come un primo passo verso l'uso potenziale di queste formulazioni negli studi più funzionale. Includiamo risultati di solubilità rappresentativi per la formulazione della curcumina composto, idrofobo e discutere di come la nostra metodologia funge da piattaforma per futuri studi biologici e modelli di malattia.
Introduction
SAPs sono una classe di biomateriali che sono stati studiati estesamente come impalcature 3D in medicina rigenerativa1,2,3,4. Più recentemente, tuttavia, essi sono stati sfruttati come veicoli per la consegna di terapeutica a causa di loro proprietà biologiche uniche5,6,7,8. SAPs naturalmente assemblare in nanostrutture stabile9, fornendo così un mezzo di incapsulamento di droga e di protezione. SAPs sono amphipathic, composto da un modello specifico di ripetizioni dell'aminoacido idrofobico e idrofilico, guida loro auto-assemblaggio9,10 e permettendo loro di servire da mezzo tra idrofobico e idrofilico ambienti. Di conseguenza, per la consegna clinica di farmaci idrofobici – che hanno estremamente bassa biodisponibilità e l'assorbimento nel corpo a causa della mancanza di solubilità in ambienti acquosi11,12 -SAPs sono promettenti come una consegna veicolo. Inoltre, i loro pattern di sequenza implica anche che SAPs può essere razionalmente progettato e realizzato per ottimizzare la compatibilità con qualsiasi dato farmaco o composti (cioè, basato su gruppi funzionali) e agevolare ulteriormente la solubilità.
SAPs sono stati applicati come veicoli di consegna di farmaco efficace in molti in vitro e in vivo le impostazioni13,14,15,16. Hanno anche mostrato biocompatibilità e grande sicurezza. Tuttavia, a causa della bassa osmolarità dei preparativi di SAP-droga, non possono essere utilizzati per iniezioni endovenose come in contesti clinici13. Considerando questo fermo, abbiamo recentemente sviluppato una strategia che combina SAPs con soluzioni di aminoacidi al fine di ridurre l'uso di co-solventi tossici e aumentare l'osmolarità di formulazione e pertanto, rilevanza clinica. Ci ha scelto di usare gli aminoacidi sono gli elementi costitutivi di SAPs, sono già clinicamente accettata, e in combinazione con SAPs, aumentano la solubilità del farmaco idrofobo mentre riducendo la quantità di SAP ha richiesto17,18.
Noi abbiamo esaminato combinazioni di SAP-AA come una piattaforma generalizzata per solubilità farmaco idrofobo e successiva consegna creando una pipeline di screening multifase e applicarlo all'inibitore Src, PP2, come un composto idrofobo di modello. In questo processo, abbiamo esaminato l'effetto di sostituire i componenti della formulazione – in ultima analisi, prove 6 diversi SAPs, tutti i 20 amminoacidi a 2 differenti concentrazioni (bassa e alta; basso basate sulle concentrazioni in applicazioni cliniche esistenti e di alta le concentrazioni erano 2x, 3x o 5x la concentrazione clinica basata sulla solubilità massima di ciascun amminoacido in acqua) e 2 diversi co-solventi – e combinazioni selezionate che solubilizzato PP2 per ulteriori analisi. Questa formulazione di droga ha dimostrato di essere efficace come un veicolo di consegna di droga in coltura delle cellule, come pure in vivo modelli utilizzando le amministrazioni intratracheale sia per via endovenosa. Allo stesso modo, il nostro lavoro ha toccato la versatilità delle combinazioni di SAP-AA in multiplo solubilizzante, strutturalmente diversi composti idrofobici in ambienti acquosi; in particolare, i farmaci rottlerina e curcumina18. Questo manoscritto delinea la formulazione ed analisi delle solubilità di curcumina come un esempio del passaggio primario nella nostra pipeline di screening SAP-AA. Questo protocollo fornisce un modo semplice e riproducibile per schermo per le combinazioni ottimale SAP-AA, che si dissolvono qualsiasi dato composto idrofobo.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
1. preparazione delle soluzioni dell'amminoacido
- preparare ed etichetta due provette di centrifuga a fondo conico da 50 mL per ogni amminoacido (uno ciascuno per entrambi " basso " e " alta " concentrazioni).
