Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
JoVE Journal Behavior
Click here for the English version

Behavior

إعادة البحث عن المخدرات في الفئران باستخدام نموذج تفضيل المكان مكيفة

Published: June 7, 2018 doi: 10.3791/56983
Automatic Translation
1, 1, 1, 1
1Unidad de Investigación Psicobiología de las Drogodependencias, Departamento de Psicobiología, Facultad de Psicología, Universitat de València

Summary

ويصف هذا البروتوكول مكيفة مكان التفضيل (حزب الشعب الكمبودي) كنموذج للانتكاس. يسمح هذا الإجراء بقياس الانتكاس في الحيوانات المختبرية، والنظر في تأثير منبهات البيئية المرتبطة بالمخدرات كحنين والانتكاس في المدمنين الممتنعين حاليا تركيز برامج العلاج من تعاطي المخدرات.

Abstract

ويصف هذا البروتوكول مكيفة مكان التفضيل (حزب الشعب الكمبودي) كنموذج للانتكاس في إدمان المخدرات. في هذا النموذج، يتم تدريب الحيوانات أولاً للحصول على تفضيل مكان مكيفة في حجرة إقران المخدرات، وبعد الاختبار، وتكييف ما بعد أنها تؤدي عدة دورات لإخماد تفضيل المنشأة. حزب الشعب الكمبودي يسمح بتقييم آثار مكافأة مشروطة العظة العقاقير ذات الصلة بالبيئة. بعد ذلك، يمكن أن تعاد حزب الشعب الكمبودي إخماد قوة إدارة الوحدات غير فتيلة جرعة من المخدرات، والتعرض لمؤثرات ضاغطة. وسيتم شرح كل الطرق هنا. عند الحيوان رينيتياتيس الاستجابة السلوكية، يعتبر إعادة المكافأة مشروطة التي حدثت.

المزايا الرئيسية لهذا البروتوكول أنها غير الغازية، وغير مكلفة وبسيطة مع معايير صحة جيدة. وباﻹضافة إلى ذلك، فإنه يسمح دراسة التلاعب البيئية المختلفة، مثل الإجهاد أو النظام الغذائي والتي يمكن أن تعدل الانتكاس إلى المخدرات تسعى السلوكيات. حد واحد غير أن إذا كان الباحث يهدف إلى استكشاف الدوافع والآثار يعزز الأولية للمخدرات، فإنه ينبغي أن تستكمل بإجراءات الإدارة الذاتية، كما أنها تنطوي على ردود استثابي للحيوانات.

Introduction

نموذج تفضيل المكان مكيفة (حزب الشعب الكمبودي) يوفر طريقة بسيطة لتقييم مكافأة مشروطة الناجم عن حوافز متنوعة1،2، وقد استخدمت على نطاق واسع لدراسة آثار مكافأة مشروطة للادمان المخدرات3 . ويستند على تكييف Pavlovian، لتقييم قيمة تحفيزية لمنبهات البيئية المرتبطة بالمخدرات للحفاظ على سلوك الإدمان4. في هذا النموذج، منبهات البيئية اكتساب خصائص مشهي الثانوي (آثار مكافأة مشروطة) عندما يقترن بنحوله الابتدائية3. على سبيل المثال، هو يقترن مكاناً محايدا في البداية (مثل لون حجرة واحدة في قفص حزب الشعب الكمبودي) الآثار المحددة للمخدرات للاعتداء أثناء بعض تكييف الدورات5، بينما حجرة أخرى ترتبط بحقن مركبة. بعد تكييف، إذا كانت الحيوانات تنفق المزيد من الوقت في حجرة سابقا المرتبطة بالمخدرات، فمن المفترض أن حزب الشعب الكمبودي قد وضعت3. ويتحقق إنشاء التفضيل عند الحيوان يعطي قيمة إيجابية للعظة البيئية المرتبطة بالمخدرات، والتي هي نحوّله الأولية. ونتيجة لذلك، سوف تؤدي الحيوانات الاستجابة السلوكية البحث عن المخدرات في الاستجابة لتلك الرموز السياقية6. يسمح نموذج حزب الشعب الكمبودي تقييم خصائص مجزية سوبثريشولد جرعة من المخدرات، وتبين ما إذا كانت الحيوانات في حالة معينة (مثلاً، التي عانت من هزيمة الاجتماعي سابقا) أقل مناعة وأكثر حساسية للجرعات التي يتم ليست فعالة في السذاجة الحيوانات7.

وقد استخدمت أيضا نموذج حزب الشعب الكمبودي لتقييم خطر الانقراض/إعادة كنموذج حيوان لدراسة3من الانتكاس، وهو الهدف من هذا البروتوكول. وهناك ثلاث مراحل مختلفة: اقتناء والانقراض، وإعادة (الشكل 1). في نموذج إعادة حزب الشعب الكمبودي، اكتساب الحيوانات أولاً أن حزب الشعب الكمبودي لحجرة إقران المخدرات، ومن ثم أنها تؤدي عدة دورات انقراض. علينا أن نحدد الانقراض كلحظة الذي يقلل الحيوان استجاباته السلوكية لتقريب لحافز مجزية مكيفة التي تم إزالتها (مثلاً، المخدرات)8. خلال دورات انقراض، استكشاف الحيوانات المقصورات في الغياب عن المخدرات، حيث تكون الأفضلية المكتسبة تدريجيا الموهنة9. قضية هامة للنظر هو أن التغيير السلوكي الذي يسلك هذا الحيوان أثناء الانقراض (الانخفاض التدريجي في الوقت الذي يقضيه في حجرة إقران المخدرات) يمكن أن تكون نتيجة لعمليات التعلم الجديدة التي تتنافس مع استجابة المستفادة السابقة، أو إلى انخفاض في الحالة الداخلية تحفيزية ل الموضوع3. وأخيراً، سيكون إعادة تفضيل المكان عن طريق المخدرات أو سياق العظة نموذجنا لإعادة1.

إدارة حقن المخدرات المرتبطة بها فتيلة يمكن إعادة التفضيل، التي تعتبر إعادة لتقريب العظة السياقية. إعادة فتيلة المخدرات تحدث بسبب الذاكرة المستمرة لآثار المخدرات، والتي بفعل حنين ويحفز الحيوانات التماس العظة البيئية المتصلة بمكافأة ممتعة.

بعض المزايا لنموذج إعادة حزب الشعب الكمبودي، هي أن هذا الإجراء غير الغازية (على النقيض من الإدارة الذاتية، الأمر الذي يتطلب جراحة) وغير مكلفة وبسيطة. وبالإضافة إلى ذلك، هذا النموذج صلاحية هي معيار جيد، كما أنه يحاكي جيدا ما يحدث في البشر10،11، الذي يحفز إعادة مع المحفزات التي تحفز الانتكاس، مثل التعرض لل12،المخدرات13 أو نشدد على14.

