Summary
이 프로토콜 자체 조립 펩타이드와 아미노산 솔루션의 조합을 사용 하는 수성 환경에서 소수 성 화합물을 녹 이기의 임상 적용 방법을 설명 합니다. 우리의 방법은 소수 치료 학, 임상 설정으로 안전 하 고 효율적 수단 가용성 및 배달 방법의 부족의 주요 한계를 해결 합니다.
Abstract
자가 조립 펩 티 드 (얼 간)는 임상 응용 프로그램; 소수 성 치료제의 배달에 대 한 유망한 차량 그들의 amphipathic 속성의 수성 환경에서 소수 성 화합물을 분해 하도록 수 있습니다. 그러나, 자가 조립 펩 티 드 솔루션은 가난한 혈액 호환성 (예를 들어, 낮은 osmolarity), 정 맥 행정을 통해 그들의 임상 응용 프로그램을 방해. 우리는 최근이 아미노산 솔루션 (SAP-AA) 약물 용 해도 향상 및 배합 osmolarity 임상 사용에 대 한 요구 사항에 도달 증가 얼 간 결합 소수 성 약물 전달에 대 한 일반화 된 플랫폼을 개발 했습니다. 이 공식 전략 3 구조적으로 다른 소수 성 화합물-PP2, rottlerin, 및 curcumin-그 다양성을 설명 하기 위하여의 맥락에서 철저 하 게 테스트 되었습니다. 또한, 우리 6 다른 얼 간, 낮은 농도에서 20 자연스럽 게 기존 아미노산 및 두 개의 서로 다른 공동 용 디 메 틸 sulfoxide (DMSO) 및 에탄올을 분석 하 여 배합 구성 요소 변경의 효과 검사 합니다. 특정된 소수 성 약물 및 공식화 억제제, PP2, 치료 기능에 대 한 구성 요소를 최적화에 효과가 입증 하는 우리의 전략은 체 외에서 그리고 vivo에서모두 관찰 되었다. 이 원고는 소수 성 화합물 및 기능적 연구에이 공식의 사용 가능성을 향한 첫 걸음으로 용 해도의 분석에 대 한 SAP-AA 조합을 사용 하 여 우리의 일반적인된 배합 방법을 설명 합니다. 우리는 소수 성 화합물, curcumin의 정립에 대 한 대표적인 용 해도 결과 포함 하 고 어떻게 우리의 방법론 미래 생물학 연구 및 질병 모델에 대 한 플랫폼 역할을 토론.
Introduction
얼 간 재생 의학1,2,,34에서 3D 공중 발판으로 광범위 하 게 연구 하는 생체 재료의 클래스는. 그러나 최근에, 그들은 있다 되었습니다 악용 치료제 때문에 그들의 독특한 생물 속성5,6,,78의 납품을 위한 차량으로. 얼 간 자연스럽 게 안정 nanostructures9, 마약 캡슐화 하 고 보호 하는 수단 제공으로 조립. 얼 간은 amphipathic, 소수 성 및 친수성 아미노산 반복, 운전의 특정 패턴의 구성 그들의 자기 조립을9,10 , 소수 성 및 친수성 사이 매체 역할을 수 있도록 환경입니다. 따라서, 소수 성 약물-임상 배달에 있는 매우 낮은 생체 이용률과 신체에 흡수 수성 환경11,12 -가용성의 부족으로 인해 얼 간은 배달 약속 차량입니다. 또한, 그들의 순서 패턴 또한 그 얼 간 합리적으로 설계 하 고 수 하 어떤 주어진 약물 호환성 최대화 또는 복합 (즉, 기능 그룹에 따라) 추가 가용성 엔지니어링을 의미 합니다.
얼 간 효과적인 마약 배달 차량 많은 생체 외에서 그리고 vivo에서 설정13,14,,1516으로 적용 되어 있다. 그들은 또한 중대 한 안전 및 생체 적합성 표시. 그러나, SAP 약물 준비의 낮은 osmolarity, 때문에 그들은 임상 설정13에서 정 맥 주사에 대 한 사용할 수 없습니다. 이 구속을 고려 하면 우리 최근 얼 간 독성 공동의 사용을 감소 하 고 배합 osmolarity 증가 아미노산 솔루션과 결합 하는 전략을 개발 했다 따라서, 임상 관련성. 우리 얼 간의 빌딩 블록으로 아미노산을 사용 하기로 이미 임상 허용, 고 얼 간와 함께, 그들은 증가 소수 성 약물의 용 해도17,18필수 SAP의 양을 줄이는.
