Summary
Detta detaljerade protokoll beskriver transkraniell stimulering elektrodplacering på tinningbenet för att undersöka de kort - och långsiktiga effekterna av transkraniell elektrisk stimulering i fritt rörliga råttor.
Abstract
Transkraniell elektrisk stimulering (TES) är en kraftfull och relativt enkel metod att diffust påverka hjärnans aktivitet antingen slumpmässigt eller i ett slutet kretslopp händelseutlöst sätt. Även om många studier fokuserar på möjliga fördelar och biverkningar av TES i friska och patologiska hjärnor, finns det fortfarande många grundläggande öppna frågor om verkningsmekanismen av stimulering. Därför finns det ett tydligt behov av en robust och reproducerbar metod att testa den akuta och kroniska effekterna av TES hos gnagare. TES kan kombineras med regelbundna beteendemässiga, elektrofysiologiska och imaging tekniker att undersöka neuronala nätverk i vivo. Implantation av transkraniell stimulering elektroder ålägger inte extra begränsningar på experimentell design medan det erbjuder ett mångsidigt, flexibelt verktyg för att manipulera hjärnaktivitet. Här tillhandahåller vi en detaljerad, steg för steg-protokoll för att fabricera och implantat transkraniell stimulering elektroder för att påverka hjärnans aktivitet i en temporally begränsad sätt i månader.
Introduction
Transkraniell elektrisk stimulering (TES) är en värdefull metod att påverka hjärnans aktivitet i en temporally begränsad sätt. Beroende på storlek och placering av stimulering elektroderna, TES kan påverka stora hjärnan volymer och dra in neuronala populationer diffust1,2,3. Transkraniell likström stimulering är redan medicinskt godkänd för behandling av egentlig depression4,5, och många studier fokus på visar de kognitiva effekterna av transkraniell stimulering i människor6 , 7. Dessutom lovande resultaten rapporterades om potentialen i TES kontrollera epileptiska anfall8,9.
Trots intensiv forskning finns det fortfarande många öppna frågor angående den detaljerade verkningsmekanismen, potentiella biverkningar, och det långsiktiga resultatet av att tillämpa denna metod10,11,12. Det är därför kritiskt viktigt att ha ett robust, reproducerbara protokoll för att undersöka effekterna av TES i djurmodeller. Med tanke på att många sjukdomar (t.ex., depression, epilepsi och schizofreni) kan endast undersökas utförligt i vaket djur, och arten av dessa sjukdomstillstånd brukar kräva långvarig behandling, vi tillhandahåller ett protokoll för kronisk implantation av transkraniell elektroderna hos råttor. Metoden presenteras här kan användas för beteendevetenskapliga studier eller kan kombineras med implantation av inspelning elektroder (dvsledningar, silikon sonder, juxtacellular elektroder) eller kronisk kraniala windows för elektrofysiologiska experiment och imaging studier, respektive. Beroende på experimentell design, kan tidpunkten för stimuli vara slumpmässiga eller händelseutlöst specifika beteendemässiga ledtrådar eller elektrofysiologiska kännetecken av särskilt hjärna påstår (kramper, theta svängningar)8, 11 , 13.
Det är viktigt att nämna att i motsats till den närvarande används mänskliga förhållningssätt, som använder ett förkroppsligande av elektroderna placeras på huden, här visar vi en metod som sysselsätter subkutan implantation rätt över ytan av tinningbenet, sedan råttor knappt tolerera något placeras på huden som är lättillgängligt med sina tassar.
I linje med principerna om ersättning, begränsning och förfining, kronisk pågrund av implantation, denna metod hjälper till att minska antalet djur, eftersom varje djur kan rekryteras i olika experimentella villkor för månader, vilket möjliggör användning av färre djur för att testa olika hypoteser.
I den aktuella studien, vi tillhandahåller en detaljerad, steg för steg protokoll av transkraniell stimulering elektrod tillverkning (figur 1A-B) och visar kronisk implantation av dessa elektroder över temporala ben en sex månader gammal manliga lång-Evans råtta.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Alla metoderna som beskrivs här är förenliga med Europeiska gemenskaperna rådet direktiv 86/609 ECC () och har godkänts av den etiska kommittén för djur forskning vid Albert Szent-Györgyi medicinska och farmaceutiska Center vid University of Szeged (XIV-218-2016).