وهناك تقنيات أخرى مثل الانقراض – نموذج إعادة الإدارة الذاتية عن طريق الحقن الوريدي. وهنا، اضغط الحيوانات رافعة سيلفادمينيستير المخدرات، والتي تسمح بتقييم الاستجابة استثابي الحيوان، كومبولسيفيتي، والدافع14،،من1516. والميزة الرئيسية لحزب الشعب الكمبودي على إجراءات الإدارة الذاتية اعتبار أن إعادة حزب الشعب الكمبودي تعكس إعادة تنشيط قيمة الحافز تحفيزية للمحفزات السياق المقترنة مع المخدرات، وتتألف من ظهور نهج السلوك في سياق17. وعلاوة على ذلك، يمكن للمحفزات غير المخدرات، مثل الإجهاد، وأيضا حمل إعادة18،19. على سبيل المثال، وصفت دراسة الإدارة الذاتية واحدة أي آثار على إعادة كمية الهيروين في الفئران بعد صدمة سيرا على الأقدام أو ضبط النفس التأكيد على20. وناقش المؤلف أنه غير ناجح لأنه تم اختبار هذه الضغوطات خارج قاعة الإدارة الذاتية في سياق مختلف. وفي المقابل، عند استخدام نموذج إعادة حزب الشعب الكمبودي، كان هناك إعادة إنشاء واضحة من حزب الشعب الكمبودي التي يسببها المورفين بعد استخدام نفس الإجهاد، وتطبيقها في سياق مختلف لأن حزب الشعب الكمبودي، وفي أوقات مختلفة (0 و 15 دقيقة بعد التأكيد على التعرض)18 .

وقد أظهرت عدة دراسات في الأدب طرقاً مختلفة للمخدرات وإعادة الناجمة عن الإجهاد. من ناحية، وقد تم الإبلاغ عن المخدرات التي يسببها إعادة في الجرذان والفئران باستخدام المورفين5،21،،من2223، الكوكايين24،25، الأمفيتامين26، 27, الإيثانول28،29، و 3 و 4 (ديوكسي)30. من ناحية أخرى، قد يكون التعرض للتأكيد على عامل حاسم في التعرض لإساءة استعمال المخدرات. يعرف الإجهاد زيادة مجزية آثار المخدرات7،،من3132 ودورهم في الانتكاس راسخة33،34. على سبيل المثال، هزيمة في التفاعلات الاجتماعية مع كونسبيسيفيك طلابية المورفين والكوكايين حزب الشعب الكمبودي18،19. وباﻹضافة إلى ذلك، الحيوانات المعرضة لتكرار الهزيمة الاجتماعية الأكثر تعرضا لآثار مكافأة مشروطة سوبثريشولد جرعة من الكوكايين، وإعادة الأفضلية بجرعات منخفضة جداً من الكوكايين7.

تطبيق نموذج إعادة حزب الشعب الكمبودي الذي هو وسيلة مفيدة والحساسة لتقييم إمكانية التعرض لانتكاسة في الحيوانات، ويسمح بتقييم مختلف التلاعب البيئية خفية، وهي المشغلات الرئيسية التي تهدد البشرية الانتكاس، مثل إعادة الناجم عن المخدرات أو الإجهاد.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

جميع الإجراءات التي تنطوي على الفئران ورعايتهم من الامتثال للقوانين الوطنية والإقليمية والمحلية واللوائح، التي وفقا للتوجيه 2010/63/الاتحاد الأوروبي الصادر عن "البرلمان الأوروبي" والمجلس في 22 سبتمبر 2010 المتعلق بحماية الحيوانات المستخدمة الأغراض العلمية. استخدام الحيوان ورعاية اللجنة من جامعة فالنسيا وافق على هذا البروتوكول.

1-المواد والإعداد لمكان مكيفة الأفضلية:

  1. التعامل مع الفئران 3 أيام قبل الاختبار لمدة 1-2 دقيقة. وينبغي اغتنامها قاعدة الذيل. وينبغي دعم الجسم إذا كان ذلك ممكناً. ويتم ذلك لتقليل الألم والكرب عند التعامل مع حيوان ومنع التدخل المتغيرات، مثل الإجهاد.
    ملاحظة: 1 الفئران الذكور كانوا يعملون 60 يوما (الشباب) تزن 35-40 غ في التجارب الحالية. يمكن أن يتم إعادة الناجمة عن المخدرات في الفئران من كلا الجنسين. ومع ذلك، فيما يتعلق بإعادة الناجمة عن الإجهاد، نموذج الهزيمة الاجتماعية صمم فقط للقوارض الذكور، كما تفعل الإناث لا تحفز استجابة عدوانية في الفئران المقيم.
  2. لتكييف مكان، استخدم مربعات متطابقة مع مقصورات متطابقة اثنين (30.7 سم طويلة × 31.5 سم واسعة × 34.5 سم ارتفاع) مفصولة بمنطقة رمادية وسط أصغر (13.8 طويلة × 31.5 سم واسعة × 34.5 عالية).
    ملاحظة: قد المقصورات القوام الكلمة مختلفة وألوان الجدار (الكلمة سلس في حجرة سوداء وأرضية الخام في واحدة بيضاء). كل حجرة من المربع CPP يحتوي على أربعة أشعة ضوء الأشعة تحت الحمراء، وستة في المقصورة المركزية. يسمح هذا تسجيل المعابر بين المقصورات والموقف للحيوان.
  3. تعيين حتى أضواء الغرفة (إيقاف أو تخفيض) كل يوم. استخدام أضواء حمراء (مستحسن)، كما الحيوانات لا يرون ذلك وأنه هو تخفيف المجرب (حوالي 40 لوكس قياس 1 متر فوق مستوى الكلمة).
  4. قم بإعداد البرنامج لتسجيل 15 دقيقة لتكييف ما قبل وما بعد اختبار (انظر الجدول للمواد اللازمة للبرمجيات) (الشكل 2)
  5. إعداد الكوكايين الحل المطلوب للتجربة كلها. حل هيدروكلوريد الكوكايين في 0.9% كلوريد الصوديوم (المالحة) في وحدة تخزين 0.1 مل/10 غرام من وزن الجسم. خليط دوامة ومخزن في 4 درجات مئوية حلول نهاية اليوم.
    ملاحظة: قد تختلف تركيزات الكوكايين تبعاً للغرض من الدراسة. إذا كان الهدف تقييم الجرعات سوبثريشولد من الكوكايين، يمكن استخدام تركيز 1 مغ/كغ، وهو غير فعال في مراقبة الحيوانات، كما يتضح من الدراسات السابقة24،35. إذا كانت جرعة فعالة هو الغرض، يمكن أن يكون تركيز 6 مغ/كغ المختارة، التي هي فعالة ولكن الحث على عدم إعادة24، أو تركيز 25 ملغ/كغ، وهي فعالة والحث على إعادة تفضيل19.
  6. اختبار الحيوانات خلال تلك المرحلة المظلمة واستخدام نفس مربع لكل الحيوانات عبر الأيام.
  7. جلب الحيوانات كل يوم إلى غرفة الاختبار في اقفاصها المنزل وتركهم دون عائق لمدة 15 دقيقة كفترة تعود على جميع الأصوات المتعلقة بالاختبار.