우리는 자세히 조사 SAP AA 조합 소수 성 약물의 용 해도 및 후속 배달을 위한 일반화 된 플랫폼으로 여러 단계의 심사 파이프라인을 만들고 Src 반응 억제제, PP2 모델 소수 성 화합물으로 서 그것을 적용 하 여. 이 과정에서 우리는 정립의 구성 요소를 변경-궁극적으로 테스트 6 다른 얼 간, 2 다양 한 농도 (낮은, 높은, 낮은에 따라 기존 임상 응용 프로그램에 높은 농도에서 모두 20 아미노산의 효과 검사 농도 했다 2 배, 3 배, 또는 물에서 각 아미노산의 최대 용 해도 기반으로 하는 임상 농도 5 배), 그리고 2 다른 공동 용 매-및 추가 분석을 위해 PP2 solubilized 선택한 조합. 이 약물 배합 vivo 모델 intratracheal 및 정 맥 행정을 사용 하 여 세포 배양에 약 배달 차량으로 효과가 입증 했다. 마찬가지로, 우리의 작업 solubilizing 여러 SAP AA 조합의 다양성에 감동을; 수성 환경에서 구조적으로 다른 소수 성 화합물 특히,는 약 rottlerin 및 curcumin18. 이 원고는 SAP AA 배합 방법 및 우리의 심사 파이프라인에서 기본 단계의 예로 curcumin 가용성의 분석을 설명합니다. 이 프로토콜 어떤 주어진된 소수 성 화합물을 분해 최적의 SAP AA 조합에 대 한 화면으로 간단 하 고 재현성을 제공 합니다.
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Protocol
1. 준비의 아미노산 솔루션
- 준비 및 레이블 두 50 mL 원뿔 원심 분리기 튜브 각 아미노산에 대 한 (하나 둘 다를 위해 각 " 낮은 " 및 " 높은 " 농도).
- 순화 된 물 (18.2 ㏁ 25 ° C에서)를 포함 하는 큰 2 L 플라스 크를 준비.
- 원하는 농도 도달 (그램)에서 각 아미노산의 양을 계산 하 고 주걱을 사용 하 여 그들의 각각 50 mL 원심 분리기 튜브로 아미노산의 적절 한 금액을 무게.
: 참고는 " 높은 " 2의 농도 부정 청구 아미노산, PBS 물 대신 사용 됩니다. 우리는 그들의 낮은 물 가용성 및 낮은 pH를 유지 하기 위해 물 수 대신 PBS를 사용 하 여 그들의 농도 증가 하지 않을 수 있습니다. 또한, 농도 계산 각 아미노산 솔루션에 대 한 40 mL의 최종 볼륨을 사용 하 여 얻은 했다. 모든 아미노산 농도 표 3에 설명 되어 있습니다. 오염을 피하기 위하여 아미노산 사이 주걱을 씻어 해야 합니다. 물 린스, 70% 에탄올으로 닦아 다음 것이 좋습니다. - 순화 된 물 (PBS)의 각 50 mL에 추가 40 mL 혈 청 학적인 피 펫을 사용 하 여 튜브. 튜브와 소용돌이 닫습니다 또는 해산 때까지 적극적으로 악수. 물 목욕 쥡니다 (실내 온도, 130 W, 40 kHz) 용 해도 프로세스에 도움을 사용할 수 있습니다.
참고: 다음 아미노산 솔루션은 빛에 민감한 및 알루미늄 호 일로 덮어야 한다: 트립토판, 페닐알라닌, 티로신 (이루어져 방향족 고리 구조) 시스테인 (반응-SH 그룹).
2. SAP-AA 솔루션의 준비
- 준비 20 mL 섬광 튜브 자기 조립에 대 한 펩 티 드. 주어진된 자기 조립 펩 티 드에 대 한 준비 아미노산 솔루션 (각 조합에서에서 이루어집니다 별도 유리병) 당 한 유리병을 준비.
- 각 유리병의 바닥에 약 1 ± 0.2 mg 펩 티 드의 무게 (와 함께 한 가독성 또는 그이 하 0.1 mg까지), 높은-성능 분석 균형을 사용 하 여. 무게 후 뚜껑과 뚜껑에 펩 티 드의 정확한 무게를 기록
- 펩 티 드, 펩 티 드 (0.1 mg/mL 16 아미노산의 길이가 긴 펩 티 드 또는 0.2 mg/mL에 대 한 자기 조립의 원하는 농도 도달 하기 위하여 포함 된 각 유리병에 적절 한 양의 아미노산 솔루션 (섹션 1에서 준비 하는) 플라스틱 8 아미노산의 길이가 짧은 펩 티 드).