1. tillverkning av stimulering elektroderna
- För att göra en stimulering elektrod, skär sex 10 cm långa bitar av miniatyr krok upp sladdar, ta bort 2 cm av beklädnad i ena änden och 1 cm på den andra änden.
- Vrida två kablar tillsammans och löda på kortare skalade sida.
- Förvärva en remsa av tre band förpackning av någon integrerad krets med SOT-353 fall.
- Sy de tvinnade kablarna genom tre hålen i paketet. Längre skalade segmentet av kablarna bör i hålrum av paketet. Placera kablarna så att isoleringen avslutas i linje med kanten av hålen.
- Sätta den dentala cementen på hål att fixa kablar.
Varning: Dentala cement måste vara tillräckligt tät för att undvika läcker in hålighet i paketet. - När cementen är stelnat (minst 10 min), vänd paketet och Lägg ett tunt lager av superlim i hålet för att bilda en vattentät tätning mot porösa cement. Undvik att limma skalade kablarna.
- Twist kablarna tillsammans på kortare skalade sida och löda (figur 1A).
- Ta längre skalade segmentet av trådarna med spetsen på fin pincett, rulla dem runt och Linda in dem i hålrum (figur 1B). Skär överflödig kabel, om nödvändigt.
2. tillverkning av inspelning elektroderna
- För att göra en inspelning triplett elektrod (figur 1 c-D), skär en en cm lång bit av rostfritt rör med höghastighetståg rotary såg. Ta bort fenan från ändarna av röret med en vass nål och se till att röret är ren från skräp och helt genomsläppliga.
Obs: Använd inte tång, eftersom de kommer att snedvrida röret. - Böj en guldpläterade styrelsen spacer stift med en minsta längd 3 cm att bilda en J-form hållare. Skär det längsta benet av formen 'J', och löd den tillsammans för att få tillbaka den ursprungliga formen att göra en löstagbar skarven mellan den långa linjära delen, som kommer att hållas av stereotaxic enheten, och formen 'U', som kommer att hålla elektroden, och fungera som en ankring punkt . Limma ihop röret och det korta benet av innehavaren av 'J'. Limma några ytterligare 1 cm lång barer, om nödvändigt, för stabilitet.
- Skär 3 bitar av 2,5 cm lång elektrod ledningar med rostfritt stål, ultrafina sax. Kontrollera att det är en klar och skarp skära, och isoleringen är intakt på Elektrodtråd cirkulär yta. Kontrollera också att den skära spetsen inte är böjd på grund av den kraft som anbringas. Böj 1 eller 2 mm på ena änden av var och en av trådarna i olika vinklar (t.ex., en vänster rak, en 45 ° och en rät vinkel) så att de kan särskiljas.
- Fyll röret med kablarna, välja en lämplig avståndet mellan elektroderna för experimentet (t.ex., för kortikala lokala fältet potentiella (LFP) och nuvarande källa densitet (CSD) registrering, den rekommendera utskjutande delen av tips av kablarna från den öppnandet av tuben: 4,5 mm, 4,1 mm och 3,7 mm, respektive). Notera vilken tråd motsvarar vilket djup för att upprätthålla en ordentlig kanalordning.
- När trådarna Högerjustera bredvid varandra och är parallella med röret, åtgärda elektrod trådarna, placera en enda droppe flytande superlim i båda ändarna av röret med en vass nål. Kontrollera att limmet flödar in i röret kapillär effekt, men inte mot inspelning webbplatser utstickande ändar.
- Förbereda en elektrod gränssnittskortet med en ordentlig microconnector som är kompatibel med inspelning för att användas.
- Införa icke-inspelning, böjda ändarna på kablarna in i hål i elektroden gränssnittskortet motsvarar önskad inspelning kanalen. När alla kablar är i position, tryck guld stiften i hålen med pincett.
Obs: Guld pins kan fastställas på plats med dentala cement, men i de flesta fall är det tillräckligt stabila även utan denna säkerhet steg.
3. anestesi
- Djuret i en förseglad anestesi induktion kammare och fyll det med 4-5% av isofluran i 2 L/min medicinsk luft.
- När råttan är tillbakalutad, ta bort djuret från kammaren och placera det i en stereotaxic ram med en lämplig ventilation näsa bit.