2-اختبار

  1. اكتساب
    ملاحظة: الإجراء "تكييف مكان"، غير متحيزة من حيث الأفضلية الأولى عفوية، يتكون من ثلاث مراحل: ما قبل تكييف وتكييف وتكييف ما بعد (الشكل 1).
    1. تكييف السابقة (قبل-ج) (3 أيام) (الشكل 2و الشكل 3، 4 الرقم)
      ملاحظة: هنا، قيمة محايدة من المقصورات في المربع CPP يتم تقييمه. قياس الوقت الذي يقضيه في كل حجرة وبعد مقارنتها مع أن تنفق في مقصورة واحدة في تكييف بعد انتهاء الاختبار.
      1. جلب الحيوانات إلى غرفة الاختبار وتترك لهم اعتادوا لمدة 15 دقيقة.
      2. تحقق من أن تتم إزالة المقصلة من القفص.
      3. قم بإعداد الكمبيوتر والبرنامج. أدخل الحيوان معرفات واضغط على الأمر "المحاكمة" و "بدء" (الشكل 2).
      4. ضع الماوس برفق في الدائرة الوسطى (رمادي حجرة) ومغادرة غرفة الاختبار مع الحد الأدنى من الضوضاء.
      5. يعود جميع الحيوانات في اقفاصها المنزل وحفظ البيانات عند الانتهاء من المحاكمة.
      6. السماح للفئران الوصول إلى كل الأجزاء الأخرى من الجهاز لمدة 15 دقيقة (900 ق) في اليوم الواحد على 3 أيام متتالية.
      7. في يوم 3، قم بتدوين الوقت الذي يقضيه في كل حجرة على مدى فترة s 900، وحفظه للتعيين من الأجزاء الأخرى في المرحلة القادمة (الشكل 3).
      8. قم بتعيين نصف الحيوانات في كل مجموعة الحصول على العقاقير أو المركبات في حجرة واحدة (مثلاً، أسود)، والنصف الآخر في حجرة أخرى (مثلاً، بيضاء) (الشكل 4).
        ملاحظة: يجب ضمان التوزيع النهائي للحيوانات أن نصف الحيوانات قد تم تعيينها إلى حجرة المفضل في البداية، والنصف الآخر إلى حجرة غير المفضلة. وبالإضافة إلى ذلك، تلقي نصف الحيوانات المخدرات في حجرة واحدة (على سبيل المثال، واحدة سوداء) والنصف الآخر في الآخر (في هذه الحالة، واحدة بيضاء).
      9. عشرات التوازن في الفريق داخل مقصورات على حد سواء وكذلك عبر المجموعات (اختبار مجموعة الاختلافات مع تحليل تباين (ANOVA)). كإرشادات تقريبية، يجب أن تكون القيم حول s 360-370 في اختبار ما قبل-C (الشكل 4). ملاحظة: ينبغي الكشف عنها لا توجد اختلافات كبيرة بين الوقت الذي يقضيه في المقصورات المخدرات إقران وإقران المركبة أثناء اختبار ما قبل-ج.
      10. استبعاد الحيوانات التي يحمل على النفور الشديد أو تفضيل لأي حجرة. النظر في النفور كإنفاق وقت أقل من 33% في حجرة، والنظر تفضيل عند الحيوانات تنفق أكثر من 67 في المائة من إجمالي الوقت في تلك المقصورة.
    2. التكييف (4 أيام) (الرقم 5)
      1. وزن الحيوانات واستخدام هذه الأوزان لجرعات الكوكايين أثناء تكييف.
      2. يعد الحقن بالكوكايين أو المالحة استناداً إلى وزن الجسم.
      3. حقن ماوس واحدة في وقت إينترابيريتونيلي (ip) والفور وضعه بلطف في حجرة سوداء أو بيضاء المعينة على مربع.
      4. بعد انقطاع دام ح 4، حقن جرعة المخدرات فورا قبل أن يقتصر الماوس إلى حجرة إقران المخدرات لمدة 30 دقيقة (الشكل 5).
      5. البديل من هذا الإجراء كل يوم، بدءاً بالكوكايين في أيام 1 و 3، والمالحة في أيام 2 و 4.
      6. تحقق من أن الولادة تتم في كلتا الحالتين قبل إغلاق الباب المقصلة التي تفصل بين المقصورات اثنين، مما يجعل المنطقة الوسطى لا يمكن الوصول إليها.
        ملاحظة: في هذه المرحلة، ليست هناك حاجة لإعداد برنامج كمبيوتر.
    3. بعد تكييف (وظيفة-ج) (يوم واحد)
      1. جلب الحيوانات إلى غرفة الاختبار وتترك لهم اعتادوا لمدة 15 دقيقة.
      2. إزالة الباب مقصلة فصل المقصورات اثنين.
      3. قم بإعداد الكمبيوتر والبرنامج. أدخل الحيوان معرفات واضغط على الأمر "تشغيل".
      4. سجل الوقت الذي يقضيه الفئران غير المعالجة في كل حجرة أثناء فترة مراقبة s 900.
      5. عند الانتهاء من المحاكمة، يعود جميع الحيوانات في اقفاصها المنزل وحفظ البيانات.
      6. نعتبر أن المخدرات حدت بتفضيل المكان إذا كان الوقت الذي يقضيه في حجرة إقران المخدرات أثناء الوظيفة-C أكبر بكثير مما في اختبار ما قبل-ج. في حالة حدوث العكس، تنظر نفور لحجرة إقران المخدرات.
  2. انقراض
    1. إجراء جلسة انقراض التنزيلات في جميع الفئات/الحيوانات التي وضعت تفضيلهم لحجرة إقران المخدرات.
    2. ضع الحيوان في الجهاز (بدون المقصلة) لمدة 15 دقيقة (نفس الاختبارات قبل وبعد-ج) (الشكل 1).
      ملاحظة: إذا كانت الجرعة المستخدمة في حزب الشعب الكمبودي ارتفاع (25 ملغ/كغ)، أداء دورة انقراض واحدة كل أسبوع. إذا كانت جرعة سوبثريشولد المستخدمة (1 مغ/كغ)، ثم تنفيذ دورتان الانقراض في الأسبوع (مثلاً الاثنين والخميس).
    3. النظر في تفضيل تسقط عند عدم إظهار البيانات من الاختبار انقراض الاختلافات فيما يتعلق باختبار ما قبل-ج، ولكنها تبين الاختلافات فيما يتعلق باختبار وظيفة-ج.
    4. كرر الاختبار 24 ساعة في وقت لاحق من أجل تأكيد الانقراض.
  3. إعادة حزب الشعب الكمبودي
    1. إعادة المستحثة فتيلة
      1. تقييم آثار فتيلة جرعة من الكوكايين 24 ساعة بعد أن تأكدت الانقراض.
        ملاحظة: هي جرعات فتيلة نصف الجرعة السابقة التي تلقت الحيوان أثناء تكييف. إعادة الاختبار يخضع البروتوكول نفسه كما هو الحال في ما قبل-ج واختبارات وظيفة-ج، إلا أن الحيوانات تلقي جرعة الكوكايين في وحدة غير 15 دقيقة قبل الاختبار. يمكن أن تعزز فعالية فتيلة المخدرات تدفع بإعادته إلى وظيفته بعد تجارب متكررة الانقراض/إعادة23، على الرغم من أن النظام جرعات لا يبدو أن تلعب دوراً في النتائج التي تم الحصول عليها36.
      2. جلب الحيوانات إلى غرفة مختلفة من غرفة الاختبار (مكان غير الوحدات) (الشكل 6).
      3. حقن لهم بنصف الجرعة السابقة من الكوكايين (مثلاً، إذا كانت مكيفة الحيوانات مع الكوكايين 25 مغ/كغ، جرعة فتيلة ستكون 12.5 مغ/كغ).
      4. تجلب لهم العودة إلى فيفاريوم بهم لمدة 15 دقيقة.
      5. أخذها إلى غرفة الاختبار ووضع الحيوانات في الجهاز فورا (بدون أبواب مقصلة فصل المقصورات) لمدة 15 دقيقة (نفس ما قبل واختبارات وظيفة-ج).
      6. تنظر الفرق بين الوقت الذي يقضيه في حجرة إقران المخدرات خلال الدورة الأخيرة من الانقراض وإعادة الاختبار كمقياس لدرجة إعادة تفضيل الناجم عن المخدرات في ثوان.
      7. كرر الإجراء الانقراض-إعادة كل مرة مع تقليل الجرعات حتى يتأكد أن تكون غير فعالة.
        ملاحظة: يمكن استخدام عنصر تحكم حقن مالحة للتحكم في قدرة فتيلة الكوكايين (وليس لحقن نفسه) للحث على إعادة.
    2. إعادة الناجمة عن الإجهاد
      1. تقييم آثار إعادة الإجهاد الناجم عن 24 ساعة بعد أن تأكدت الانقراض
        ملاحظة: إعادة الاختبارات هي نفسها كتلك التي نفذت في وظيفة-ج (أمبوليشن مجاناً لمدة 15 دقيقة)، فيما عدا أنه يتم اختبار الحيوانات 15 دقيقة بعد هزيمة الاجتماعي في ناهضة تواجه (الشكل 6)
      2. أخذ الحيوانات إلى غرفة مختلفة من الغرفة حزب الشعب الكمبودي.
      3. ضع الماوس تجريبية مع جنس الخصم عدوانية مطابقة لسن متساوية ووزن الجسم في القفص البلاستيك (الشكل 6).
        ملاحظة: يتكون اللقاء ناهضة لاختبار 10 دقيقة في قفص بلاستيكية شفافة محايدة (23x13.5x13cm) مع نتيجة هزيمة للماوس التجريبية. إعداد الخصم العدوانية، أولاً عزل الحيوانات المختلفة التي تطابق في العمر ووزن الجسم كالفئران التجريبية لمدة 3 أسابيع. تدريبها على اكتساب الخبرة القتالية واختبارها لمستويات عالية من السلوك العدواني في الإقليم. للحصول على كونسبيسيفيكس العدوانية، الفئران يجب أن تكون معزولة لمدة 3 أسابيع على الأقل، وثم تدريب في العدوانية والهجوم على السلوكيات. ويتم تدريب الحيوانات في بيئة محايدة، تواجههم في أزواج. نسمح لهم لدغة الخصم 2 أو 3 المرات وإخراجهم من القفص، تنتهي التدريب دائماً قبل واحد من اثنين من الفئران ويبين الطلب، حيث أن الخبرة المكتسبة من هذا اللقاء يعزز السلوك العدواني. بعد تعرضه لاعتداء (التهديد والهجوم من كونسبيسيفيك العدوانية)، ينبغي أن يقدم الفئران التجريبية الأبطال/الفرار والسلوك الدفاعي/مستسلمة. المعيار هو تبني موقف محدد من الهزيمة، وتتميز بوضع رأسي مستسلمة ويعرّج فوريباوس، رئيس الزاوية تعدلها بالزيادة، وتراجع عن آذان (الشكل 6). حسب بيرك et al.، 2016، ونعتبر أن إنهاء المواجهة الاجتماعية في وقت سابق إذا كان الدخيل يعرض موقف ضعيف مستسلمة > 8 s أو إذا وقع 13 الهجوم لدغ. وثمة خيار آخر للحيوانات الشاشة دون التعرض لخطر الإصابة كبيرة يمكن أن وتيرة هذا الحيوان في حاوية شبكة مع وجود ثقب، ليس كبيرا بما يكفي للحيوان أما لتمرير.  يمكن أن يتم الكشف عن العدوان دون إخضاع الحيوانات لتوجيه السلوك العدواني.  إذا حيوان يديم إصابة بجرح 1 سم في القطر و/أو التعرض المباشر للعضلات، فإنه يتم استبعادها من الدراسة وينبغي أن euthanized.
      4. بعد 10 دقائق من لقاء ناهضة، تأخذ الفئران في غرفة الاختبار ووضع الحيوانات في الجهاز حزب الشعب الكمبودي فورا (بدون أبواب مقصلة فصل المقصورات) لمدة 15 دقيقة (نفس ما قبل واختبارات وظيفة-ج).

