Bu iletişim kuralı canlılık parametre ve düşük basınç plazma ile tedaviden sonra Bacillus subtilis sporlar canlandırıcı olarak DNA onarım işlemleri izleme alaka değerlendirmek için izleme tarafından gereken önemli ardışık adımlar gösterilmektedir Floresans etiketli DNA onarım proteinler confocal mikroskobu zaman karar vermek ve elektron mikroskobu tarama yoluyla.
Plazma sterilizasyon geleneksel sterilizasyon yöntemleri sanayi, klinik ve uzay uçuşu amaçlar için umut verici bir alternatiftir. Alçak basınç plazma (LPP) deşarj için hızlı mikrobiyal inactivation kurşun etkin türleri, geniş bir yelpazede içerir. Verimlilik ve mekanizmaları sterilizasyon LPP tarafından çalışmaya, sporlar test organizmanın Bacillus subtilis geleneksel sterilizasyon prosedürleri karşı olağanüstü onların direnci nedeniyle kullanıyoruz. B. subtilis spor monolayers, bir çift İndüktif eşleşmiş plazma reaktörü, tarama elektron mikroskobu (SEM), kullanarak spor morfolojisi karakterizasyonu plazmada düşük basınç sterilizasyon işleminin üretim tarif ve çimlenme ve sporlar canlı cep mikroskobu tarafından akıbet analizi. Plazma türler uğrak bir genomik malzeme (DNA) ve plazma kaynaklı DNA lezyonlar spore canlanma üzerine tamiri organizmanın hayatta kalmak için çok önemli. Burada, biz sporlar çimlenme kapasitesi çalışma ve DNA’ın rolü onarım spor çimlenmesi ve akıbet sırasında LPP ile tedaviden sonra fluorescently etiketli DNA onarım proteinler (RecA) zaman çözüldü confocal Floresans mikroskobu ile takip ederek. Tedavi ve tedavi edilmezse spor monolayers çimlenme için harekete geçirmek ve bir ters confocal canlı cep mikroskobu ile bireysel sporlar reaksiyon izleyin zaman içinde görüntülenir. Gözlemlerimiz takımıdır ve sporlar büyümüş kısmını LPP-tedavi en az 120 RecA-YFP (sarı Floresans protein) Floresans sadece birkaç sporlar algılandı ve toplamda geliştirilen s. sonra ulaşma süresi bağlıdır ortaya LPP tedavi sporlar içinde hafif bir ayrıcalık hücrelerle büyümüş. Ayrıca, bazı bitkisel bakteri LPP tedavi sporlar sitoplazma içinde artış gösterdi türetilen ve koşullar olarak gördüler. Bireysel Sporlar çözümlenmesi için açıklanan yöntemleri diğer yönleri spor çimlenmesi ve akıbet çalışma için örnek olabilir.
Uzay araştırmaları ana amacı yaşam formları ve biomolecules diğer gezegen organları ve uyduları Güneş Sistemi’ndeki imzalar için aramasıdır. Mikroorganizmaların transferi veya kritik alanlarda keşif için karasal kökenli biomolecules geliştirme ve hayat-algılama misyonlar Mars ve Europa1gibi gezegen Cesetlerdeki bütünlüğünü çarpışmaya belirli risk var. Gezegensel koruma Komitesi, uzay araştırma (gösterge tarafından) 1967’de kurulan, uluslararası kurallara ve diğer gezegenler, onların uyduları, asteroitler ve diğer Gök cisimleri insanlı ve robotik görev üzerinde sıkı kuralları empoze düzenleyen Temizlik ve sterilizasyon bir uzay aracı ve kritik donanım bileşenlerinin önceki karasal mikroorganizmaların kirletici ortadan kaldırmak ve Gök cisimleri2çapraz kontaminasyonu önlemek için başlatmak için. Son on yıl içinde sigara termik Plazmaları uygulanması geniş dikkat Biyomedikal ve beslenme araştırma yanı sıra uzay uçuşu uygulamaları3,4,5kazanmıştır. Nazik için hassas ve ısı değişken malzeme olurken hızlı ve verimli mikrobiyal inactivation6, sunduğundan plazma sterilizasyon geleneksel sterilizasyon yöntemleri için umut verici bir alternatiftir. Plazma deşarj serbest radikaller, parçacıklar, atomlar tarafsız/heyecanlı, hızlı mikrobiyal inactivation3‘ e yol fotonlar ultraviyole (UV) ve vakum ultraviyole (VUV) spektrum gibi reaktif maddeler karışımını içerir. Bu çalışmada, Bacillus subtilis Endosporlar cam test yüzey üzerinde dağıtılmış devre dışı bırakabilirsiniz için alçak basınç plazma Çift Kişilik İndüktif eşleşmiş alçak basınç plazma (DICP) kaynak7,8 tarafından oluşturulan kullanın.