- 는 물 목욕 sonicator (130 W, 40 kHz) 실내 온도에, 튜브 내에서 솔루션 물 목욕에 완전히 몰입 하 보장에서 10 분 Sonicate.
3. DMSO 약물 또는 약물 에탄올 재고 솔루션의 준비
- 결합 (이 경우에는 100 %DMSO curcumin)에서 약물의 1 mg와 두 개의 재고 솔루션을 만드는 100% 에탄올과 다른 1mg.
참고: 우리는 DMSO curcumin와 에탄올 curcumin 주식 되었고 5 mg/mL 2.5 mg/mL, 각각, 각 용 매;에 있는 다양 한 가용성 때문에 DMSO와 400 µ L 에탄올의 200 µ L을 추가 그러나, 그것은 재고의 집중 관심의 소수 성 약물에 따라 조정 되어야 한다 주의 하는 것이 중요입니다. 약물 용 해도 등 효과적인 생물학 농도 요인이이 가치 결정에 중요 하다. 또한, 그 재고 것입니다 희석 약 및 50-fold DMSO와 에탄올 정립에서 각각, SAP AA 솔루션 (섹션 4 참조)와 함께 하는 마음에 계속. 공식 요구의 수에 따라 재고의 더 큰 볼륨을 준비를 선호 수 있습니다 –이 경우에, 약 1 mg 이상 사용 될 것 이라고. 주식-20 ° C에 저장 될 수 있다 얼음에 소용돌이 사용 하기 전에 해 동. - 소용돌이 15 리 바이 알 약을 완전히 분해 하는 s.
4. 약물 제형의 준비
- 준비, 1.5 mL microcentrifuge 튜브 각 배합에 대 한. 펩 티 드, 아미노산 (고 농도), 자체 조립 하는 의도를 레이블 튜브 반드시과 공동 용 매.
- 마약 DMSO 주식, 또는 적절 한 microcentrifuge 튜브 20 µ L 마약 에탄올 재고 추가 10 µ L.
- 추가 990 µ L의 SAP AA 산 성 솔루션을 적절 한 분류 마약 DMSO 주식과 마약 에탄올 주식 포함을 980 µ L을 포함 하는 microcentrifuge 튜브. 이 1 %DMSO 또는 2% 에탄올 1 mL 약물 제형 생산.
참고: 모든 curcumin 공식의 최종 농도 프로토콜에 따라 0.5 mg/mL 이었다. 다시 말하지만,이 때 달라 집니다 다른 소수 성 화합물을 사용 하 여 또는 다른 재고 농도와 시작 (단계 3.1 참조) - 30에 대 한 적극적으로 소용돌이 s 30 분 동안 휴식을 공식 허용
5. 가용성 테스트
- 휴식 기간, 소용돌이 적극적으로 한 번 다시 30 후 미
- 1 분에 대 한 14,220 x g에서 공식 원심
- 강수량 microcentrifuge 관의 하단 (시각화) 하 여 분석.
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Representative Results
소수 성 약물, curcumin에 대 한 우리 공식 증거의 원칙으로 하나의 SAP, EAK16-II와 함께에서 낮은 농도에서 아미노산을 자연스럽 게 존재 하는 모든 20를 사용 하 여 제작. 우리는 또한 공식 공동 용 매로 DMSO와 에탄올을 사용 하 여 테스트. 총에서이 각각 서로 다른 구성 요소를 포함 하는 40 curcumin 공식 생산. Src 억제제, PP2를 사용 하 여 우리의 이전 연구에 우리 SAP (6 총)와 아미노산 농도 대 한 더 많은 옵션을 포함, 주의 하는 것이 중요 하다 (임상, 높은 농도 뿐만 아니라)는 480 다른 정립의 총 생산. 이 작품에서 동향으로이 연구에 대 한 SAP EAK16 II를 선택할 때 계정에 찍은. 다양 한 부품의 농도 표 1, 표 2및 표 3 에 참조로 포함 됩니다. 모든 소수 성 약물 제형 시각화, 약물 용 해도 대 한 상영 고 가용성 솔루션은 (그림 1) 원심 분리 후 완전히 분명 어떤 침전의 경우 간주 됩니다. 약물 튜브의 바닥에 침전 물,이 비 녹는 것으로 간주 됩니다 하 고 추가 검사를 통해 이동 하지 않습니다. 또한, 용 해도 테스트 3 중에서 2 명의 다른 개인; 이러한 결과 재현할 수 없는 경우, 공식 또한 간주 되지 않습니다 진정으로 용 해 되도록.