3. التحليل الإحصائي

ملاحظة: يجب أن يكون حجم عينة مثالية كحد أدنى حيوانات 15 كل مجموعة.

  1. تحليل يعني الوقت المستغرق في حجرة إقران المخدرات للفريق عن طريق ANOVA مختلطة مع واحد بين متغير، العلاج، مع مستويين (مجموعة السيطرة على المجموعة التجريبية، مثال للفريقين في الشكل 7 ج)، وواحدة داخل المتغير – الأيام، مع مستويات 2 (قبل-ج ووظيفة-ج).
    ملاحظة: في مجموعة مراقبة، الحيوانات تلقي المخدرات لكن قد لا التلاعب البيئي. من ناحية أخرى، تتعرض الحيوانات في المجموعة التجريبية لظروف بيئية مختلفة. قارن بين الوقت الذي يقضيه في حجرة إقران المخدرات في يوم آخر-ج مع الاحترام قبل-ج بإجراء اختبار لمعرفة ما إذا كان هناك أي اختلافات كبيرة في حساسية للدواء.
  2. وبالإضافة إلى ذلك، إجراء تحليلات وظيفة مخصصة بونفيروني للتحقق من أي من النقاط الهامة.
  3. تحليل البيانات المتعلقة بقيم الانقراض وإعادته إلى وظيفته في مجموعات أن تفضيل المتقدمة عن طريق Student´s تي-الاختبارات على مواصلة إجراء إعادة الأهلية الانقراض خلال فترة التجربة، ولكن في اللحظة الأخيرة، تحليل لهم مع ANOVA مع داخل المتغير (الأيام) مع العدد من المستويات تبعاً لكل مجموعة.
    ملاحظة: عندما يتم زيادة عدد المقارنات، تلك التي سوف تكون كبيرة بالصدفة أيضا زيادة. على هذا النحو، لتجنب الحصول على إيجابيات كاذبة (النوع 1 أخطاء) ونحن 'تصحيح' فالقيمه مما يجعل الاختبار أكثر تحفظا مع تصحيح بونفيروني لاختبارات t متعددة. ومع ذلك، ينبغي للاختبار، وإعادة المقارنة بين انقراض آخر اختبار وإعادة اختبار. ولذلك، ليس هناك حاجة لتصحيح.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

أولاً، تظهر نتائج الممثل من إعادة الناجمين عن فتيلة والإجهاد في الشكل 7 استخدام الفئران الذكور OF1 الكبار.

البيانات في الشكل 7أ-ب تمثل الوقت ينفق في compartment(s) إقران المخدرات في ما قبل وحللت اختبار وظيفة-ج مع أ تدابير متكررة ANOVA مع أيام متغير داخل مواضيع (مقارنة ج قبل وبعد-ج). وأظهرت النتائج تأثير كبير من الأيام متغير [F(1,34) = 51.179؛ ف < 0.001]، كما وضعت جميع الحيوانات تفضيل اليوم وظيفة-C بالمقارنة إلى ما قبل-جيم. جميع الحيوانات كانت مكيفة مع الكوكايين 25 مغ/كغ، وعندما تحقق الزوال، تلقي فريق واحد فتيلة جرعة من الكوكايين 12.5 مغ/كغ لاختبار إعادة (الشكل 7 أ) وأخرى تعرض لها تفاعل الاجتماعي الذي التجريبية الحيوان هزم خصم عدوانية (الشكل 7). تم اختبار 15 دقيقة بعد هذين الحدثين، الحيوانات في خانة حزب الشعب الكمبودي على المقابلة.

إعادة المستحثة فتيلة (الشكل 7 أ) تعرضت بعد ذلك إلى تقليل جرعات فتيلة (نصف واحد السابقة) حتى جرعة فتيلة يتأكد أن تكون غير فعالة. كانت الجرعات: 12.5 6.25، 3.125 و 1.56 ملغم/كغم من الكوكايين. وكشف الاختبار t Student´s أثر كبير على إعادة الكوكايين 12.5 مغ/كغ فيما يتعلق بالدورة الانقراض (إحصائية t (t) = 20.589، درجات الحرية (العاصم) = 17؛ ف < 0.001) والجرعات اللاحقة (6.25 ملغ/كغ: t = 18.356؛ 3.125 ملغم/كغم: t = 14.260؛ 1.56 مغ/كغ: t = 16.934 العاصم = 17؛ ف < 0.001). حمل فتيلة مع 0.78 ملغم/كغم لا إعادة.