- Ställa in isofluran på 2%, även om graden av luftflöde ska vara densamma. Kontrollera nivån av anestesi. Om det finns en avsaknad av tass tillbakadragande reflexen att bemöta klämmande, fortsätta, annars öka djupet av anestesi.
- Övervaka och upprätthålla råttans kroppstemperatur vid 37 ± 0,5 ° C med ett homeothermic övervakningssystem. Applicera en droppe paraffin salva på ögonen för att förhindra uttorkning av hornhinnan. Upprepa proceduren under operation flera gånger, om det behövs.
- Subkutant injicera 0,3 mg/kg atropin för att undvika slem bildas i luftvägarna. Upprepa detta varje fyra timmar vid längre operationer. Övervaka andning och justera spridare, om det behövs.
4. implantation av stimulering och inspelning elektroder
Obs: Autoklav alla nödvändiga kirurgiska instrument och noga följa de allmänna reglerna i asepsis och antiseptisk under hela förfarandet. Undvik att vidröra nonsterile områden utanför det kirurgiska området. Sänk ned elektroderna i etanol (70%) för 30 min före implantation.
- Ta bort de flesta av håret från hårbotten med en hårklippare. Applicera hårborttagningsprodukter krämen i hårbotten, sprida det jämnt på ytan och vänta några minuter. Använda en spatel för att varsamt ta bort grädden och återstående håret. Skölj huden med vatten, sedan med desinfektionsmedel.
- Injicera 1-2% lidokain (inte överstiger en total dos på 7 mg/kg) subkutant för att bedöva huden. Tillämpa en enda droppe av veterinär salva för ögonen (t.ex., paraffin).
- Göra en grundlig och en lång (~ 2 cm) sagittal incision i mittlinjen med en skalpell, från pannan till nacken. Dissekera vävnader inklusive periostet från skallen, sedan använda en mejsel eller tand pincett rengöra området mellan cristae av två temporala ben. Håll skallen exponeras av Upprullningskraften dissekerade huden med hjälp av fyra bulldogs.
- Försiktigt placera fin pincett mellan branta kant av tinningbenet och musklerna och separera dem. Gör pimpelfiske rörelser att exponera så mycket av den stora ytan av tinningbenet som möjligt, helst från kanten av occipital benet med de koronala suturerna, plan utan att skada musklerna.
- Placera upprullningsdon bitemporally att hålla temporala ben exponeras.
- Skölj ytan av skallen med 1-2 mL 3% H2O2, Tvätta sedan med 1-2 mL vatten.
- Lufttorka på ytan av temporala ben mycket noga, torka upp fukt med okulär pinnar. Testa om stimulering elektroderna passar på rengjorda vertikala skalle yta (den övre kanten av stimulering elektroden bör vara i linje med kanten av crista av tinningbenet). Justera bulldogs och upprullningsdon eller forma stimulering elektroderna med sax, om det behövs.
- Fyll hålrum av stimulering elektroder med electroconductive gel och lägga ett tunt lager lim på kanten av elektroderna.
- Placera den stimulering elektroden på torr yta av tinningbenet med en korrekt rörelse, och håll den stadigt på plats i en minut med fin pincett. Se till att ingen fukt är i kontakt med limmet. Torka upp med okulär pinnar, om det behövs.
Försiktighet: instabilitet av elektroden upplevs, ta bort den. Efter rengöring med ben, upprepa detta steg med en ny stimulering elektrod. - Sätta dentala cement över kanterna på stimulering elektroden, medan den läckande fukten i vävnaderna kontinuerligt torkas med okulär pinnar. Täcka hela stimulering elektroden med cement.
- När cementen är helt härdat, upprepa dessa steg på den kontralaterala sidan.
- Borra några hål över hela skallen för ankring skruvar. Kör miniatyr skruvar i hålen och sätta dentala cement över dem. Använd en ~ 10% mindre diameter borra huvudet jämfört med skruv diameter.
- Beroende på syftet med experimenten, antingen löda en koppling till ändarna på kablarna, placera den på ytan och täck med cement, fortsätta implantera den inspelning elektroder och optiska fibrer eller förbereda ett kraniala fönster över skallen. I det senare fallet, löd kontakterna och förankra dem till konstruktionen endast i slutet. Vid behovet av långsiktiga samtidiga TES och LFP inspelningar, implantat ovannämnda elektrod trillingarna istället för enstaka kablar.
