Summary
Этот протокол описывает клинически применимые средства растворения гидрофобные соединений в водной среде, с использованием комбинаций самостоятельной сборки решения пептиды и аминокислоты. Наш метод устраняет ограничение основных гидрофобные терапии, которой не хватает безопасных, эффективных средств методов растворимости и доставки в клинических условиях.
Abstract
Самостоятельной сборки пептидов (ПСП), перспективных транспортных средств для доставки гидрофобные терапии для клинического применения; их свойства амфифильными позволяют им растворить гидрофобные соединений в водной среде человеческого тела. Однако, самостоятельной сборки пептид решения имеют плохой крови совместимости (например, низкой осмолярности), препятствуя их клинического применения посредством внутривенного администраций. Мы недавно разработали обобщенное платформу для доставки гидрофобный препарат, который сочетает в себе ПСП с решениями аминокислоты (SAP-AA) для повышения растворимости наркотиков и повышения осмолярности формулировки для достижения требований для клинического использования. Эта формулировка стратегия была тщательно протестирована в ходе трех структурно отличается гидрофобными соединений – РР2, rottlerin и куркумин – для того, чтобы продемонстрировать его универсальность. Кроме того мы изучили эффекты изменения компонентов рецептуры, анализируя 6 различных ПСП, 20 естественно существующих аминокислот при низких и высоких концентрациях и два разных совместно растворителей диметилсульфоксида (ДМСО) и этанола. Наша стратегия оказалась эффективной оптимизации компонентов для данного гидрофобный препарат и лечебные функции сформулированы ингибитора, РР2, было отмечено, в пробирке и в естественных условиях. Эта рукопись излагаются наши обобщенной формулировки метод, с помощью комбинации SAP-AA для гидрофобных соединений и анализа растворимости в качестве первого шага на пути к возможности использования этих формулировок в более функциональных исследований. Мы включить представителя растворимость результаты для разработки гидрофобные составные, куркумин и обсудить, как наша методология служит в качестве платформы для будущих биологических исследований и модели заболеванием.
Introduction
ПСП являются класс биоматериалов, которые были изучены широко, как 3D леса в регенеративной медицине1,2,3,4. Совсем недавно однако, они были вовлечены в качестве транспортных средств для доставки терапии из-за их уникальных биологических свойств5,6,,78. ПСП естественно собрать в стабильной наноструктур9, обеспечивая тем самым средства инкапсуляции наркотиков и защиты. ПСП являются амфифильными, состоящая из определенный шаблон повторяется гидрофильные и гидрофобные аминокислоты, вождение их самостоятельной сборки9,10 и позволяя им служить средством между гидрофобных и гидрофильных среды. Следовательно, для клинических доставки гидрофобные наркотиков –, которые имеют крайне низкий биодоступность и поглощения в организме из-за отсутствия растворимость в водной среде11,12 – ПСП являются многообещающими как доставки транспортное средство. Кроме того их последовательность шаблон также подразумевает, что ПСП можно рационально разработан и спроектирован для максимальной совместимости с любого данного препарата или соединения (т.е., на основе функциональных групп) и дальнейшего содействия растворимость.
ПСП применялись как эффективный препарат доставки в многих in vitro и in vivo параметры13,14,,1516. Они также показали большую безопасность и биосовместимостью. Однако из-за низкой осмолярности SAP-лекарственных препаратов, они не могут использоваться для внутривенных инъекций как клинические параметры13. Учитывая эту сдержанность, мы недавно разработали стратегию, которая сочетает в себе ПСП аминокислоты решения для снижения использования токсичных растворителей сотрудничества и повышение осмолярности формулировку и таким образом, клиническое значение. Мы решили использовать аминокислоты, как они являются строительными блоками ПСП, уже клинически принято, и в сочетании с ПСП, они увеличивают гидрофобный препарат растворимость в то время как сокращение объема SAP требуется17,18.