40 제형이이 연구에서 테스트에서 7 공식 성공적으로 녹을 curcumin (표 4). 두 개의 주요 동향 확인 된 공식 구성 요소 그룹화: 에탄올 curcumin, 해산에 대 한 더 나은 공동 용 매 될 것 아미노산 리 신 (K) 긍정적으로 위탁 및 아르기닌 (R)도 녹이는 curcumin (테이블에 대 한 최적의 구성 될 것 4). R와 K, curcumin은 알칼리 성 조건 (그림 1)에 녹아 있는 공개 포함 된 공식에 대 한 색상 변화를 주의 하는 흥미 롭 군요. 이러한 관찰 하도록 다양 한 구성의 특성에 의해 그룹 정립에 도움이 됩니다.
그림 1 : 강 수 분석의 예. 펩 티 드 EAK16 II, 에탄올, 그리고 충전된 아미노산이 curcumin 정립을 위한 침전 수에서 볼 수 명확 하 게 microcentrifuge 튜브 원심 분리 후. 공식 리 (K)를 포함, 아르기닌 (R) 또는 aspartic 산 (D) 녹이는 curcumin (침전), 히스티딘 (H) 또는 글루탐산 (E)을 포함 하지 않는 반면 (침전, 빨간색에서 동그라미). 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
| 마약 | 배합 농도 (mg/mL) |
| PP2 | 0.05 |
| Curcumin | 0.05 |
| Rottlerin | 0.02 |
표 1: 공법에 사용 되는 약물의 농도. 약물 배합 농도 차이가 각각 다른 생리 활성 농도, 및 또한 다른 로드 용량을가지고 있습니다.
| 자가 조립 펩 티 드 | 속성 | 배합 농도 (mg/mL) |
| EAK16-난 | EAK 가족, 긴 | 0.1 |
| EAK16-II | EAK 가족, 긴 | 0.1 |
| EAK16-IV | EAK 가족, 긴 | 0.1 |
| EFK8-II | 수정된 EAK, 짧은 | 0.2 |
| A6KE | 계면 활성 제 처럼, 짧은 | 0.2 |
| P6KE | 계면 활성 제 처럼, 짧은 | 0.2 |
표 2: 자기 조립 공법에 사용 하는 펩 티 드의 농도. 아미노산의 추가 함께 자가 조립 펩 티 드의 단지 작은 농도 필요 (0.1-0.2 mg/mL). 더 짧은 펩 티 드 더 이상 펩 티 드 들은 절반 시퀀스 길이 (16 아미노산 대 8 아미노산)에 비해 두 배 농도입니다.
표 3: 공식에 사용 되는 아미노산 솔루션의 농도. 아미노산의 낮은 농도 각각의 기존 임상 응용에 따라 선택 되었다. 높은 농도 2 배, 3 배, 또는 물에서 각 아미노산의 최대 용 해도 임상 농도 x 5입니다. 이 그림 Pacheco 외 에서 수정 되었습니다. 18
표 4: curcumin에 대 한 대표적인 용 해도 결과. 용 해도 대 한 심사 후 curcumin을 효과적으로 해산 SAP AA 조합의 요약. 이 그림 Pacheco 외 에서 수정 되었습니다. 18
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Discussion
수립 절차에서 다양 한 중요 한 단계 및 문제 해결에 고려해 야 할 점이 있다. 첫째, 우리는 다양 한 구성 요소와 농도 일으로 프로토콜을 통해 여러 개의 소용돌이 단계 모든 농도 균일 하 고 올바른 인지 확인 합니다. 고 농도, 소수 성 아미노산 솔루션의 일부 수 있습니다 여전히 하지 완전히 용 해 vortexing, 후 고이 경우에, 그들은 과정에서 도움을 손으로 적극적으로 흔들릴 수 있습니다. 마찬가지로, 그것은 필수 SAP AA 솔루션 얼 간 자연스럽 게 하는 경향이 단계 2.4에서에서 설명한 쥡니다 단계 받아야 집계 및 쥡니다 분할 SAP 클러스터, 더 획 일 한 해결책에 따라서 결과에 도움이 될 것입니다. 둘째, 주어진된 소수 성 약물에 대 한 재고 및 SAP AA 공식 내에서 최종 농도 생물 학적 설정에서 화합물의 효과적인 농도에 달려 있어야 한다. 프로토콜이 활성 농도 맞게 적절 하 게 수정 한다. 또한, 마약 적재 능력은 또한 고려; 하는 중요 한 요소 그것은 각 약물이이 전략을 사용 하 여 독특한 로드 용량 해야한다 고 호환성에 따라 각 SAP AA 조합 약의 다른 금액을 지원할 수 있습니다. 이 특정된 화합물에 대 한 최적의 SAP AA 조합의 찾을 심사의 중요성을 보여 줍니다.