- Preparare un pallone da 2 L grande contenente acqua purificata (18,2 MΩ·cm a 25 ° C).
- Calcolare la quantità di ciascun amminoacido (in grammi) per raggiungere la concentrazione desiderata e pesare la quantità appropriata di amminoacido in loro tubi di centrifuga rispettivi 50 mL utilizzando una spatola.
Nota: Per la " alta " concentrazione dei due amminoacidi caricati negativamente, PBS viene utilizzato al posto dell'acqua. Non potremmo aumentare le loro concentrazioni a causa della loro solubilità in acqua bassa e utilizzando PBS invece di acqua aiuta a mantenere il pH basso. Inoltre, i calcoli di concentrazione sono stati ottenuti utilizzando un volume finale di 40 mL per ogni soluzione di aminoacidi. Tutte le concentrazioni di aminoacidi sono descritti nella tabella 3. Assicuratevi di risciacquare la spatola tra gli aminoacidi per evitare la contaminazione. Si consiglia un risciacquo con acqua, quindi asciugare con etanolo al 70%. - Aggiungere 40 mL di acqua purificata (o PBS) in ogni provetta 50 mL utilizzando una pipetta sierologica. Coprire le provette e vortexare o agitare vigorosamente fino a completa dissoluzione. Acqua bagno sonicazione (temperatura ambiente, 130 W, 40 kHz) può essere utilizzato anche per aiutare nel processo di solubilità.
Nota: Le seguenti soluzioni di aminoacidi sono sensibili alla luce e dovrebbe essere coperto con carta stagnola: triptofano, fenilalanina e tirosina (che consistono di strutture simili a anello aromatiche) e la cisteina (reattiva - gruppo SH).
2. Preparazione delle soluzioni SAP-AA
- preparare 20 mL fiale di scintillazione per l'auto-assemblaggio peptidi. Per un determinato peptide autoassemblanti, preparare un flaconcino per soluzione preparata dell'amminoacido (ogni combinazione sarà effettuato in un flaconcino separato).
- Utilizzando una bilancia analitica ad alte prestazioni (con risoluzione fino a 0,1 mg o meno), pesano circa 1 ± 0,2 mg di peptide nella parte inferiore di ogni flacone. Tappo dopo aver soppesato e registrare il peso esatto del peptide sul Cap.
- Dispensare il volume appropriato di soluzione dell'aminoacido (preparato nella sezione 1) in ogni flaconcino contenente il peptide, al fine di raggiungere la concentrazione desiderata di auto-assemblaggio del peptide (0,1 mg/mL per i peptidi lunghi con una lunghezza di 16 aminoacidi, o 0,2 mg/mL per più brevi peptidi con una lunghezza di 8 aminoacidi).
- Sonicate per 10 min in un sonicatore di vasca del acqua (130 W, 40 kHz) a temperatura ambiente, garantendo le soluzioni all'interno di flaconcini sono completamente immersi nel bagno d'acqua.
3. Preparazione del farmaco-DMSO o droga-etanolo Stock soluzioni
- Combine 1 mg di farmaco (in questo caso, la curcumina con 100% DMSO) e un altro 1 mg con etanolo al 100% per creare due soluzioni stock.
Nota: Abbiamo aggiunto 200 µ l di DMSO e 400 µ l etanolo a fare scorte di DMSO-curcumina ed etanolo-curcumina che erano 5 mg/mL e 2,5 mg/mL, rispettivamente, a causa della diversa solubilità in ogni solvente; Tuttavia, è importante notare che la concentrazione di stock dovrebbe essere regolata secondo la droga idrofobica di interesse. Fattori quali la solubilità di droga e concentrazione biologica efficace sono importanti nel determinare questo valore. Inoltre, tenete a mente che il brodo sarà diluito 100 volte e 50 in formulazioni di DMSO ed etanolo, rispettivamente, quando combinato con le soluzioni SAP-AA (Vedi sezione 4). Può essere preferito per preparare un volume maggiore di magazzino in base al numero di formulazioni richiesto – in questo caso, potrebbe essere utilizzato più di 1 mg di farmaco. Lo stock possa essere conservato a-20 ° C; scongelare il ghiaccio e agitare prima dell'uso. - Vortex fiale per 15 s per sciogliere completamente il farmaco.