Мы изучили SAP-AA комбинации как обобщенная платформа для гидрофобный препарат растворимости и последующей доставки путем создания многоступенчатого отбора трубопровода и его применения к Src ингибитор, РР2, как модель гидрофобные соединение. В этом процессе мы исследовали эффект изменения компонентов рецептуры — в конечном итоге испытания 6 различных ПСП, все 20 аминокислот в 2 различных концентрациях (низкие и высокие; низкий на основе концентрации в существующих клинических приложений и высокая концентрации были 2 x, 3 x или 5 x клинических концентрации на основе максимальной растворимость каждого амино кислоты в воде) и 2 совместно Растворители разные – и выбранных комбинаций, которые солюбилизирован PP2 для дальнейшего анализа. Эта формулировка наркотиков оказалось эффективным как средство доставки наркотиков в культуре клеток, а также в естественных условиях модели с помощью администраций трахею и внутривенно. Кроме того, наша работа коснулся универсальность SAP-AA комбинаций в растворяющие несколько, структурно различные гидрофобные соединений в водной среде; в частности, препараты rottlerin и куркумин18. Эта рукопись излагается метод разработки SAP-AA и анализ куркумин растворимость в качестве примера основной шаг в нашем скрининг трубопровода. Этот протокол обеспечивает простой, воспроизводимые пути к экрану для оптимальных комбинаций SAP-AA, которые растворить любого заданного гидрофобные соединения.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
1. Подготовка аминокислоты решения
- подготовить и лейбл два 50 мл конические пробирок для каждой аминокислоты (один для обоих " низкой " и " высокой " концентрации).
- Подготовить большой настой 2 Л, содержащие очищенная вода (18,2 MΩ·cm при 25 ° C).
- Рассчитать сумму каждой аминокислоты (в граммах) для достижения желаемой концентрации и весят соответствующее количество аминокислот в их соответствующих 50 мл пробирок с помощью шпателя.
Примечание: Для " высокой " концентрации двух отрицательно заряженные аминокислоты, вместо воды используется PBS. Мы не могли бы увеличить их концентрации из-за их низкой растворимостью в воде и с помощью PBS вместо воды помогает поддерживать низкий рН. Кроме того концентрация расчеты были получены с помощью окончательный объем 40 мл для решения каждой аминокислоты. Все концентрации аминокислот, изложены в таблице 3. Не забудьте промыть шпателем между аминокислоты, чтобы избежать загрязнения. Мы рекомендуем промыть водой, после чего вытирая с 70% этанол. - Добавить 40 мл очищенной воды (или PBS) в каждую пробирку 50 мл с помощью Серологические Пипетки. Крышка трубки и вихревой или встряхнуть до растворения. Sonication ванна воды (комнатной температуры, 130 Вт, 40 кГц) может также использоваться для оказания помощи в процессе растворимость.
Примечание: Следующие решения амино кислоты чувствительны к свету и должна быть покрыта алюминиевой фольгой: триптофан, фенилаланин и тирозина (которые состоят из ароматических кольцо подобных структур) и хвоща (реактивной - SH группе).
2. Подготовка решений SAP-АА
- подготовить 20 мл сцинтилляционные флаконы для самостоятельной сборки пептиды. Для самостоятельной сборки данного пептид, подготовить один флакон за подготовленные амино кислоты раствор (каждая комбинация будет производиться в отдельном флаконе).
- С помощью аналитического баланса высокой производительности (с читаемость вплоть до 0,1 мг или меньше), весят примерно 1 ± 0,2 мг пептида в нижней части каждого флакона. Крышка после взвешивания и запишите точный вес пептида на гл
- Пипетка соответствующий объем раствора аминокислоты (подготовлен в разделе 1) в каждый флакон, содержащий пептид, с тем чтобы достичь желаемой концентрации самостоятельной сборки пептида (0,1 мг/мл для длительного пептиды длиной 16 аминокислот, или 0,2 мг/мл для более короткие пептиды длиной 8 аминокислот).