Obs: Denna inställning tillåter för avlägsnande av vanliga läge stimulering artefakter8. För detaljerna för inspelning elektrod implantation, se föregående protokoll14,15. - Tvätta de exponerade vävnaderna rikligt med desinfektionsmedel. Injicera 1-2% lidokain (inte överstiger en total dos på 7 mg/kg) subkutant.
- Debride såret kanter och stänga dem med enkla avbrutna suturer runt kontakten/implantatet. Desinficera såret med povidonjod.
- Injicera 5 mg/kg carprofene subkutant. Upprepa detta vid behov.
Obs: Alla andra analgetika användas matcha kraven fastställs av styrelsens lokala etiska tillstånd. - Avbryta anestesi, släppa earbars och revolvern och sätter djuret i en postoperativ återhämtning bur att återfå medvetande.
- Se till att djuret under noggrann övervakning under de första postoperativa timmarna. Fortsätta att övervaka området implantatet regelbundet.
Obs: Djuret bör inte lämnas utan uppsikt tills den har återfått tillräcklig medvetande för att upprätthålla sternala koordinationsrubbning. Hus djur individuellt tills full återhämtning från förfarandet.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Implantation av kronisk stimulering elektroder (figur 1B) kan kombineras med ytterligare implantation av inspelning elektroder (figur 1 c-D). Sådana inställningar är lämpliga att bilda video-on-demand-inspelning och stimulering system att störa särskilda hjärnaktiviteter. Här presenterar vi representativa resultat för en sluten slinga epilepsi detektering och interventionssystemet, tillämpas på lång-Evans råttor uttrycker spontana kramper (figur 2A)9. Denna stam är kända för att Visa electrographic och beteendemässiga symtom på frånvaro (petit mal) epilepsi (figur 2B). Vid ett epileptiskt anfall, som den inspelade intracortical signaler analyseras i realtid, en utlösare skickas till en isolerad stimulus generator vid lämplig tidpunkt att störa spike-och-wave aktiviteten i hjärnan. I sin tur levererar stimulans generatorn en avgift-balanserad, trifasiskt stimulans genom bitemporal stimulering elektroderna för att avbryta aktiviteten beslag.
Figur 2 c-D visar kapaciteten för de temporally riktade stimuli att avbryta pågående anfall från vecka 1 till vecka 16, visar den robusthet och tillförlitlighet av implanterade stimulering elektroderna. För att sätta dessa resultat i sammanhanget, figur 2E visar inspelningarna av en avbruten experiment, där sekundära vävnad trängt in mellan tinningbenet och elektrod ytan på grund av felaktig tätning och cementering av elektroderna (obduktion av den djur bekräftade vävnad invasionen). Förutom ökande impedans stimulering elektroderna, är växande vävnaden sannolikt att ge en elektrisk shunt. Detta experiment belyser utter vikten av noggrann isolering uppnå tillförlitliga och reproducerbara resultat under stimulering experiment.
Figur 1: steg stimulering och inspelning elektrod fabrication. (A) Twisted trådar sys genom hålen och fast på förpackningen innan inslagning skalade kablar in i hålrummen. (B) slutliga form av stimulering elektroderna. Infällt: insvept ledningar inuti förpackningen. (C) Side Visa av inspelning elektroderna; (D) ovanifrån av inspelning elektroderna. Infällt: Tip inspelning webbplatser, 400 µm mellanrum. (E) intraoperativ bild av transkraniell stimulering elektrodplacering. Elektroderna stimulering implanteras redan, tillsammans med några av ankring skruvar. Klicka här för att se en större version av denna siffra.
Figur 2: representativa resultat av slutna beslag intervention med stimulering elektroderna i detta protokoll. (A) Closed-loop Systemöversikt. Triplett inspelning elektroder implanteras i parietala cortex och stimulering elektroder placeras bitemporally på skallen. Råttan är utrustad med en på-head förstärkare och ansluten till ett system för upptäckt av realtid beslag. (B), LFP spår av en oavbruten spike-och-wave beslag (C och D) exempel LFP spår av beslag intervention på 1st och 16: e veckan av stimulering. (E) exempel på bristande beslag avbrott vid vävnad växer mellan stimulering elektroderna och tinningbenet (bekräftat vid obduktion) Klicka här för att se en större version av denna siffra.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Det mest kritiska steget i detta protokoll är limning av elektroden paketet på benytan. Vid felaktig tätning, en klyfta bildas mellan elektroderna och benet, och sekundära ärrvävnad kan växa till denna lucka, vilket minskar kvaliteten på stimulering. Benytan måste vara helt torr under stegen för att klibba på paketet, och när det gäller upplever instabilitet av elektroderna, måste det tas bort och ersättas med ett nytt paket att få bästa resultat.