فيما يتعلق بإعادة الناجمة عن الإجهاد (انظر الشكل 7)، يجري عرضه لحيوان عدوانية وهزم 15 دقيقة قبل الاختبار يؤدي إلى إعادة المفصولين تفضيل انطفأت سابقا (t = 26.810؛ ومكسيكو = 15؛ ف < 0.001)19 .

التلاعب البيئية الأخرى، مثل معاناة الهزيمة الاجتماعية المتكررة قبل إجراءات حزب الشعب الكمبودي، تعديل الآثار مكافأة سوبثريشولد جرعة من الكوكايين (الشكل 7 ج). A مختلطة ANOVA مع بين متغير "الإجهاد" وداخل متغير قد أنجز "الأيام"، وكان هناك أثر كبير للتفاعل الإجهاد x يوما [F(1,29) = 4.144؛ ف < 0.05]. الحيوانات هزم اجتماعيا فقط أظهرت تفضيلها لحجرة إقران المخدرات مع جرعة سوبثريشولد من الكوكايين، وهو ما ثبت عدم فعاليتها في الحيوانات النموذجية7. وباﻹضافة إلى ذلك، أعادت الحيوانات هزم اجتماعيا بعد انقراض الأفضلية، تفضيلها مع فتيلة الكوكايين 0.5 ملغ/كغ فقط (t = 25.484 العاصم = 17؛ ف < 0.001).

وثانيا، وكنتيجة سلبية، يمكننا أن نرى كيف يمكن منع إعادة جانب تفاعل الاجتماعي إيجابي مع كونسبيسيفيك غير عدواني (الشكل 8 أ). ولذلك، من المهم لتقييم ما إذا كانت الحيوانات هي هزيمة أو لا بعد اجتماعية تواجه37.

مثال آخر من النتائج السلبية التي تمنع إعادة يمكن التلاعب الغذائية، مثل كمية عالية من الدهون حمية قبولا. أولاً، كشف تحليل ANOVA تأثير الأيام متغير [F(1,26) = 21.527؛ ف <.0.001]، كما وضعت كلتا المجموعتين الأفضلية لحجرة إقران المخدرات (ف < 0.01) (8b الشكل). بعد الزوال، تظهر النتائج أن الحيوانات التي تحولت إلى حمية عالية الدهون بعد اختبار وظيفة-ج انخفض حساسيتها لإعادة المستحث فتيلة المخدرات، كما أنهم عدم إعادة التفضيل مع الكوكايين 6.25 ملغ/كغ الجرعة38.

Figure 1
رقم 1: الإجراء التجريبي "تفضيل المكان مكيفة". وهو يتألف من ثلاث مراحل: تكييف قبل وتكييف وتكييف ما بعد. وهناك 4 أيام تكييف فيها الإجراء هو تناوبت كل يوم، ابتداء من الكوكايين في أيام 1 و 3 ومع المركبات في أيام 2 و 4. ثم، يتم تنفيذ دورات انقراض وإعادته إلى وظيفته. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

Figure 2
رقم 2: دورات استخدام البرمجيات للاختبارات ج قبل وبعد-ج حيث الوقت الذي يقضيه في كل حجرة ويتم تسجيل عدد الإدخالات. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

Figure 3
الشكل 3: البيانات بعد test. ج قبل وبعد-ج وهنا سجل البيانات التي تم الحصول عليها أثناء الاختبار. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

Figure 4
الشكل 4: التعيين غير منحازة للحيوانات إلى المقصورات للمرحلة القادمة من تكييف- تأخذ البيانات اليوم اختبار ج ما قبل الأخير في المقصورات أبيض وأسود. يتم تعيين نصف الحيوانات للحصول على الدواء أو مركبة في حجرة واحدة (أسود أو أبيض)، والنصف الآخر في حجرة أخرى. استبعاد الحيوانات التي تظهر النفور الشديد أو تفضيل. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

Figure 5
الرقم 5: الإحالة النهائية للمركبات والكوكايين إقران دورات. يظهر هذا الشكل التناوب بناء على أمر من الأزواج. في أيام 1 و 3، حيوان (مثلاً، 1، 1) يتعرض أولاً لحجرة إقران الكوكايين (واحدة بيضاء)، وبعد أربع ساعات، يتعرض للمقصورة المزدوجة المركبة (واحدة سوداء). في أيام 2 و 4، يتم عكس ترتيب أزواج، والحيوان يتعرض أولاً لإقران مركبة المقصورة (أسود)، وبعد أربع ساعات، لإقران الكوكايين المقصورة (أبيض). هذا الإجراء غير متحيز، ويمكن أن تجري دورات تكييف وازنت، متزامنة مع اثنين من الحيوانات باستخدام كلا الأجزاء الأخرى من نفس مربع (مثلالحيوانات 1.1 و 2.4، 3.1 و 1-3)، مما يسمح لنا بخفض الوقت المخصص الإجراء التجريبي. علما أن هذه الأزواج من الحيوانات اتباع الترتيب المعكوس من الازدواجات يمر بمرحلة تكييف. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

Figure 6
رقم 6: نموذجين لإعادة- () إعادة المستحثة فتيلة وإعادة الناجمة عن الإجهاد (ب). () الحيوانات تلقي تعاطي المخدرات بحقن في غرفة غير الوحدات ويوجه فيفاريوم؛ 15 دقيقة في وقت لاحق أنها يتم اختبارها في مربع حزب الشعب الكمبودي. (ب) الحيوانات هي هزم في مواجهة ناهضة في غرفة غير الوحدات لمدة 10 دقائق، وبعد ذلك، يتم اختبارها في مربع حزب الشعب الكمبودي. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

Figure 7
رقم 7: نتائج إيجابية الممثل. فتيلة () وإعادة الناجمة عن الإجهاد (ب) بعد 25 ملغ/كغ الكوكايين حزب الشعب الكمبودي. (ج) آثار الهزيمة الاجتماعية على آثار مجزية سوبثريشولد جرعة من الكوكايين (1 مغ/كغ). تمثل الأشرطة يعني (± SEM) الوقت بالثواني التي أنفقت في حجرة إقران المخدرات أثناء تكييف ما قبل (أبيض) وتكييف ما بعد (أسود)، الماضي الدورة الانقراض (رمادي فاتح) وإعادة (رمادي داكن). وتم تقييم إعادة الاختبار 15 دقيقة بعد جرعة فتيلة من نصف الجرعة السابقة الواردة. * ف < 0.05؛ * * ف < 0.01؛ ف < 0.001 فرق كبير مقابل ما قبل-ج (ANOVA مع داخل-مواضيع المتغير يوما (مقارنة ج قبل وبعد-ج) أو الدورة السابقة من الانقراض (اختبار t Student's). وقد تم تعديل هذه الأرقام من 7،19. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