- Sonicate для 10 минут в воду Ванна sonicator (130 Вт, 40 кГц) при комнатной температуре, обеспечение решения внутри флакона полностью погружен в водяной бане.
3. Подготовка наркотиков-ДМСО или растворы наркотиков-этанола фондовая
- жатки 1 мг препарата (в данном случае, куркумин с 100% ДМСО) и еще 1 мг с 100% этанола для создания двух акций решений.
Примечание: Мы добавили 200 мкл ДМСО и 400 мкл этанола сделать ДМСО куркумин и этанол куркумин запасов, которые были 5 мг/мл и 2,5 мг/мл, соответственно, из-за различной растворимостью в каждом растворителя; Однако важно отметить, что концентрация запасов должны быть скорректированы в зависимости от гидрофобного препарата интерес. Такие факторы, как растворимость наркотиков и эффективная концентрация биологического важную роль в определении этого значения. Кроме того Имейте в виду, что запасы будут разбавлять 100 раз и 50-fold ДМСО и этанола формулировки, соответственно, в сочетании с решениями SAP-AA (см. раздел 4). Он может предпочитают готовить больший объем запасов в зависимости от количества составов требуется – в этом случае, будут использоваться более чем в 1 мг препарата. Запасы могут храниться при температуре-20 ° C; Оттепель на льду и вихревой перед использованием. - Vortex флаконы для 15 s до полного растворения препарата.
4. Подготовка составов наркотиков
- подготовить четкие, 1,5 мл microcentrifuge трубы для каждой разработки. Будьте уверены, чтобы метки трубы с предполагаемой самостоятельной сборки, пептиды, аминокислоты (и концентрации) и совместного растворителя.
- Добавить 10 мкл препарата-ДМСО акций, или 20 мкл препарата-этанол акций соответствующие microcentrifuge трубы.
- Добавить 990 мкл кислоты решений SAP-AA на соответствующий помечены microcentrifuge пробирки, содержащие наркотиков-ДМСО фондовых и 980 мкл тем, содержащие запасов наркотиков-этанола. Это производит 1 мл препарата составов с 1% ДМСО или 2% этанола.
Примечание: Конечная концентрация всех составов куркумин был 0.5 мг/мл по протоколу. Опять же, это будет меняться, когда начиная с различных фондовых концентрации или пользуясь других соединений, гидрофобностью (см. шаг 3.1) - Vortex энергично для 30 s и позволяют составов на отдых в течение 30 мин
5. растворимость тестирование
- после периода отдыха, вихревой энергично еще раз для 30 s.
- Центрифуга для формулировки на 14,220 x g за 1 мин
- Анализировать в нижней части трубы microcentrifuge осадков (визуализация).
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Для гидрофобного препарата, куркумин, мы подготовили составов, с использованием всех 20, естественно существующих аминокислоты при низких концентрациях, в сочетании с только одним SAP, EAK16-II, как доказательство принципа. Мы также протестировали составов, используя ДМСО и этанола в качестве совместного растворителей. В общем это произвело 40 составов, куркумин, каждая из которых содержит различные компоненты. Важно отметить, что, в наших предыдущих исследований с использованием ингибитора Src, РР2, мы включили больше вариантов для SAP (всего 6) и концентрация аминокислот (клинические, а также более высокой концентрации), которая подготовила в общей сложности 480 различных формулировок. Тенденции от этой работы были приняты во внимание при выборе EAK16-II как SAP для этого исследования. Концентраций различных компонентов включены в таблице 1, в таблице 2и таблице 3 в качестве ссылки. Все составы гидрофобный препарат экранируется визуализации для растворимости препарата и считается растворимые, если решение совершенно ясно из любой осадок после центрифугирования (рис. 1). Если препарат осаждает в нижней части трубки, это считается нерастворимых и не пройти через дальнейшего тестирования. Кроме того растворимость испытывается в трех экземплярах и двумя различными лицами; Если эти результаты не являются воспроизводимость, формулировки также не считаются действительно растворимые.