4. Preparazione delle formulazioni di droga
- preparare chiaro, microcentrifuga da 1,5 mL per ogni formulazione. Assicurarsi di etichettare provette con la modalità auto-assemblanti peptidi, aminoacidi (e concentrazione) e co-solvente.
- Aggiungere 10 µ l di droga-DMSO stock, o magazzino di droga-etanolo 20 µ l per microcentrifuga appropriato. Le provette microcentrifuga di
- aggiungere 990 µ l di soluzioni acide di SAP-AA per l'appropriato contenenti droga-DMSO stock e 980 µ l a quelli contenenti Stock in droga-etanolo. Questo produce formulazioni di farmaci 1 mL con 1% di DMSO o 2% di etanolo.
Nota: La concentrazione finale di tutte le formulazioni della curcumina era 0,5 mg/mL secondo il protocollo. Ancora una volta, questo può variare quando utilizzando altri composti idrofobici e/o cominciando con una diversa concentrazione di stock (Vedi punto 3.1) - Vortex vigorosamente per 30 s e permettono formulazioni a riposare per 30 min.
5. test di solubilità
- dopo il periodo di riposo, vortexare vigorosamente nuovamente per 30 s.
- Centrifugare le formulazioni a 14.220 x g per 1 min.
- Analizzare il fondo delle provette microcentrifuga per precipitazione (di visualizzazione).
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Il farmaco idrofobo, curcumina, abbiamo realizzato formulazioni utilizzando tutti i 20 naturalmente esistenti aminoacidi a basse concentrazioni, in combinazione con un solo SAP, EAK16-II, come una prova-de-principio. Abbiamo testato anche formulazioni usando DMSO e etanolo come co-solventi. In totale, questo prodotto 40 formulazioni della curcumina, ciascuna contenente diversi componenti. È importante notare che, nei nostri studi precedenti utilizzando l'inibitore di Src, PP2, abbiamo incluso più opzioni per SAP (totale 6) e concentrazione dell'amminoacido (clinici, così come una concentrazione più elevata), che ha prodotto un totale di 480 diverse formulazioni. Tendenze da questo lavoro sono stati presi in considerazione quando si seleziona EAK16-II come la linfa per questo studio. Le concentrazioni dei vari componenti sono inclusi in tabella 1, tabella 2e tabella 3 come riferimento. Tutte le formulazioni di farmaci idrofobici sono schermate per solubilità di droga di visualizzazione e considerate solubile se la soluzione è completamente libera da qualsiasi precipitato dopo la centrifugazione (Figura 1). Se il farmaco si precipita verso il basso del tubo, questo è considerato non solubili e non andare attraverso ulteriori esami. Inoltre, la solubilità è testata in triplice copia e da due diversi individui. Se questi risultati non sono riproducibili, formulazioni inoltre non sono considerati essere veramente solubile.
Fuori le 40 formulazioni testate in questo studio, 7 formulazioni dissolto con successo la curcumina (tabella 4). Formulazioni di raggruppamento di componenti identificati due principali tendenze: etanolo sembra essere un co-solvente migliore per sciogliere la curcumina e positivamente gli aminoacidi lisina (K) e arginina (R) sembrano anche essere componenti ottimali per la dissoluzione di curcumina (tabella 4). è interessante notare il cambiamento di colore per le formulazioni contenenti R e K, che rivelano la curcumina è dissolto nella condizione alcalina (Figura 1). È utile alle formulazioni di gruppo dalle proprietà dei vari componenti per rendere tali osservazioni.