En begränsning med denna metod är att när huden inte är helt stängd efter operationen, det finns en relativt högre risk för infektion. Postoperativ vård under de första 4-5 dagarna under återhämtning med desinficerande lösning, och senare med pulver, hjälper till att förhindra infektion. Vår erfarenhet underlättar denna behandling bildandet av ärrvävnad, som kan helt stänga såret mot den yttre världen.
Här presenterade vi en av de billigaste, mest tillgängliga metoderna för elektrod fabrication, men beroende på de särskilda behoven hos särskilt experimenten, ändring av det ledande materialet kan behövas, t.ex., beläggning ytan av kablarna med icke-polarisera gränssnitt elektrodmaterial, t.ex., PEDOT:PSS. Elektroden paketet kan vara skräddarsydda 3D-tryckt och ändras av praktiker, i fall våra rekommendationer matchar inte kraven i en särskild studie. Vår erfarenhet, storleken på transkraniell elektroderna fabricerade i denna studie tillåter implantationer i både han- och honråttor ovan 300 g kroppsvikt, men storleken på stimulering elektroderna kan enkelt minskas genom att skära mindre remsor i protokollet steg 1.3. Dessutom kan alla lim och tandcement i protokollet ersättas med substitut, med tanke på att det yttre lagret är i direkt kontakt med vävnader, därför bör de biokompatibla.
I den aktuella studien föreskrivs vi ett protokoll bitemporal stimulering elektrod fabrication och implantation, som är tekniskt enkel att utföra, kostnadseffektiva och tillförlitliga på lång sikt, så att elektrisk stimulering experiment på fritt rörliga råttor9. Som stimulering elektroderna placeras på tinningbenet, bevaras hela horisontella skalle ytan för andra implantationer. Denna metod kan kombineras med regelbundna elektrofysiologiska15,16, optogenetic17, och18 avbildningstekniker, ger möjlighet till en mångsidig kombination av experimentella protokoll.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Antal Berényi är ägare och grundare av Amplipex Ltd, ett företag som tillverkar storskaliga multiplexering biosignal förstärkare. Gábor Kozák och Tamás Földi har ingenting att avslöja.
Acknowledgments
Detta arbete fick stöd av EU-FP7-ERC-2013-Starting grant (No.337075), 'Fart' programmet av den ungerska akademin av vetenskaper (LP2013-62), och GINOP-2.3.2-15-2016-00018 bidraget. Vi tackar Máté Kozák för att dokumentera stimulering och inspelning elektroder och Mihály Vöröslakos för de fruktbara diskussionerna under protokoll.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Cyanoacrylate liquid | Henkel | Loctite 401 | |
| Cyanoacrylate gel | Henkel | Loctite 454 | |
| Wire for stimulation electrodes | Phoenix Wire Inc. | 36744MHW - PTFE Microminiature Hook-Up Wire | |
| Board spacer | E-tec Interconnect | SP1-020-S378/01-55 | |
| Connector | E-tec Interconnect | P2510I-02 | |
| Tape packaging for stimulation electrodes | Nexperia | 74HC1G00GW | Tape packaging of any integrated circuit with SOT-353 case can be used |
| Grip Cement Industrial Grade | Caulk Dentsply | 675571 (powder) 675572 (solvent) | |
| Electroconductive gel | Rextra | ECG Gel | |
| Recording electrode wire | California Fine Wire Co. | .002 (50 micron) Tungsten 99.95% (CFW Material #: 100-211), HMl-Natural, cut to 3.0 inch pieces, Round, Cut length piece wire | |
| Ultrafine scissors | Hammacher Instrumente | Stainless HSB 544-09 | |
| Stainless steel tube | Vita Needle Company | 29 RW, 304SS Tubing, T.I.G. Welded and Plug | |
| High speed rotary saw | Dremel | Model # 395 | |
| Rotary saw holder | Dremel | Model # 220 | |
| Rotary saw cut-off wheel | Dremel | Model # 409 | |
| Ocular sticks | Lohmann-Rauscher | Pro-ophta Ocular Sticks | |
| Wet disinfectant | Egis | Betadine | |
| Dry disinfectant | Wagner Pharma | Reseptyl-urea | |
| Drilling machine | NSK-Nakanishi United Kingdom | Vmax35RV Pack | |
| Anchoring screws | Antrin Miniature Specialties, Inc. | 000-120x1/16 SL BIND MS SS |
References
- Ozen, S., et al. Transcranial electric stimulation entrains cortical neuronal populations in rats. The Journal of neuroscience : the official journal of the Society for Neuroscience. 30 (34), 11476-11485 (2010).