Из 40 формулировки, протестированы в этом исследовании 7 формулировки успешно распущен куркумин (Таблица 4). Группирование компонентов составов определены две основные тенденции: этанол, кажется лучше совместного растворителя для растворения куркумин и положительно заряженных аминокислоты лизин (K) и аргинина (R) также, похоже, оптимальные компоненты для растворения куркумин (таблицы 4). это интересно отметить изменение цвета для составы, содержащие R и K, которые показывают, куркумин растворяется в щелочной среде (рис. 1). Это полезно для группы формулировок путем размещения различных компонентов сделать такие замечания.
Рисунок 1 : Пример анализа осадков. Для этих куркумин составы, содержащие пептидные EAK16-II, этанола и заряженных аминокислоты осадок четко прослеживается в microcentrifuge трубы после центрифугирования. Составы, содержащие лизина (K), аргинин (R) или аспарагиновой кислоты (D) растворяют куркумин (не осадок), тогда как те, которые содержат гистидина (H) или глутаминовой кислоты (E) не (осадок, кружил в красный цвет). Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.
| Препарат | Разработка концентрация (мг/мл) |
| РР2 | 0.05 |
| Куркумин | 0.05 |
| Rottlerin | 0.02 |
Таблица 1: Концентрации препаратов, используемых в рецептурах. Концентрации наркотиков формулировка отличаются у каждого разные биоактивные концентрации, а также различных загрузки мощностей.
| Самостоятельной сборки пептида | Свойства | Разработка концентрация (мг/мл) |
| EAK16-Я | ЕАК семьи, длинные | 0.1 |
| EAK16-II | ЕАК семьи, длинные | 0.1 |
| EAK16-IV | ЕАК семьи, длинные | 0.1 |
| EFK8-II | Изменение ЕАК, короткие | 0.2 |
| A6KE | ПАВ как, короткие | 0.2 |
| P6KE | ПАВ как, короткие | 0.2 |
Таблица 2: концентрация самостоятельной сборки пептиды, используемые в рецептурах. С добавлением аминокислот, требуются только в малых концентрациях самостоятельной сборки пептида (0,1-0,2 мг/мл). Более короткие пептиды являются двойной концентрации по сравнению с более пептиды, поскольку они имеют половину длины последовательности (8 аминокислот по сравнению с 16 аминокислот).
Таблица 3: концентрация аминокислотных растворов, используемых в рецептурах. Низкие концентрации аминокислот были выбраны на основании существующих клинических приложений каждого. Высокие концентрации, 2 x, 3 x, или 5 x клинических концентрации и в течение максимум растворимости каждой аминокислоты в воде. Этот рисунок был изменен с Пачеко и др. 18
Таблица 4: представитель растворимость результаты куркумин. Краткое изложение комбинаций SAP-AA, которые эффективно растворяют куркумин после скрининга для растворимости. Этот рисунок был изменен с Пачеко и др. 18
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
В разработке процедуры существуют различные важные шаги и вопросы для рассмотрения в устранении неполадок. Во-первых как мы работаем с различными компонентами и концентрации, несколько шагов вихря на протяжении протокола обеспечить все концентрации единообразных и правильно. Некоторые из решений высокой концентрации, гидрофобные аминокислоты до сих пор не может быть распущен полностью после vortexing, и в этом случае, они могут быть поколеблен энергично вручную для оказания помощи в процессе. Кроме того, важно, что решения SAP-AA проходят sonication шаг, описанные в шаге 2.4 как ПСП естественно склонны агрегата и sonication поможет фрагментации SAP блоков, что приводит к более единообразное решение. Во-вторых для данного гидрофобного препарата, фондовой и окончательный концентрации в SAP-AA формулировки должны зависеть эффективной концентрации, что соединения в биологических параметров. Протокол следует изменить соответствующим образом отразить этот активные концентрации. Кроме того препарат, грузоподъемность является также важным фактором для рассмотрения; вполне вероятно, что каждый препарат будет иметь уникальный грузоподъемность, используя эту стратегию, и что каждая комбинация SAP-AA может поддерживать различные количество наркотиков, основанный на совместимости. Это свидетельствует о важности проверки найти оптимальное сочетание SAP-AA для данного соединения.