Figura 1 : Esempio di analisi precipitazioni. Per queste formulazioni della curcumina contenente il peptide EAK16-II, etanolo e carica gli aminoacidi, precipitato può essere visto chiaramente nelle provette microcentrifuga dopo la centrifugazione. Le formulazioni contenenti lisina (K), arginina (R) o acido aspartico (D) sciogliere la curcumina (nessun precipitato), mentre quelli contenenti istidina (H) o acido glutammico (E) non lo fanno (precipitare, cerchiato in rosso). Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.
| Droga | Formulazione di concentrazione (mg/mL) |
| PP2 | 0.05 |
| Curcumina | 0.05 |
| Rottlerina | 0,02 |
Tabella 1: Concentrazione di farmaci utilizzati nelle formulazioni. Concentrazioni nella formulazione di droga differiscono in quanto ognuno ha una diversa concentrazione bioactive e anche la capacità di caricamento diverso.
| Peptide autoassemblanti | Proprietà | Formulazione di concentrazione (mg/mL) |
| EAK16-HO | Famiglia EAK, lungo | 0.1 |
| EAK16-II | Famiglia EAK, lungo | 0.1 |
| EAK16-IV | Famiglia EAK, lungo | 0.1 |
| EFK8-II | EAK modificate, breve | 0.2 |
| A6KE | Simil-tensioattivo, breve | 0.2 |
| P6KE | Simil-tensioattivo, breve | 0.2 |
Tabella 2: concentrazione di peptidi utilizzati nelle formulazioni di self-assembly. Con l'aggiunta di aminoacidi, sono necessari solo piccole concentrazioni di peptide autoassemblanti (0,1-0,2 mg/mL). Più brevi peptidi sono doppio la concentrazione rispetto ai peptidi più lunghi come hanno la metà della lunghezza di sequenza (8 aminoacidi contro 16 aminoacidi).
Tabella 3: concentrazione delle soluzioni dell'amminoacido utilizzato nelle formulazioni. Basse concentrazioni di aminoacidi sono state cantate le esistenti applicazioni cliniche di ciascuno. Alte concentrazioni sono 2x, 3x, o 5 x la concentrazione clinica e all'interno la solubilità massima di ciascun amminoacido in acqua. Questa figura è stata modificata da Pacheco et al. 18
Tabella 4: risultati di solubilità rappresentativo per la curcumina. Una sintesi delle combinazioni SAP-AA che efficacemente dissolto la curcumina dopo lo screening per la solubilità. Questa figura è stata modificata da Pacheco et al. 18
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Nella procedura di formulazione, ci sono varie fasi critiche e punti da considerare nella risoluzione dei problemi. Innanzitutto, come stiamo lavorando con i vari componenti e concentrazioni, più passaggi di vortice in tutto il protocollo assicurano che tutte le concentrazioni sono uniforme e corretta. Alcune delle soluzioni dell'amminoacido ad alta concentrazione, idrofobo, ancora non può essere completamente sciolta dopo Vortex, e in questo caso, può essere scosso vigorosamente a mano per facilitare il processo. Allo stesso modo, è essenziale che soluzioni SAP-AA subiscono il passaggio di sonicazione descritto in passaggio 2.4 come SAPs naturalmente tendono ad aggregare e sonicazione aiuteranno a frammentare i cluster di SAP, con il risultato di una soluzione più uniforme. In secondo luogo, per un dato farmaco idrofobo, il brodo e le concentrazioni finali all'interno di formulazioni di SAP-AA dovrebbero dipendere la concentrazione efficace di quel composto nelle impostazioni biologiche. Il protocollo dovrebbe essere modificato di conseguenza per riflettere questa concentrazione attiva. Inoltre, la capacità di carico di droga è anche un fattore importante da considerare; è probabile che ogni droga avrà una capacità di carico unico utilizzando questa strategia, e che ogni combinazione di SAP-AA può sostenere una diversa quantità di farmaco basato sulla compatibilità. Questo dimostra l'importanza dello screening per trovare la combinazione ottimale di SAP-AA per un determinato composto.
