Summary

Vorbereitung des DMMTAV und DMDTAV mit DMAV für Umweltanwendungen: Synthese, Reinigung und Bestätigung

Published: March 09, 2018
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Summary

Dieser Artikel stellt veränderte experimentelle Protokolle für Dimethylmonothioarsinic Säure (DMMTAV) und Dimethyldithioarsinic Säure (DMDTAV) Synthese, induzieren Dimethylarsinic Säure (DMAV) Thiolation durch Mischen von DMAV , Na2S und H2SO4. Das geänderte Protokoll sieht eine experimentelle Richtlinie, damit Überwindung der Einschränkungen der Synthese-Schritte, die in der quantitativen Analyse experimenteller Fehler verursacht haben könnte.

Abstract

Dimethylated Thioarsenicals wie Dimethylmonothioarsinic Säure (DMMTAV) und Dimethyldithioarsinic Säure (DMDTAV), die von den Stoffwechselweg der Dimethylarsinic Säure (DMAV) Thiolation produziert werden, haben in letzter Zeit in der Umwelt sowie die menschliche Organe gefunden. DMMTAV und DMDTAV kann quantifiziert werden, um die ökologischen Auswirkungen von Dimethylated Thioarsenicals und ihre Stabilität in Umweltmedien zu bestimmen. Die Synthese-Methode für diese Verbindungen ist Sessionfenster, replizieren von früheren Studien schwierig machen. Darüber hinaus gibt es ein Mangel an Informationen über Lagerungstechniken, einschließlich Lagerung von Verbindungen ohne Arten Transformation. Außerdem, da nur begrenzte Informationen über Synthesemethoden verfügbar ist, möglicherweise gibt es experimentelle Schwierigkeiten bei der Synthese von Standardchemikalien und Quantitative Analyse. Das Protokoll enthaltenen bietet eine praktisch veränderter Synthese-Methode für die Dimethylated Thioarsenicals, DMMTAV und DMDTAV, und hilft bei der Quantifizierung der Spezies Trennung Analyse mit Hochleistungs-Flüssigkeit Chromatographie in Verbindung mit induktiv gekoppelten Plasma-Massenspektrometrie (HPLC-ICP-MS). Die experimentellen Schritte dieses Verfahrens wurden geändert, durch die Konzentration auf die Vorbereitung der chemischen Reagenzien, Filtrationsverfahren und Lagerung.

Introduction

Da Dimethylarsinic Säure (DMAV) nachgewiesen wurde, um akute Toxizität und Genotoxizität aufgrund einer Methylierung und Thiolation nach Einnahme1,2zu zeigen, hat der Stoffwechselweg von Arsen thiolation wurde intensiv studierte in Vitro und in Vivo3,4 so gut wie in Umweltmedien (z. B. Deponiesickerwasser)5,6. Frühere Studien haben gefunden, beide reduziert und Thiolated Analoga von DMAV in lebenden Zellen, zum Beispiel, Dimethylarsinous Säure (DMAIII), Dimethylmonothioarsinic Säure (DMMTAV) und Säure (Dimethyldithioarsinic) DMDTAV)7,8,9, mit Dimethylated Thioarsenicals wie DMMTAV höhere Toxizität als andere bekannte anorganische oder organische Arsenicals10ausstellen. Die Fülle der hochgiftigen Thioarsenicals hat schwerwiegende Auswirkungen auf die Umwelt, da sie ein Risiko für Mensch und Umwelt unter höchst Metall-Bedingungen11darstellen können. Die Mechanismen der DMMTAV und DMDTAV (Trans) Bildung und ihre Schicksale in Umweltmedien bedürfen jedoch noch weiterer Untersuchungen. Daher ist die Quantitative Analyse der Thioarsenicals notwendig, um Verständnis für die ökologischen Auswirkungen der DMMTAV und DMDTAVzu verbessern.

Obwohl Standardchemikalien die Grundvoraussetzung für die Quantitative Analyse sind, die Standards der DMMTAV und DMDTAV sind schwer zu bekommen durch die Replikation von früheren Studies, wegen der hohen Gefahr von Arten Umwandlung in andere Arten und Sessionfenster Synthese Verfahren12. Darüber hinaus haben die Methoden verwiesen Einschränkungen, die zu praktischen Schwierigkeiten bei der Synthese der Standardchemikalien und Quantitative Analyse führen können. DMMTAV und DMDTAV werden häufig durch Mischen von DMAV, Na2S und H2SO4 in einem bestimmten Molverhältnis1 oder sprudeln H2S gas durch eine Lösung von DMAV 13,14vorbereitet. Die sprudelnden Methode Funktionen Substitution von Sauerstoff durch eine direkte Versorgung von H2S Gas, das ist hochgiftig und schwer zu kontrollierenden für einen unerfahrenen Benutzer mit Schwefel. Umgekehrt verfügt über die oben genannten mischen Methode1, am meisten benutzt für die Qualitative Analyse der DMMTAV und DMDTAV in ökologischen Sudies5,6,12, die Thiolation der DMAV mit H2S erzeugt durch Mischen von Na2S und H2SO4 und produziert DMMTAV und DMDTAV, leichter stöchiometrischen Kontrolle Ziel Chemikalien produzieren im Vergleich zu den direkten H2S Gas nutzen.