Существует ряд преимуществ для нашей методике над другими; Говоря более конкретно существует большое значение над традиционным методом использования ПСП только для инкапсуляции и потенциал доставки соединения. Как упоминалось ранее, аминокислоты уже клинически принимаются и добавление этих решений SAP формулировки увеличивает осмолярности уменьшить гемолитической активности, что внутривенные инъекции в клинических ситуациях возможны. Мы также обнаружили, что они значительно увеличивают гидрофобные составные растворимость в тех случаях, когда ПСП одиночку недостаточно для растворимости17,18. Несколько различных комбинаций ПСП и аминокислоты участвуют позволяет для расширения в высок объём метод экран для гидрофобных наркотиков растворимость. Растворимость данные могут быть проанализированы в деталях для выявления трендов; Мы нашли, что сортировка результатов по разработке компонента (SAP или аминокислоты) показывает шаблон могут быть уникальными для каждого гидрофобного препарата. В качестве примера положительно заряженных аминокислоты улучшения растворимости куркумин (рис. 1), в то время как наши предыдущие исследования показали, что отрицательно заряженных аминокислоты лучше для PP218. Эти тенденции могут помочь определить пригодность отдельных компонентов для растворения наркотиков с аналогичной химической структурой. Кроме того простота нашего экрана растворимости является преимуществом и ограничения; Хотя это легко выполнять, существует более технической и точных способов экспериментально оценить растворимость соединения в пределах решения (например, спектроскопия или Хроматографические методы). Однако стратегия отбора, изложенные в настоящем Протоколе позволяет для быстрого и эффективного отбора комбинации SAP-AA, которые приводят к высокой растворимости наркотиков и, соответственно, высокой потенциальной биологической активности для дальнейшего анализа. Как есть много формулировок различных комбинаций самостоятельной сборки, пептиды, аминокислоты, амино кислоты концентрации и совместного растворителя, (480 всего в наших предыдущих рукопись18), это является необходимым шагом для сужения найти оптимальное компоненты данного препарата. После нахождения растворимый препарат рецептуры, они могут оцениваться более технических методов для растворимости и далее должно проверяться в функциональных анализов, которые оценки биологической активности и безопасности. Эти функциональные анализы должно быть приспособлено для предполагаемого использования разработанных препарата, как указано в нашем рукописи, оптимизации PP2 формулировки18. Расширение нашей платформы на других соединений, гидрофобностью выявить дополнительные тенденции и механизмы для повышения растворимости и помочь в инженерных новых ПСП для клинической разработке конкретных соединений, гидрофобностью.
Будущее нашего метода заключается в конвейере потенциальных наркотиков доставить, а также его способность быть автоматизированы. Есть много шагов, которые включают взвешивания порошков и дозирования жидкостей, которые являются основными факторами ограничения времени в процессе разработки. Хотя это может показаться как длительные процедуры для выполнения в лабораторных условиях, эти шаги могут легко выполнить с помощью роботизированных устройств. Аналогично метод имеет большой потенциал, чтобы быть расширены в коммерческое производство с использованием автоматических весов и дозаторов для того, чтобы одновременно проверить растворимость многих гидрофобные препаратов. Это значительно ускорит разработки и отбора процессов, при одновременном повышении точности и сокращение человеческой ошибки. Таким образом наш метод разработки наркотиков, состоящих из комбинаций SAP-AA — это обобщенный платформа для растворимости и доставки соединений, гидрофобностью и значительно выиграют от высокопроизводительных технологий.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Авторы не имеют ничего сообщать.