Gram-pozitif bakteri Bacillaceae ailesinin yaygın olarak toprak, çökeller ve hava de temiz Oda imkanları ve Uluslararası Uzay İstasyonu9,10 gibi olağandışı ortamlar gibi doğal habitatları dağıtılır ,11. En farklı cins Bacillus besin tüketme12gibi olumsuz koşullar hayatta kalmak için son derece dayanıklı uyuyan Endosporlar (bundan sonra sporlar anılacaktır) oluşturmak için yetenek özelliğidir. Sporlar onların bitkisel hücre göre daha genellikle çok daha dayanıklı çeşitli tedaviler ve çevresel stresleri, ısı, UV, gama ışınlama, kuruma, mekanik bozulma ve güçlü oksitleyiciler gibi zehirli kimyasallar da dahil olmak üzere veya pH değişen ajanlar (başvurular13,14‘ te gözden) ve bu nedenle mikrobiyal inactivation yöntemleri verimliliği test için ideal nesneleridir. Genomik DNA uğrak bir bakteri15,16, plazma kaynaklı DNA lezyonlar tamiri plazma tedavisinin olduğu (örneğin DNA çift iplik sonları) Spor canlanma bakteri13, yaşam için çok önemlidir 17.
Bu nedenle, biz sporlar çimlenme kapasitesi ve DNA tamiri rolü spor çimlenmesi ve akıbet sırasında düşük basınç argon plazma ile sporlar aşağıdaki bireysel sporlar tarafından tedavi sonra çalışma ve onların ifade Floresans etiketli DNA onarım protein RecA zaman çözüldü confocal Floresans mikroskobu ile. Biz ulaşmak tekrarlanabilir test sonuçları, spor monolayers sterilizasyon için düşük basınç plazma ile tedavisi, tedavi plazma sporlar için hazırlanması için monolayers içinde bir adim adim öğretim B. subtilis sporlar hazırlanması vermek Bireysel Sporlar etkin DNA izleme ile konser düzeyinde tarama elektron mikroskobu (SEM) ve canlı cep mikroskobu çözümlemesi kullanarak ultrastructural değerlendirme süreçleri plazma tedaviye yanıt hücre içerisinde meydana gelen onarın.
Düşük sıcaklık kullanarak yüzeyler sterilizasyon, alçak basınç plazma alternatifi bir umut verici iyonize radyasyon, kimyasallar ile tedavi gibi oldukça konvansiyonel sterilizasyon yordamlarına (örneğin gazlar tarihlerde H2O2 veya etilen oksit) veya kuru ve nemli ısı23. Sıradan sterilizasyon yöntemleri çoğunlukla etkili bir sterilizasyon sağlar, ancak onlar işleci için potansiyel bir riski ve tedavi malzeme etkisi bilinmektedir. Alçak basınç …
The authors have nothing to disclose.
Yazarlar Andrea Schröder bu iş ve Nikea J. Ulrich parçaları video çekimi sırasında yardımını sırasında onun mükemmel teknik destek için teşekkür ederiz. Biz de Lyle A. Simmons Bacillus subtilis suşları onun cömert bağış için teşekkür etmek istiyorum: LAS72 ve LAS24. Bu eser yerlerinde hibe tarafından Alman Araştırma Vakfı (DFG) Paketantrag (PlasmaDecon PAK 728) PA (AW 7/3-1) desteklenen bir durumdu ve DLR-FuW-Projekt ISS hayat, program RF-FuW, Teilprogramm 475 (F.M.F, Mr ve RM) RM (MO 2023/2-1) ve DLR verin. F.M.F. adlı Alman Havacılık ve Uzay Merkezi (DLR) Köln, Almanya, 6 yıl (bir süre içinde Helmholtz Association (Helmholtz-Gemeinschaft) tarafından finanse edildi Helmholtz alanı Yaşam Bilimleri Araştırma okul (SpaceLife) bir Doktora Bursu tarafından desteklenmiştir Grant No VH-ko-300) ve Havacılık yönetim kurulu ve Havacılık tıp Enstitüsü gibi DLR ek fon aldı. Bu çalışmanın sonuçları Felix M. Fuchs Doktora tez dahil edilir.
Two substance nozzle (model 970-8) | Schlick | 14,404 | 230 V, 50 Hz, D 4.484/8, 0.8 mm bore diameter |
Luria Bertani Medium | Sigma Aldrich | 70122-100G | |
Tube connectors | Festo | n/a | G 1/8 |
Magnetvalve DO35-3/2NC-G018-230AC | Bosch Rexroth | 820005100 | |
PLN Polyamid tube | Festo | 558206 | d = 6 mm |
Glass slides | VWR | 48300-026 | |
Electric Timer 550-2-C | Gefran | F000074 | 220 V |
attofluor cell chamber | Menzel, Fisher Ref. | 3406816 | d=25 mm, round |
MgSO4*7 H2O | Sigma Aldrich | 13152 | |
Ca(NO3)2 | Sigma Aldrich | 202967 | |
MnCl2 * 4 H2O | Sigma Aldrich | 244589 | |
FeSO4 * 7H2O | AppliChem | 13446-34-9 | |
Glucose | Merck | 215422 | |
KCl | Sigma Aldrich | P9541-500G | |
Nutrient Broth (NB) | Merck | 105443 | |
Luria-Bertani (LB) | Merck | 110283 | |
96-wellplate | ThermoFisher | 243656 | |
Zeiss LSM 780, Axio Observer Z1 | Carl Zeiss Microscopy GmbH | n/a | |
Leo 1530 Gemini | Carl Zeiss Microscopy GmbH | n/a | |
ZEN 2 and ZEN lite 2012 (Software) | Carl Zeiss Microscopy GmbH | n/a | |
SigmaPlot, version 13.0 (Statistic software) | Systat GmbH, Erkrath, Germany | n/a | |
Attofluor cell chamber | Invitrogen | A7816 | |
µ-Dish 35 mm, high Grid-500 Glass Bottom | ibidi | 81168 |