다른 사람; 우리의 기술을 사용 하 여 장점이 많습니다. 좀 더 구체적으로, 화합물의 캡슐화 및 잠재적인 배달 얼 간만을 사용 하 여 기존의 방법에 큰 의미가 있다. 앞에서 설명 했 듯이, 아미노산은 이미 임상-허용 하 고 임상 시나리오에서 정 맥 주사는 가능한 같은 hemolytic 활동 감소 osmolarity 증가 이러한 솔루션 SAP 정립에 추가. 우리는 또한 그들은 크게 얼 간만 해도17,18에 대 한 충분 하지 않은 경우에 소수 성 컴파운드 용 해도 증가 발견. 얼 간과 관련 된 아미노산의 여러 다른 조합을 화면 소수 성 약물의 용 해도 높은 처리량 방법으로 확장 할 수 있습니다. 용 해도 데이터 동향;을 자세히 분석할 수 있습니다. 우리 공식 구성 요소 (SAP 또는 아미노산)에서 결과 정렬 패턴 각 소수 성 약물에 대 한 고유 것을 보여주는 것으로 나타났습니다. 예를 들어, 긍정적으로 위탁된 한 아미노산 우리의 이전 연구 부정 청구 아미노산 PP218에 대 한 더 나은 그 나타났다 반면 curcumin (그림 1)의 용 해도 향상 시킵니다. 이러한 동향 화학 구조가 유사한 녹이는 약물에 대 한 특정 부품의 적합성을 확인할 수 있습니다. 또한, 우리의 용 해도 스크린의 단순은 이점 및 제한; 비록 그것이 실행 하기 쉬운, 솔루션 (예를 들어, 분광학 또는 크로마 방법) 화합물의 용 해도 실험적으로 평가 하 더 기술 하 고 정확한 방법이 있다. 그러나,이 프로토콜에 명시 된 심사 전략 SAP AA 조합 높은 약물 용 해도에 따라, 추가 분석에 대 한 가장 높은 잠재적인 생물학적 활동 결과의 신속 하 고 효율적인 선택 수 있습니다. 수많은 공식으로 펩 티 드, 아미노산, 아미노산 농도 및 공동 용 매, (우리의 이전 원고18에 총 480) 자기 조립의 서로 다른 조합, 이것은 최적의 찾을 수 축소에 대 한 필요한 단계 특정된 약물에 대 한 구성 요소입니다. 수용 성 약물 제형을 찾는, 후 그들은 가용성에 대 한 더 많은 기술적인 방법으로 평가 될 수 있다 고 생물 활성 및 안전 평가 기능 분석에서 더 확인 되어야 합니다. 이러한 기능 분석 해야 지 어질 공식화 약물의 용도를 PP2 공식18최적화 우리의 원고에 명시 된 대로. 다른 소수 성 화합물에 대 한 우리의 플랫폼을 확대 추가 동향 및 가용성, 향상을 위한 메커니즘을 공개 하 고 특정 소수 성 화합물의 임상 배합에 대 한 엔지니어링 새 얼 간 지원 것입니다.