Acknowledgments
Эта работа поддерживается канадской институты здравоохранения исследований, действующих грантов СС-42546 и СС-119514.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| EAK16-I | CanPeptide Inc. | Custom peptide | Sequence: AEAKAEAKAEAKAEAK, N-terminus acetylation and C-terminus amidation, >95% pure by HPLC |
| EAK16-II | CanPeptide Inc. | Custom peptide | Sequence: AEAEAKAKAEAEAKAK, N-terminus acetylation and C-terminus amidation, >95% pure by HPLC |
| EAK16-IV | CanPeptide Inc. | Custom peptide | Sequence: AEAEAEAEAKAKAKAK, N-terminus acetylation and C-terminus amidation, >95% pure by HPLC |
| EFK8-II | CanPeptide Inc. | Custom peptide | Sequence: FEFEFKFK, N-terminus acetylation and C-terminus amidation, >95% pure by HPLC |
| A6KE | CanPeptide Inc. | Custom peptide | Sequence: AAAAAAKE, N-terminus acetylation and C-terminus amidation, >95% pure by HPLC |
| P6KE | CanPeptide Inc. | Custom peptide | Sequence: PPPPPPPKE, N-terminus acetylation and C-terminus amidation, >95% pure by HPLC |
| Alanine | Sigma-Aldrich | A7469-100G | L-Alanine |
| Isoleucine | Sigma-Aldrich | I7403-100G | L-Isoleucine |
| Leucine | Sigma-Aldrich | L8912-100G | L-Leucine |
| Methionine | Sigma-Aldrich | M5308-100G | L-Methionine |
| Proline | Sigma-Aldrich | P5607-100G | L-Proline |
| Valine | Sigma-Aldrich | V0513-100G | L-Valine |
| Phenylalanine | Sigma-Aldrich | P5482-100G | L-Phenylalanine |
| Tryptophan | Sigma-Aldrich | T8941-100G | L-Tryptophan |
| Tyrosine | Sigma-Aldrich | T8566-100G | L-Tyrosine |
| Glycine | Sigma-Aldrich | G8790-100G | L-Glycine |
| Asparagine | Sigma-Aldrich | A4159-100G | L-Asparagine |
| Glutamine | Sigma-Aldrich | G8540-100G | L-Glutamine |
| Serine | Sigma-Aldrich | A7219-100G | L-Serine |
| Threonine | Sigma-Aldrich | T8441-100G | L-Threonine |
| Histidine | Sigma-Aldrich | H6034-100G | L-Histidine |
| Lysine | Sigma-Aldrich | L5501-100G | L-Lysine |
| Arginine | Sigma-Aldrich | A8094-100G | L-Arginine |
| Aspartic Acid | Sigma-Aldrich | A7219-100G | L-Aspartic Acid |
| Glutamic Acid | Sigma-Aldrich | G8415-100G | L-Glutamic Acid |
| Cysteine | Sigma-Aldrich | C7352-100G | L-Cysteine |
| Dimethyl Sulfoxide | Sigma-Aldrich | D4540-500ML | DMSO |
| Ethanol | Sigma-Aldrich | 277649-100ML | Anhydrous |
| Curcumin | Sigma-Aldrich | 08511-10MG | Hydrophobic drug, curcumin |
| Rottlerin | EMD Millipore | 557370-10MG | Hydrophobic drug, rottlerin |
| PP2 | Enzo | BML-EI297-0001 | Hydrophobic drug, PP2 |
| Scintillation Vials | VWR | 2650-66022-081 | Borosilicate Glass, with Screw Cap, 20 mL. Vials for weighing peptide. |
| Falcon 50 mL Conical Centrifugation Tubes | VWR | 352070 | Polypropylene, Sterile, 50 mL. For amino acid solutions. |
References
- Holmes, T. C., de Lacalle, S., Su, X., Liu, G., Rich, A., Zhang, S. Extensive neurite outgrowth and active synapse formation on self-assembling peptide scaffolds. Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 97 (12), 6728-6733 (2000).