Figure 8
الشكل 8: النتائج السلبية الممثل. آثار واقية التلاعب البيئي على آثار مجزية من الكوكايين. () الآثار المترتبة التفاعل الاجتماعي الإيجابي قبل إعادة الاختبار. (ب) آثار حمية عالية الدهون خلال فترة انقراض كله، وإعادة. تم تغذية مجموعة المراقبة مع اتباع نظام غذائي قياسي (13 في المائة من السعرات الحرارية من 67% سعره حرارية من الكربوهيدرات، والدهون والسعرات الحرارية 20% من البروتين؛ مجموع 2.9 كيلو كالوري/غرام) ومجموعة حمية عالية الدهون (45% سعره حرارية من 36% سعره حرارية من الكربوهيدرات والدهون، وسعره حرارية 19% من البروتين؛ مجموع 4.6 كيلو كالوري/غرام). تمثل الأشرطة يعني (± SEM) الوقت بالثواني التي أنفقت في حجرة إقران المخدرات أثناء تكييف ما قبل (أبيض) وتكييف ما بعد (أسود)، الماضي الدورة الانقراض (رمادي فاتح) وإعادة (رمادي داكن). تم تقييم إعادة الاختبار 15 دقيقة بعد جرعة فتيلة من نصف الجرعة المستلمة السابقة. * ف < 0.05؛ * * ف < 0.01؛ فرق كبير مقابل ما قبل-ج (ANOVA مع داخل-مواضيع المتغير يوما (مقارنة ج قبل وبعد-ج) أو الدورة السابقة من الانقراض (اختبار t Student's). وقد تم تعديل هذه الأرقام من 37،38. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

النقطة الرئيسية لبحوث الإدمان على المخدرات هو تطوير العلاجات التي تقلل من حنين، وبالتالي الحد من تعرض لانتكاسة. وبفضل إعادة نموذج نموذج حزب الشعب الكمبودي، فمن الممكن لدراسة تأثير العوامل الإجرائية والبيئية المختلفة التي تعدل الانتكاس، الذي يشكل أولوية للبحوث في المستقبل. وهناك بعض النقاط الهامة للنظر، كما أن نموذج حزب الشعب الكمبودي هو اختبار حساس جداً للعوامل البيئية.

التعديلات واستكشاف الأخطاء وإصلاحها: ينبغي تعديل إصدار حزب الشعب الكمبودي بنموذج إعادة تبعاً للمخدرات الفائدة. وهناك عوامل مختلفة قد تؤثر على حجم الأفضلية مشروطة، مثل مدة وعدد دورات تكييف. عادة ما يتراوح عدد الجمعيات من واحدة إلى ست، مع أربعة يجري الأكثر شيوعاً. مدة الاختبارات تكييف ينشأ وفقا لخصائص الدواء والدوائية لها.

وعادة ما تنطوي دراسات حزب الشعب الكمبودي العديد من المحاكمات، ولذلك فمن المفيد استخدام البروتوكولات التي تقلل من الوقت اللازم. طريقة واحدة لتحقيق هذا الهدف الحد من عدد المحاكمات، وطريقة أخرى لتنفيذ دورتين لتكييف كل يوم، كما مبين في هذا البروتوكول. وفي هذه الحالة، من الضروري ضمان أن آثار المخدرات من الدورة السابقة لا تطول إلى هذا الثاني الدورة39، الذي السبب في الفاصل الزمني لأربع ساعات بين الكوكايين-اختير الدورة المركبة. على سبيل المثال، ينبغي أن يكون توقيت الاقتران في حالة الكوكايين أثناء مرحلة تكييف كل 24 ساعة لمدة 4 أيام مع الأقران مدة 30 دقيقة. على العكس من ذلك، ينبغي أن تكون الدورة وقت إجراء تكييف الإيثانول كل 48 ساعة، ما مجموعة 8 أيام، 1 تكييف الدورة في اليوم الواحد، ومتناوبة مركبة و EtOH، وأخيراً بعد ما مجموعة 4 أزواج EtOH. مزاوجة الإيثانول ينبغي أن يكون مدة قصيرة، مثل 5 دقائق، كما يمكن أن تنتج المزيد من الوقت الدول البرود. جرعة فعالة تتراوح بين 1-2 غ/كغ وجرعة سوبثريشولد هي 0.75 غ/كغ40. ينبغي أن يكون رد فعل فتيلة نصف الجرعة السابقة التي وردت، وينبغي أن يكون الجهاز نفسه.

ومع ذلك، اختيار القيام بدورات 1 أو 2 يوميا يمكن أن تؤثر على النتائج في بعض الأدوية الخاصة للاعتداء. على سبيل المثال، في حالة المستحثة بعقار MDMA CPL للبروتوكول الثاني-الدورة، تفضيل مكيفة في تكييف ما بعد لا يحترم، بينما هذا يمكن الحصول عليها عن طريق إجراء ارتباط واحد كل30يوما، حيث يتعين أن تدير MDMA أيضا ينبغي أن تكون كل 48 ساعة، ولكن مدة الدورة تكييف 30 دقيقة.

هناك طريقتان الرئيسي الانقراض التي يمكن تشغيلها بعد إنشاء حزب الشعب الكمبودي، أما الحقن اليومية مركبة حصر الحيوان في المخدرات سابقا والسيارة مكيفة المقصورات41،42، 43، أو بتكرار الاختبار حزب الشعب الكمبودي، والسماح للحيوانات باستكشاف المقصورات الثلاث دون المقصلة حتى لم يعد يلاحظ تفضيل7،18،،من3038. في هذا البروتوكول، استخدمنا هذه الأخيرة، لأنها نوع من الانقراض عفوية دون أي تلاعب دوائية أو السلوكية المتعلقة بتكييف (أكثر مماثلة لتلك التي تحدث في الإنسان مدمن)، لكن كلا الأسلوبين تكون مقبولة و صحيح، كما أظهرت الأدب لسنوات.

قيود تقنية: تحديد أهم نموذج حزب الشعب الكمبودي، ونموذج إعادة أنها حساسة جداً لأي تغير البيئة. ولذلك، يجب أن تبقى ظروف الغرفة وفيفاريوم مستقرة وثابتة خلال الإجراء بأكمله. وينبغي إيلاء عناية خاصة لجوانب مثل الذين يعيشون في نفس الغرفة مع زملاء الجنس الآخر، أقفاص مع القطع الأثرية مثل العجلات التي تجعل ضوضاء محددة وثابتة، أو على ضوء الظروف. بالإضافة إلى التحكم في هذه المتغيرات، دور الباحث أيضا حرجة، كما يمكن الحث على زيادة مستويات التوتر الحيوانات وتتداخل مع النتائج.

أهمية فيما يتعلق بالأساليب القائمة: فيما يتعلق بأساليب أخرى، في إصدار حزب الشعب الكمبودي من طراز إعادته إلى وظيفته، وهو الباحث الذي يدير المخدرات للحيوان، وعلى النقيض من نماذج الإدارة الذاتية التي تقيم الدافع animal´s لأخذ الدواء. من المهم أن نأخذ هذا في الاعتبار. وهذا يعني أن نجري تقييما لا الدافع من خلال استجابة استثابي ولا آثار المخدرات يعزز الأولية. وكما ذكرنا، هو حزب الشعب الكمبودي نموذجا مفيداً لتقييم الدور الحاسم الذي تؤديه الرموز البيئية على الانتكاس في اضطرابات تعاطي مواد الإدمان، والتي هي في الواقع من العوامل الرئيسية التي تعدل الانتكاس في البشر.

تطبيقات المستقبل: التطبيقات المستقبلية للنموذج إعادة حزب الشعب الكمبودي الذي ينبغي أن توجه إلى الاحتضان ما يسمى من حنين، الذي يتألف من زيادة مطردة في مفاعليه جديلة بعد الامتناع عن المخدرات، ومحاكاة شغف في البشر. في الوقت الحاضر، يعرف الكثير عن هذا في نموذج حزب الشعب الكمبودي. واقترح دراسة واحدة فقط بضع سنوات مضت، أن حزب الشعب الكمبودي ويمكن أيضا قياس هذه الفترة الحضانة44. في الآونة الأخيرة، وأنها قيمت أم لا يمكن زيادة منبهات البيئية المقترنة بالمورفين في حزب الشعب الكمبودي الاستجابة السلوكية على مدى فترة انسحاب45. وجدت هذه الدراسة أن عدد الإدخالات للمقصورات حزب الشعب الكمبودي تتزايد بمرور الوقت، مما يعكس في الحضانة حنين ومما يوحي بأن مكافأة ذكريات وحنين المخدرات يمكن تمييزها في نموذج حزب الشعب الكمبودي.