마약에 대 한 잠재적인 파이프라인에 우리의 방법 거짓말의 미래 자동화 하는 기능 뿐만 아니라 제공 합니다. 분말 무게 및 분배는 중요 요인이 시간 제한 정립 과정에서 액체를 포함 하는 많은 단계가 있습니다. 그것은 실험실 설정에서 수행 하는 긴 절차 처럼 보일 수 있습니다, 있지만이 단계 수 쉽게 로봇 장치를 사용 하 여 수행 합니다. 마찬가지로, 메서드를 사용 하면 동시에 많은 소수 성 약물의 용 해도 테스트 하기 위해 자동된 저울과 디스펜서의 사용과 상업 생산으로 확장 될 수 큰 잠재력이 있다. 이 크게 정립 및 정확도 증가 하 고 인간의 오류를 감소 하는 동안 프로세스를 심사를 속도 것입니다. 따라서, SAP AA 조합으로 구성 된 우리의 약물 배합 방법은 용 해도 및 소수 성 화합물의 배달에 대 한 일반화 된 플랫폼 이며 크게 높은 처리량 기술 로부터 혜택을 것 이다.
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Disclosures
저자는 공개 없다.
Acknowledgments
이 작품은 건강 연구의 캐나다 학회에 의해 지원 하 고, 걸 레-42546 및 걸 레 119514 부여 운영 합니다.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| EAK16-I | CanPeptide Inc. | Custom peptide | Sequence: AEAKAEAKAEAKAEAK, N-terminus acetylation and C-terminus amidation, >95% pure by HPLC |
| EAK16-II | CanPeptide Inc. | Custom peptide | Sequence: AEAEAKAKAEAEAKAK, N-terminus acetylation and C-terminus amidation, >95% pure by HPLC |
| EAK16-IV | CanPeptide Inc. | Custom peptide | Sequence: AEAEAEAEAKAKAKAK, N-terminus acetylation and C-terminus amidation, >95% pure by HPLC |
| EFK8-II | CanPeptide Inc. | Custom peptide | Sequence: FEFEFKFK, N-terminus acetylation and C-terminus amidation, >95% pure by HPLC |
| A6KE | CanPeptide Inc. | Custom peptide | Sequence: AAAAAAKE, N-terminus acetylation and C-terminus amidation, >95% pure by HPLC |
| P6KE | CanPeptide Inc. | Custom peptide | Sequence: PPPPPPPKE, N-terminus acetylation and C-terminus amidation, >95% pure by HPLC |
| Alanine | Sigma-Aldrich | A7469-100G | L-Alanine |
| Isoleucine | Sigma-Aldrich | I7403-100G | L-Isoleucine |
| Leucine | Sigma-Aldrich | L8912-100G | L-Leucine |
| Methionine | Sigma-Aldrich | M5308-100G | L-Methionine |
| Proline | Sigma-Aldrich | P5607-100G | L-Proline |
| Valine | Sigma-Aldrich | V0513-100G | L-Valine |
| Phenylalanine | Sigma-Aldrich | P5482-100G | L-Phenylalanine |
| Tryptophan | Sigma-Aldrich | T8941-100G | L-Tryptophan |
| Tyrosine | Sigma-Aldrich | T8566-100G | L-Tyrosine |
| Glycine | Sigma-Aldrich | G8790-100G | L-Glycine |
| Asparagine | Sigma-Aldrich | A4159-100G | L-Asparagine |
| Glutamine | Sigma-Aldrich | G8540-100G | L-Glutamine |
| Serine | Sigma-Aldrich | A7219-100G | L-Serine |
| Threonine | Sigma-Aldrich | T8441-100G | L-Threonine |
| Histidine | Sigma-Aldrich | H6034-100G | L-Histidine |
| Lysine | Sigma-Aldrich | L5501-100G | L-Lysine |
| Arginine | Sigma-Aldrich | A8094-100G | L-Arginine |
| Aspartic Acid | Sigma-Aldrich | A7219-100G | L-Aspartic Acid |
| Glutamic Acid | Sigma-Aldrich | G8415-100G | L-Glutamic Acid |
| Cysteine | Sigma-Aldrich | C7352-100G | L-Cysteine |
| Dimethyl Sulfoxide | Sigma-Aldrich | D4540-500ML | DMSO |
| Ethanol | Sigma-Aldrich | 277649-100ML | Anhydrous |
| Curcumin | Sigma-Aldrich | 08511-10MG | Hydrophobic drug, curcumin |
| Rottlerin | EMD Millipore | 557370-10MG | Hydrophobic drug, rottlerin |
| PP2 | Enzo | BML-EI297-0001 | Hydrophobic drug, PP2 |
| Scintillation Vials | VWR | 2650-66022-081 | Borosilicate Glass, with Screw Cap, 20 mL. Vials for weighing peptide. |
| Falcon 50 mL Conical Centrifugation Tubes | VWR | 352070 | Polypropylene, Sterile, 50 mL. For amino acid solutions. |
References
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