Ci sono una serie di vantaggi di usare la nostra tecnica rispetto ad altre; più in particolare, c'è grande significato rispetto al metodo convenzionale di utilizzando SAPs da solo per la consegna di incapsulamento e potenziale di un composto. Come accennato in precedenza, gli aminoacidi sono già clinicamente accettata e l'aggiunta di queste soluzioni a formulazioni di SAP aumenta osmolarità per diminuire l'attività emolitica, tale che le iniezioni endovenose in scenari clinici sono possibili. Abbiamo anche trovato che notevolmente aumentare la solubilità composti idrofobi in casi dove SAPs da solo sono insufficienti per solubilità17,18. Le più diverse combinazioni di succhi ed amminoacidi coinvolti consente l'espansione in un metodo di alto-rendimento alla schermata per la solubilità del farmaco idrofobo. Dati di solubilità possono essere analizzati in dettaglio per rivelare tendenze; Abbiamo trovato che l'ordinamento risultati per componente della formulazione (SAP o aminoacido) Mostra un modello probabile essere univoco per ogni farmaco idrofobo. Ad esempio, gli amminoacidi carichi positivamente migliorare la solubilità di curcumina (Figura 1), mentre i nostri studi precedenti hanno mostrato che gli aminoacidi carichi negativamente erano meglio per PP218. Queste tendenze possono aiutare a determinare l'idoneità dei componenti specifici per dissoluzione farmaci con struttura chimica simile. Inoltre, la semplicità del nostro schermo di solubilità è sia un vantaggio che una limitazione; anche se è facile da eseguire, ci sono modi più tecnici e precisi per valutare sperimentalmente la solubilità di un composto all'interno della soluzione (ad esempio, la spettroscopia o metodi cromatografici). Tuttavia, la strategia di screening descritta in questo protocollo consente la selezione rapida ed efficiente delle combinazioni di SAP-AA che provocare la solubilità massima di droga e di conseguenza, il più alto potenziale attività biologica per ulteriori analisi. Come ci sono numerose formulazioni di differenti combinazioni di autoassemblanti peptide, aminoacido, aminoacido concentrazione e co-solvente, (480 totale nel nostro precedente manoscritto18), questo è un passo necessario per restringere il campo per trovare ottimale componenti per un dato farmaco. Dopo aver trovato formulazioni farmaco solubile, essi possono essere valutati per la solubilità di metodi più tecnici e devono essere ulteriormente convalidate in saggi funzionali, che valutano la sicurezza e l'attività biologica. Questi saggi funzionali dovrebbero essere adattati all'uso della droga formulata, come delineato nel nostro manoscritto ottimizzazione PP2 formulazioni18. Espandendo la nostra piattaforma su altri composti idrofobici rivelerà ulteriori tendenze e meccanismi per migliorare la solubilità e assistere nella nuova ingegneria SAPs per clinica formulazione di specifici composti idrofobici.
Consegnare il futuro del nostro metodo si trova nella pipeline di potenziale per droga, così come la capacità di essere automatizzato. Ci sono molti passi che coinvolgono pesatura polveri e liquidi, che sono i principali fattori di limitazione di tempo nel processo di formulazione di erogazione. Anche se può sembrare una procedura lunga da eseguire nelle regolazioni del laboratorio, questi passaggi possono facilmente eseguita utilizzando dispositivi robotici. Allo stesso modo, il metodo ha un grande potenziale per essere scalato in produzione commerciale con l'uso di bilance automatiche e distributori al fine di testare simultaneamente la solubilità di molti farmaci idrofobici. Questo sarebbe accelerare notevolmente la formulazione e lo screening di processi, aumentando la precisione e riducendo l'errore umano. Così, il nostro metodo di formulazione di droga costituita da combinazioni di SAP-AA è una piattaforma generalizzata per la solubilità e la consegna dei composti idrofobici e sarebbe di grande beneficio dalle tecnologie high-throughput.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Gli autori non hanno nulla a rivelare.