Die Referenz mischen Methode Verfahren1,3,4,8,15 erwähnt in dieser Studie Ausstellung Einschränkungen in einigen ihrer kritischen experimentelle Schritte, die zu führen könnte experimentelle scheitern. Beispielsweise werden die Details der spezifischen Lösungsmittel (z.B. deionisiertes Wasser) Vorbereitung und die Extraktion und Kristallisation des synthetisierten Arsenicals stark abgekürzt oder nicht ausreichend detailliert beschrieben. So verstreut und nur begrenzte Informationen über Verfahrensschritte zu inkonsistenten Bildung von Thioarsenicals und unzuverlässig Quantifizierung Analyse führen könnte. Deshalb beschreibt das geänderte Protokoll entwickelt hierin die Synthese von DMMTAV und DMDTAV Stammlösungen mit quantitativer Art Trennung Analyse.

Protocol

(1) Synthese von DMMTAV Chemische Aufbereitung und molare Verhältnis Mischen von DMAV, Na2S und H2SO4Hinweis: DMAV: Na2S:H2SO4 = 1:1.6:1.6 Lösen Sie 5,24 g DMAV 40 mL deionisiertes und N2-gelöscht (mindestens 30 min lang gelöscht) Wasser in ein 50 mL Zentrifugenröhrchen. Bereiten Sie Na2S Reagenz durch auflösen 14,41 g Na2S?…

Representative Results

Da DMMTAV irrtümlich von der DMAIII Synthese Methode19vorbereitet wurde, ist die Überprüfung der synthetisierten DMMTAV und DMDTAV ein entscheidender Schritt für die Synthese und Extraktion und Bestimmung des idealen Standards chemische Stoffe. Synthetisierte Chemikalien können überprüft werden, von der Spitze des DMMTAV (MW-154 G·mol-1) und DMDTAV (170 MW G·mol-1) Mass…

Discussion

Das entwickelte Protokoll geklärt kritischen Schritte, dass frühere Studien1,3,4,8,15 ausgelassen oder abgekürzt, kann die Schwierigkeiten oder Fehler beim geführt haben DMMTAV und DMDTAV -Synthese. DMMTAV oxidationsempfindlichen1,5, chemische Reagenzien für seine …

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Diese Forschung wurde unterstützt durch grundlegende Wissenschaftsforschung Programm (Projektnummer: 2016R1A2B4013467) durch die National Research Foundation von Korea (NRF) finanziert durch das Ministerium für Wissenschaft, ICT & Zukunft plant 2016 und auch von Korea Basic Science unterstützt Institut Research Program (Projektnummer: C36707).

Materials

Cacodylic acid Sigma-Aldrich 20835-10G-F
Sodium sulfide nonahydrate Sigma-Aldrich S2006-500G
Sulfuric acid 96% J.T.Baker 0000011478
Ammonium acetate Sigma-Aldrich A7262-500G
Formic acid 98% Wako Pure Chemical Industries, Ltd. 066-00461
Diethyl ether (Extra Pure) Junsei Chemical 33475-0380
Adapter cap for 60 mL Bond Elut catridges Agilent Technologies 12131004 Syringe type of SPE
Bond Elut C18 cartridge Agilent Technologies 14256031 Syringe type of SPE
HyPURITY C-18 Thermo Scientific 22105-254630 5 um, 125 x 4.6 mm
Glovebox Chungae-chun, Rep. of Korea Customized 
Agilent 1260 Infinity Bio-inert LC Agilent Technologies DEAB600252, DEACH00245
Agilent Technologies 7700 Series ICP-MS Agilent Technologies JP12031510
Finnigan LCQ Deca XP MAX Mass Spectrometer System Thermo Electron Corporation LDM10627

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Cite This Article
Lee, H., Kim, Y., Jeong, S., Yoon, H. Preparation of DMMTAV and DMDTAV Using DMAV for Environmental Applications: Synthesis, Purification, and Confirmation. J. Vis. Exp. (133), e56603, doi:10.3791/56603 (2018).

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