- Ali, M. M., Sellers, K. K., Frohlich, F. Transcranial alternating current stimulation modulates large-scale cortical network activity by network resonance. The Journal of neuroscience : the official journal of the Society for Neuroscience. 33 (27), 11262-11275 (2013).
- Helfrich, R. F., et al. Entrainment of brain oscillations by transcranial alternating current stimulation. Current biology : CB. 24 (3), 333-339 (2014).
- Bikson, M., et al. Transcranial direct current stimulation for major depression: a general system for quantifying transcranial electrotherapy dosage. Current treatment options in neurology. 10 (5), 377-385 (2008).
- Lefaucheur, J. P., et al. Evidence-based guidelines on the therapeutic use of transcranial direct current stimulation (tDCS). Clinical neurophysiology : official journal of the International Federation of Clinical Neurophysiology. 128 (1), 56-92 (2017).
- Kuo, M. F., Nitsche, M. A. Effects of transcranial electrical stimulation on cognition. Clinical EEG and neuroscience. 43 (3), 192-199 (2012).
- Sandrini, M., Fertonani, A., Cohen, L. G., Miniussi, C. Double dissociation of working memory load effects induced by bilateral parietal modulation. Neuropsychologia. 50 (3), 396-402 (2012).
- Berenyi, A., Belluscio, M., Mao, D., Buzsaki, G. Closed-loop control of epilepsy by transcranial electrical stimulation. Science. 337 (6095), New York, N.Y. 735-737 (2012).
- Kozak, G., Berenyi, A. Sustained efficacy of closed loop electrical stimulation for long-term treatment of absence epilepsy in rats. Scientific reports. 7 (1), 6300 (2017).
- Fertonani, A., Ferrari, C., Miniussi, C. What do you feel if I apply transcranial electric stimulation? Safety, sensations and secondary induced effects. Clinical neurophysiology : official journal of the International Federation of Clinical Neurophysiology. 126 (11), 2181-2188 (2015).
- Marshall, L., Binder, S. Contribution of transcranial oscillatory stimulation to research on neural networks: an emphasis on hippocampo-neocortical rhythms. Frontiers in human neuroscience. 7, 614 (2013).
- Reato, D., Rahman, A., Bikson, M., Parra, L. C. Effects of weak transcranial alternating current stimulation on brain activity-a review of known mechanisms from animal studies. Frontiers in human neuroscience. 7, 687 (2013).
- Thut, G., Miniussi, C. New insights into rhythmic brain activity from TMS-EEG studies. Trends in cognitive sciences. 13 (4), 182-189 (2009).
- Gage, G. J., et al. Surgical implantation of chronic neural electrodes for recording single unit activity and electrocorticographic signals. Journal of visualized experiments : JoVE. (60), (2012).
- Vandecasteele, M., et al. Large-scale recording of neurons by movable silicon probes in behaving rodents. Journal of visualized experiments : JoVE. (61), e3568 (2012).
- Zayachkivsky, A., Lehmkuhle, M. J., Dudek, F. E. Long-term Continuous EEG Monitoring in Small Rodent Models of Human Disease Using the Epoch Wireless Transmitter System. Journal of visualized experiments : JoVE. (101), e52554 (2015).
- Ung, K., Arenkiel, B. R. Fiber-optic implantation for chronic optogenetic stimulation of brain tissue. Journal of visualized experiments : JoVE. (68), e50004 (2012).
- Mostany, R., Portera-Cailliau, C. A craniotomy surgery procedure for chronic brain imaging. Journal of visualized experiments : JoVE. (12), (2008).