- Davis, M. E., Motion, J. P. M., et al. Injectable self-assembling peptide nanofibers create intramyocardial microenvironments for endothelial cells. Circulation. 111 (4), 442-450 (2005).
- Matson, J. B., Stupp, S. I. Self-assembling peptide scaffolds for regenerative medicine. Chem. Commun. 48 (1), 26-33 (2012).
- Tatman, P. D., Muhonen, E. G., Wickers, S. T., Gee, A. O., Kim, E., Kim, D. Self-assembling peptides for stem cell and tissue engineering. Biomater. Sci. 4 (4), 543-554 (2016).
- Keyes-Baig, C., Duhamel, J., Fung, S. -Y., Bezaire, J., Chen, P. Self-assembling peptide as a potential carrier of hydrophobic compounds. J. Am. Chem. Soc. 126 (24), 7522-7532 (2004).
- Kumar, P., Pillay, V., Modi, G., Choonara, Y. E., du Toit, L. C., Naidoo, D. Self-assembling peptides: implications for patenting in drug delivery and tissue engineering. Recent Pat. Drug Deliv. Formul. 5 (1), 24-51 (2011).
- Wang, H., Yang, Z. Short-peptide-based molecular hydrogels: novel gelation strategies and applications for tissue engineering and drug delivery. Nanoscale. 4, 5259-5267 (2012).
- French, K. M., Somasuntharam, I., Davis, M. E. Self-assembling peptide-based delivery of therapeutics for myocardial infarction. Adv. Drug Deliv. Rev. 96, 40-53 (2016).
- Zhang, S., Holmes, T., Lockshin, C., Rich, A. Spontaneous assembly of a self-complementary oligopeptide to form a stable macroscopic membrane. Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 90 (8), 3334-3338 (1993).
- Bowerman, C. J., Nilsson, B. L. Self-assembly of amphipathic β-sheet peptides: insights and applications. Biopolymers. 98 (3), 169-184 (2012).
- Amidon, G., Lennernäs, H., Shah, V., Crison, J. A theoretical basis for a biopharmaceutic drug classification: the correlation of in vitro drug product dissolution and in vivo bioavailability. Pharm. Res. 12 (3), 413-420 (1995).
- Shi, Y., Porter, W., Merdan, T., Li, L. C. Recent advances in intravenous delivery of poorly water-soluble compounds. Expert Opin. Drug Deliv. 6 (12), 1261-1282 (2009).
- Bawa, R., Fung, S. -Y., et al. Self-assembling peptide-based nanoparticles enhance cellular delivery of the hydrophobic anticancer drug ellipticine through caveolae-dependent endocytosis. Nanomedicine. 8 (5), 647-654 (2012).
- Liu, J., Zhang, L., Yang, Z., Zhao, X. Controlled release of paclitaxel from a self-assembling peptide hydrogel formed in situ and antitumor study in vitro. Int. J. Nanomed. 6, 2143-2153 (2011).
- Wu, Y., Sadatmousavi, P., Wang, R., Lu, S., Yuan, Y., Chen, P. Self-assembling peptide-based nanoparticles enhance anticancer effect of ellipticine in vitro and in vivo. Int. J. Nanomed. 7, 3221-3233 (2012).
- Fung, S. Y., Yang, H., et al. Self-Assembling Peptide as a Potential Carrier for Hydrophobic Anticancer Drug Ellipticine: Complexation, Release and In Vitro Delivery. Adv. Funct. Mater. 19 (1), 74-83 (2009).
- Fung, S. -Y., Oyaizu, T., et al. The potential of nanoscale combinations of self-assembling peptides and amino acids of the Src tyrosine kinase inhibitor in acute lung injury therapy. Biomaterials. 32 (16), 4000-4008 (2011).
- Pacheco, S., Kanou, T., et al. Formulation of hydrophobic therapeutics with self-assembling peptide and amino acid: A new platform for intravenous drug delivery. J. Control. Release. 239, 211-222 (2016).