Acknowledgments
Questo lavoro è supportato da istituti di ricerca di salute canadese, sovvenzioni di funzionamento 42546 MOP e MOP-119514.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| EAK16-I | CanPeptide Inc. | Custom peptide | Sequence: AEAKAEAKAEAKAEAK, N-terminus acetylation and C-terminus amidation, >95% pure by HPLC |
| EAK16-II | CanPeptide Inc. | Custom peptide | Sequence: AEAEAKAKAEAEAKAK, N-terminus acetylation and C-terminus amidation, >95% pure by HPLC |
| EAK16-IV | CanPeptide Inc. | Custom peptide | Sequence: AEAEAEAEAKAKAKAK, N-terminus acetylation and C-terminus amidation, >95% pure by HPLC |
| EFK8-II | CanPeptide Inc. | Custom peptide | Sequence: FEFEFKFK, N-terminus acetylation and C-terminus amidation, >95% pure by HPLC |
| A6KE | CanPeptide Inc. | Custom peptide | Sequence: AAAAAAKE, N-terminus acetylation and C-terminus amidation, >95% pure by HPLC |
| P6KE | CanPeptide Inc. | Custom peptide | Sequence: PPPPPPPKE, N-terminus acetylation and C-terminus amidation, >95% pure by HPLC |
| Alanine | Sigma-Aldrich | A7469-100G | L-Alanine |
| Isoleucine | Sigma-Aldrich | I7403-100G | L-Isoleucine |
| Leucine | Sigma-Aldrich | L8912-100G | L-Leucine |
| Methionine | Sigma-Aldrich | M5308-100G | L-Methionine |
| Proline | Sigma-Aldrich | P5607-100G | L-Proline |
| Valine | Sigma-Aldrich | V0513-100G | L-Valine |
| Phenylalanine | Sigma-Aldrich | P5482-100G | L-Phenylalanine |
| Tryptophan | Sigma-Aldrich | T8941-100G | L-Tryptophan |
| Tyrosine | Sigma-Aldrich | T8566-100G | L-Tyrosine |
| Glycine | Sigma-Aldrich | G8790-100G | L-Glycine |
| Asparagine | Sigma-Aldrich | A4159-100G | L-Asparagine |
| Glutamine | Sigma-Aldrich | G8540-100G | L-Glutamine |
| Serine | Sigma-Aldrich | A7219-100G | L-Serine |
| Threonine | Sigma-Aldrich | T8441-100G | L-Threonine |
| Histidine | Sigma-Aldrich | H6034-100G | L-Histidine |
| Lysine | Sigma-Aldrich | L5501-100G | L-Lysine |
| Arginine | Sigma-Aldrich | A8094-100G | L-Arginine |
| Aspartic Acid | Sigma-Aldrich | A7219-100G | L-Aspartic Acid |
| Glutamic Acid | Sigma-Aldrich | G8415-100G | L-Glutamic Acid |
| Cysteine | Sigma-Aldrich | C7352-100G | L-Cysteine |
| Dimethyl Sulfoxide | Sigma-Aldrich | D4540-500ML | DMSO |
| Ethanol | Sigma-Aldrich | 277649-100ML | Anhydrous |
| Curcumin | Sigma-Aldrich | 08511-10MG | Hydrophobic drug, curcumin |
| Rottlerin | EMD Millipore | 557370-10MG | Hydrophobic drug, rottlerin |
| PP2 | Enzo | BML-EI297-0001 | Hydrophobic drug, PP2 |
| Scintillation Vials | VWR | 2650-66022-081 | Borosilicate Glass, with Screw Cap, 20 mL. Vials for weighing peptide. |
| Falcon 50 mL Conical Centrifugation Tubes | VWR | 352070 | Polypropylene, Sterile, 50 mL. For amino acid solutions. |
References
- Holmes, T. C., de Lacalle, S., Su, X., Liu, G., Rich, A., Zhang, S. Extensive neurite outgrowth and active synapse formation on self-assembling peptide scaffolds. Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 97 (12), 6728-6733 (2000).