الخطوات الحرجة: هناك العديد من الخطوات الهامة في البروتوكول. من أجل التأكيد على أن الحيوانات أعادت تفضيلها، ينبغي أن تعكس البيانات الانقراض انقراض حقيقي للأفضلية، الذي أكد قبل إعادة الاختبار. لا ينبغي أن تظهر البيانات من الاختبار انقراض الاختلافات فيما يتعلق باختبار ما قبل-C ولكن فيما يتعلق باختبار وظيفة-ج.

فيما يتعلق بإصدار إعادة الاجتماعية الناجمة عن الإجهاد، ونحن ينبغي أن أكدت أن الحيوان تم هزم فعلا، منذ لقاء اجتماعية إيجابية التي لا تنتهي في هزيمة يبين آثار واقية تمنع إعادة المكان الأفضلية للكوكايين. إذا لم تكن هذه الحيوانات التجريبية المهزومة، سيتم استبعادهم من الدراسة. نوصي بتسجيل وتقييم اللقاء ناهضة، قياس زمن الوصول للسلوك العدواني أو تقديم السلوك وعدد الهجمات والوقت الذي يقضيه في كل من تلك السلوكيات. ونحن نعتبر أن الحيوانات التجريبية هزم عندما يتلقى الحد ني هجمات 2 (لدغ) ويظهر دلائل على تقديم (كما هو موضح في الشكل 6). وفي جميع الحالات، يستمر اللقاء 10 دقيقة.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

الكتاب ليس لها علاقة بالكشف عن.

Acknowledgments

محافظة فالنسيا، بروميتيوي/2014/063؛ وزارة الصحة والخدمات الاجتماعية والمساواة. وفد الحكومة للخطة الوطنية المتعلقة بالمخدرات، ومشاريع البحوث بشأن المخدرات التبعيات، 2014I007؛ وزارة الاقتصاد و "القدرة التنافسية" (مينيكو) و RD16 الصحة معهد كارلوس الثالث، وشبكة من الإدمان اضطرابات (RTA) RD12/0028/0005/17/07/00 والاتحاد الأوروبي و FEDER الأموال "أونا مانيرا de hacer Europa" PSI2014-51847-r.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
MONPRE 2Z software CIBERTEC S.A., Spain N/A
Identical Plexiglas boxes with two equal sized compartments separated by a grey central area. CIBERTEC S.A., Spain N/A The compartments have different colored walls (black vs white) and distinct floor textures (fine grid in the black compartment and wide grid in the white one). All boxes are equipped with four infrared light beams in each compartment of the box and six in the central area which allow the recording of the position of the animal and its crossings from one compartment to the other.
Cocaine hydrochloride Laboratorios Alcaliber S.A., Madrid, Spain N/A
Animals: mice of the OF1 outbred strain Charles River, Barcelona Spain N/A Male mice who arrive to the laboratory on PND 42 and on PND 60 perform the CPP test. These animals are specially indicated for social defeat and aggression models.
Standard Diet- Teklad Global Diet 2014 Supplied by Harlan Laboratories Models, S. L. (Barcelona, Spain) 13 kcal % fat, 67 kcal % carbohydrates and 20% kcal protein; 2.9 kcal/g
High fat diet TD.06415 45 kcal % fat, 36 kcal % carbohydrates and 19% kcal protein; 4.6 kcal/g