- Davis, M. E., Motion, J. P. M., et al. Injectable self-assembling peptide nanofibers create intramyocardial microenvironments for endothelial cells. Circulation. 111 (4), 442-450 (2005).
- Matson, J. B., Stupp, S. I. Self-assembling peptide scaffolds for regenerative medicine. Chem. Commun. 48 (1), 26-33 (2012).
- Tatman, P. D., Muhonen, E. G., Wickers, S. T., Gee, A. O., Kim, E., Kim, D. Self-assembling peptides for stem cell and tissue engineering. Biomater. Sci. 4 (4), 543-554 (2016).
- Keyes-Baig, C., Duhamel, J., Fung, S. -Y., Bezaire, J., Chen, P. Self-assembling peptide as a potential carrier of hydrophobic compounds. J. Am. Chem. Soc. 126 (24), 7522-7532 (2004).
- Kumar, P., Pillay, V., Modi, G., Choonara, Y. E., du Toit, L. C., Naidoo, D. Self-assembling peptides: implications for patenting in drug delivery and tissue engineering. Recent Pat. Drug Deliv. Formul. 5 (1), 24-51 (2011).
- Wang, H., Yang, Z. Short-peptide-based molecular hydrogels: novel gelation strategies and applications for tissue engineering and drug delivery. Nanoscale. 4, 5259-5267 (2012).
- French, K. M., Somasuntharam, I., Davis, M. E. Self-assembling peptide-based delivery of therapeutics for myocardial infarction. Adv. Drug Deliv. Rev. 96, 40-53 (2016).
- Zhang, S., Holmes, T., Lockshin, C., Rich, A. Spontaneous assembly of a self-complementary oligopeptide to form a stable macroscopic membrane. Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 90 (8), 3334-3338 (1993).
- Bowerman, C. J., Nilsson, B. L. Self-assembly of amphipathic β-sheet peptides: insights and applications. Biopolymers. 98 (3), 169-184 (2012).
- Amidon, G., Lennernäs, H., Shah, V., Crison, J. A theoretical basis for a biopharmaceutic drug classification: the correlation of in vitro drug product dissolution and in vivo bioavailability. Pharm. Res. 12 (3), 413-420 (1995).
- Shi, Y., Porter, W., Merdan, T., Li, L. C. Recent advances in intravenous delivery of poorly water-soluble compounds. Expert Opin. Drug Deliv. 6 (12), 1261-1282 (2009).
- Bawa, R., Fung, S. -Y., et al. Self-assembling peptide-based nanoparticles enhance cellular delivery of the hydrophobic anticancer drug ellipticine through caveolae-dependent endocytosis. Nanomedicine. 8 (5), 647-654 (2012).
- Liu, J., Zhang, L., Yang, Z., Zhao, X. Controlled release of paclitaxel from a self-assembling peptide hydrogel formed in situ and antitumor study in vitro. Int. J. Nanomed. 6, 2143-2153 (2011).
- Wu, Y., Sadatmousavi, P., Wang, R., Lu, S., Yuan, Y., Chen, P. Self-assembling peptide-based nanoparticles enhance anticancer effect of ellipticine in vitro and in vivo. Int. J. Nanomed. 7, 3221-3233 (2012).
- Fung, S. Y., Yang, H., et al. Self-Assembling Peptide as a Potential Carrier for Hydrophobic Anticancer Drug Ellipticine: Complexation, Release and In Vitro Delivery. Adv. Funct. Mater. 19 (1), 74-83 (2009).
- Fung, S. -Y., Oyaizu, T., et al. The potential of nanoscale combinations of self-assembling peptides and amino acids of the Src tyrosine kinase inhibitor in acute lung injury therapy. Biomaterials. 32 (16), 4000-4008 (2011).
- Pacheco, S., Kanou, T., et al. Formulation of hydrophobic therapeutics with self-assembling peptide and amino acid: A new platform for intravenous drug delivery. J. Control. Release. 239, 211-222 (2016).