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Bardo, M., Bevins, R. Conditioned place preference: what does it add to our preclinical understanding of drug reward? Psychopharmacology. 153, 31 (2000).
  2. Tzschentke, T. M. Review on CPP: Measuring reward with the conditioned place preference (CPP) paradigm: update of the last decade. Addiction biology. 12 (3-4), 227-462 (2007).
  3. Aguilar, M. A., Rodríguez-Arias, M., Miñarro, J. Neurobiological mechanisms of the reinstatement of drug-conditioned place preference. Brain research reviews. 59 (2), 253-277 (2009).
  4. García-Pardo, M. P., Roger-Sánchez, C., De la Rubia Ortí, J. E., Aguilar, M. A. Animal models of drug addiction. Adicciones. 12 (0), 823 (2017).
  5. Manzanedo, C., Aguilar, M. A., Rodrı́guez-Arias, M., Miñarro, J. Effects of dopamine antagonists with different receptor blockade profiles on morphine-induced place preference in male mice. Behavioural brain research. 121 (1), 189-197 (2001).
  6. Robbins, T. W. The acquisition of responding with conditioned reinforcement: effects of pipradrol, methylphenidate, d-amphetamine, and nomifensine. Psychopharmacology. 58 (1), 79-87 (1978).
  7. Montagud-Romero, S., Nuñez, C., Blanco-Gandia, M. C., Martínez-Laorden, E., Aguilar, M. A., Navarro-Zaragoza, J., et al. Repeated social defeat and the rewarding effects of cocaine in adult and adolescent mice: dopamine transcription factors, proBDNF signaling pathways, and the TrkB receptor in the mesolimbic system. Psychopharmacology. , (2017).
  8. Pavlov, I. P. Conditioned Reflexes. , Oxford University Press. Oxford. (1927).
  9. Yahyavi-Firouz-Abadi, N., See, R. E. Anti-relapse medications: preclinical models for drug addiction treatment. Pharmacology & therapeutics. 124 (2), 235-247 (2009).
  10. Epstein, D. H., Preston, K. L., Stewart, J., Shaham, Y. Toward a model of drug relapse: an assessment of the validity of the reinstatement procedure. Psychopharmacology. 189 (1), 1-16 (2006).
  11. Geyer, M. A., Markou, A. Animal models of psychiatric disorders. Psychopharmacology: the Fourth Generation of Progress. Bloom, F. E., Kupfer, D. J. , Raven. New York. 787-798 (1995).
  12. De Wit, H. Priming effects with drugs and other reinforcers. Experimental and Clinical Psychopharmacology. 4 (1), 5 (1996).
  13. Wang, B., Luo, F., Zhang, W. T., Han, J. S. Stress or drug priming induces reinstatement of extinguished conditioned place preference. Neuroreport. 11 (12), 2781-2784 (2000).
  14. Shalev, U., Erb, S., Shaham, Y. Role of CRF and other neuropeptides in stress-induced reinstatement of drug seeking. Brain research. 1314, 15-28 (2010).
  15. Bossert, J. M., Marchant, N. J., Calu, D. J., Shaham, Y. The reinstatement model of drug relapse: recent neurobiological findings, emerging research topics, and translational research. Psychopharmacology. 229 (3), 453 (2013).
  16. Weiss, F. Neurobiology of craving, conditioned reward and relapse. Current opinion in pharmacology. 5 (1), 9-19 (2005).
  17. Mueller, D., Stewart, J. Cocaine-induced conditioned place preference: reinstatement by priming injections of cocaine after extinction. Behavioural brain research. 115 (1), 39-47 (2000).
  18. Ribeiro Do Couto, B., Aguilar, M. A., Manzanedo, C., Rodriguez-Arias, M., Armario, A., Miñarro, J. Social stress is as effective as physical stress in reinstating morphine-induced place preference in mice. Psychopharmacology. 185 (4), 459-470 (2006).
  19. Titomanlio, F., Manzanedo, C., Rodríguez-Arias, M., Mattioli, L., Perfumi, M., Miñarro, J., Aguilar, M. A. Rhodiola rosea impairs acquisition and expression of conditioned place preference induced by cocaine. Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine. , (2013).
  20. Shalev, U., Highfield, D., Yap, J., Shaham, Y. Stress and relapse to drug seeking in rats: studies on the generality of the effect. Psychopharmacology. 150 (3), 337-346 (2000).
  21. Lu, L., Ceng, X., Huang, M. Corticotropin-releasing factor receptor type 1 mediates stress-induced relapse to opiate dependence in rats. Neuroreport. 11 (11), 2373-2378 (2000).
  22. Ribeiro Do Couto, B., Aguilar, M. A., Manzanedo, C., Rodriguez-Arias, M., Miñarro, J. Reinstatement of morphine-induced conditioned place preference in mice by priming injections. Neural Plast. 10, 279-290 (2003).
  23. Do Couto, B. R., Aguilar, M. A., Rodriguez-Arias, M., Miñarro, J. Long-lasting rewarding effects of morphine induced by drug primings. Brain research. 1050 (1), 53-63 (2005).
  24. Maldonado, C., Rodriguez-Arias, M., Castillo, A., Aguilar, M. A., Miñarro, J. Gamma-hydroxybutyric acid affects the acquisition and reinstatement of cocaine-induced conditioned place preference in mice. Behav. Pharmacol. 17, 119-131 (2006).
  25. Maldonado, C., Rodriguez-Arias, M., Castillo, A., Aguilar, M. A., Miñarro, J. Effect of memantine and CNQX in the acquisition, expression and reinstatement of cocaine-induced conditioned place preference. Prog. Neuropsychopharmacol. Biol. Psychiatry. 31, 932-939 (2007).
  26. Cruz, F. C., Marin, M. T., Planeta, C. S. The reinstatement of amphetamine-induced place preference is long-lasting and related to decreased expression of AMPA receptors in the nucleus accumbens. Neuroscience. 151, 313-319 (2008).
  27. Li, S. M., Ren, Y. H., Zheng, J. W. Effect of 7-nitroindazole on drug-priming reinstatement of D-methamphetamine-induced conditioned place preference. Eur. J. Pharmacol. 443, 205-206 (2002).
  28. Font, L., Miquel, M., Aragon, C. M. Involvement of brain catalase activity in the acquisition of ethanol-induced conditioned place preference. Physiol. Behav. 93, 733-741 (2008).
  29. Roger-Sánchez, C., Aguilar, M. A., Rodríguez-Arias, M., Aragon, C. M., Miñarro, J. Age-and sex-related differences in the acquisition and reinstatement of ethanol CPP in mice. Neurotoxicology and teratology. 34 (1), 108-115 (2012).
  30. Daza-Losada, M., Do Couto, B. R., Manzanedo, C., Aguilar, M. A., Rodríguez-Arias, M., Miñarro, J. Rewarding effects and reinstatement of MDMA-induced CPP in adolescent mice. Neuropsychopharmacology. 32 (8), 1750-1759 (2007).
  31. Will, M. J., Watkins, L. R., Maier, S. F. Uncontrollable stress potentiates morphine's rewarding properties. Pharmacol. Biochem. Behav. 60, 655-664 (1998).
  32. Der-Avakian, A., Will, M. J., Bland, S. T., Deak, T., Nguyen, D. T., Schmid, M. J., Spencer, R. L., Watkins, L. R., Maier, S. F. Surgical and pharmacological suppression of glucocorticoids prevents the enhancement of morphine conditioned place preference by uncontrollable stress in rats. Psychopharmacology. 179, 409-417 (2005).
  33. Sinha, R. How does stress increase risk of drug abuse and relapse? Psychopharmacology. 158, 343-359 (2001).
  34. Lu, L., Shepard, J. D., Hall, F. S., Shaham, Y. Effect of environmental stressors on opiate and psychostimulant reinforcement, reinstatement and discrimination in rats: a review. Neurosci. Biobehav. Rev. 27, 457-491 (2003).
  35. Vidal-Infer, A., Arenas, M. C., Daza-Losada, M., Aguilar, M. A., Miñarro, J., Rodríguez-Arias, M. High novelty-seeking predicts greater sensitivity to the conditioned rewarding effects of cocaine. Pharmacol Biochem Behav. 102, 124-132 (2012).
  36. Reguilón, M. D., Montagud-Romero, S., Ferrer-Perez, C., Roger-Sánchez, C., Aguilar, M. A., Miñarro, J., Rodríguez-Arias, M. Dopamine D2 receptors mediate the increase in reinstatement of the conditioned rewarding effects of cocaine induced by acute social defeat. European Journal of Pharmacology. 799, 48-57 (2017).
  37. Ribeiro Do Couto, B., Aguilar, M. A., Lluch, J., Rodríguez-Arias, M., Miñarro, J. Social experiences affect reinstatement of cocaine-induced place preference in mice. Psychopharmacology. 207 (3), 485-498 (2009).
  38. Blanco-Gandía, M. C., Aracil-Fernández, A., Montagud-Romero, S., Aguilar, M. A., Manzanares, J., Miñarro, J., Rodríguez-Arias, M. Changes in gene expression and sensitivity of cocaine reward produced by a continuous fat diet. Psychopharmacology. 234 (15), 2337-2352 (2017).
  39. Tzschentke, T. M. Measuring reward with the conditioned place preference paradigm: a comprehensive review of drug effects, recent progress and new issues. Progress in neurobiology. 56 (6), 613-672 (1998).
  40. Blanco-Gandía, M. C., Ledesma, J. C., Aracil-Fernández, A., Navarrete, F., Montagud-Romero, S., Aguilar, M. A., Manzanares, J., Miñarro, J., Rodríguez-Arias, M. The rewarding effects of ethanol are modulated by binge eating of a high-fat diet during adolescence. Neuropharmacology. 121, 219-230 (2017).
  41. Itzhak, Y., Martin, J. L. Cocaine-induced conditioned place preference in mice: induction, extinction and reinstatement by related psychostimulants. Neuropsychopharmacology. 26 (1), 130-134 (2002).
  42. Kreibich, A. S., Blendy, J. A. cAMP response element-binding protein is required for stress but not cocaine-induced reinstatement. Journal of Neuroscience. 24 (30), 6686-6692 (2004).
  43. Zavala, A. R., Weber, S. M., Rice, H. J., Alleweireldt, A. T., Neisewander, J. L. Role of the prelimbic subregion of the medial prefrontal cortex in acquisition, extinction, and reinstatement of cocaine-conditioned place preference. Brain research. 990 (1), 157-164 (2003).
  44. Orsini, C., Bonito-Oliva, A., Conversi, D., Cabib, S. Genetic liability increases propensity to prime-induced reinstatement of conditioned place preference in mice exposed to low cocaine. Psychopharmacology. 198 (2), 287-296 (2008).
  45. Sun, Y., Pan, Z., Ma, Y. Increased entrances to side compartments indicate incubation of craving in morphine-induced rat and tree shrew CPP models. Pharmacology Biochemistry and Behavior. 159, 62-68 (2017).

Tags

السلوك، العدد 136، مشروط بوضع الأفضلية، الكوكايين، إعادة، والإجهاد، والفئران، البحث عن المخدرات
إعادة البحث عن المخدرات في الفئران باستخدام نموذج تفضيل المكان مكيفة
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Blanco-Gandía, M. C., Aguilar,… More

Blanco-Gandía, M. C., Aguilar, M. A., Miñarro, J., Rodríguez-Arias, M. Reinstatement of Drug-seeking in Mice Using the Conditioned Place Preference Paradigm. J. Vis. Exp. (136), e56983, doi:10.3791/56983 (2018).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter