Summary
세포 기반 분석 결과 세럼 안티-aquaporin-4 면역 글로불린 g.를 검출 하기 위하여 널리 사용 방법은 이 메서드는 임상 진단 및 neuromyelitis 광학 스펙트럼 장애의 과학적 연구에 적용할 수 있습니다.
Abstract
안티-aquaporin-4 (AQP4) 면역 글로불린 G (IgG) neuromyelitis optica 스펙트럼 장애 (NMOSD)에 대 한 핵심 진단 바이오 마커 이다. 세포 기반 분석 결과 (CBA) 높은 감도와 특이성 인간 혈 청에 안티 AQP4 IgG를 감지 하는 널리 사용 되는 방법 이다. 간단히, 세럼 안티 AQP4 IgG AQP4 페 셀은 바이오 칩에 고정 후 fluorescein 붙인 이차 항 체에 의해 감지에 의해 캡처됩니다. 형광 현미경 검사 법은 형광, 시각화를 활용 하 고 형광의 강도 두 개 이상의 경험이 풍부한 임상에서 평가. NMOSD의 최종 진단 안티 AQP4 IgG 검출 결과, 임상 발현 및 neuroradiological 발견의 조합에 따라 만들 수 있습니다. 이전 연구에 따르면 CBA는 더 과민 하 고 특정 다른 안티 AQP4 IgG 탐지 방법 보다 그리고 임상 진단 및 NMOSD의 연구에 적용할 수 있습니다. 메서드는 제한; 예를 들어 세럼 안티 AQP4 IgG titers를 평가 하는 국제 규모는 여전히 부족 합니다. 여기, 인간 혈 청 안티 AQP4 IgG 감지 CBA를 사용 하 여 상세한 프로토콜을 설명 합니다.
Introduction
혈 청 AQP4 IgG neuromyelitis optica 스펙트럼 장애 (NMOSD)1코어 진단 바이오 마커 이다. 세포 기반 분석 결과 (CBA)은 높은 감도와 특이성 널리 안티-AQP4 IgG 감지 방법입니다. 여기, CBA에 대 한 상세한 프로토콜 소개 된다.
AQP4, 물 채널 단백질 막에 걸친 6 단위 있으며 수성 하나를 둘러싼 두 개의 헬리컬 도메인2기 공. 안티 AQP4 IgG를 대상 주로 이다3의 endfeet에 있는 AQP4 바인딩을 통해 NMOSD의 병 인에서 포함 된다. 그것은 안티-AQP4 IgG는 긍정적인 NMOSD 환자4의 약 2/3에 표시 되었습니다. NMOSD에 대 한 가장 최근의 국제 진단 기준, 안티-AQP4 IgG 코어 진단 바이오 마커5간주 됩니다. 이와 관련, 그것은 인간의 혈 청을 감지 하는 신뢰할 수 있는 프로토콜을 설정 하는 중요 한 안티-AQP4 IgG NMOSD의 임상 진단을 용이 하 게 하 고.
현재, 다양 한 안티-AQP4 IgG 탐지 방법 CBA, 조직 기반 분석 결과, 효소 연결 된 immunosorbent 분석 결과, 흐름 cytometry6,7등 사용할 수 있습니다. CBA 안티 AQP4 IgG를 잡으려고 인간의 AQP4와 페 EU90 셀을 사용 합니다. 캡처된 안티-AQP4 IgG 형광 이차 항 체에 의해 감지 하 고 이후에 현미경 검사 법에 의해 시각. 증거를 축적 하는 것은 CBA는 더 과민 하 고 다른 안티 AQP4 IgG 감지 방법6,7보다 구체적인 것을 보이고 있다. 메타 분석에 따르면 민감도 특이성 CBA의 76%와 99%, 조직 기반 보다 높은 표시 했다 하 고 효소 연결 된 immunosorbent 분석 실험6. 또한, 안티 AQP4 IgG의 진단 분석 실험의 되 비교가 했다 실시7. 15 유럽 진단 센터에서 과목은 193 연구 총 등록7. 4 가지 방법은 세럼 안티 AQP4 IgG7검색을 활용 했다. 그것은 CBA는 더 과민 하 고 특정 다른 방법7보다 시연 했다. AQP4 (AQP4-m 1과 AQP4-M23) 두 주요 isoforms로 표현 이다, 안티-AQP4 IgG 캡처 셀 AQP4 M1 또는 AQP4-M23 페입니다. 그러나, 어떤 유형의 캡처 셀 더 남아 논란입니다. 한 조사는 AQP4-M1 기반의 지원 CBA8, 다른 AQP4-M23 CBA를 기반으로 표명 하는 동안은 더 나은7,,910. 그러나, AQP4-M23 기반 CBA 난다 IgG 바인딩8거짓 긍정적인 결과 얻을 수 있습니다. Jarius 외입니다. 11 AQP4-m 1와 AQP4-M23 기반 CBAs 안티 AQP4 IgG 검출 률에 큰 차이 보도 했다.
요약, 세럼 안티-AQP4에 IgG는 NMOSD에 대 한 핵심 바이오 마커. CBA는 높은 특이성 및 다른 안티 AQP4 IgG 탐지 방법 보다 감도 있습니다. AQP4-M1-또는 AQP4-M23-CBA는 더 나은 여부 논란이 남아 있다. 이 문서에서는, CBA AQP4-M1-기반에 대 한 상세한 프로토콜 설명, 임상 진단 및 NMOSD의 연구에 적용할 수 있는 합니다.
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Protocol
이 절차의 첫 번째 병원 길 림 대학 윤리 위원회에 의해 승인 되었다 고 약 1500 과목에서 수행 되었다.
1. 환자 등록 및 혈액 샘플 컬렉션
- 아래 열거 된 수석 불만과 증상 병원 환자에 게 안티 AQP4 IgG 혈 청의 실험실 탐지를 적용 합니다. 또한 검 진을 수행 합니다.
광학 신경 염: 환자 시각 필드의 손실 및 시력의 감소와 같은 시각적인 적자와 고통을.
급성 척 수염: 환자 마비, 감각 적자와 자율 기능 장애가 발생할 수 있습니다.
지역 postrema 증후군: 환자의 설명할 수 없는 딸 꾹 질, 구역 질 또는 구 토 증상이 있을 수 있습니다.
급성 brainstem 증후군: Brainstem 병 변 다른 증상과 병 변의 위치에 따라 실제 표시 될 수 있습니다.
증상 narcolepsy 또는 NMOSD-전형적인 diencephalic MRI 병 변과 급성 diencephalic 임상 증후군.
NMOSD-전형적인 뇌 병 변과 증상이 뇌 증후군.
참고: NMOSD5에 대 한 국제 합의 진단 기준에 따라 NMOSD의 진단 할 수 있다 경우에 환자는 혈 청 안티-AQP4 igg가 양성 및 핵심 임상 특성 중 적어도 하나 위에서 언급 한 했다. 그러나, 안티 AQP4 IgG만 광학 신경 염 환자에서의 테스트 하지 않는 것이 좋습니다. -
혈액 샘플 컬렉션
참고: 환자 금식 할 필요가 없습니다.- 4 mL 진공 혈액 컬렉션 튜브에 정 맥 혈액의 2-3 mL를 그립니다.
- 실 온 (RT)에서 30 분 동안 응고 혈 청을 수 있습니다.
참고: 머리말을 붙인 응고 혈소판에서 누설 때문에 혈 청 수준을 높일 수 있습니다. - 2100 x g 에서 원심 분리기는 5 분에 대 한 신중 하 게 새로운 튜브에 혈 청을 전송 합니다.
- 혈 청을 즉시 또는 약 수를 분석 하 고-20에서 저장 또는-80 ° C
참고: -20 ° C에서 저장-80 ° C는 년의 저장에 대 한 개월, 저장을 위해 이다.
2. 안티-AQP4 항 체 검출
주의: 환자 샘플 및 사용된 키트 시 약 전염 물질을 고려 한다. 나트륨 아 지 드 포함 시 약 키트에 독성이 있다. 프로토콜의 흐름 차트는 그림 1에 제공 됩니다.
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준비
- RT를 사용 하기 전에 키트를가지고.
참고: 2-8 ° c.에 키트를 저장 - 0.2%를 포함 하는 PBS 워시 버퍼의 적어도 200 mL 준비 트윈 20. 워시 버퍼의 100 mL 500 mL 비 커에 붓으십시오.
- 혈 청 샘플 워시 버퍼 10 배 희석. 배포자의 지시에 따라 긍정적이 고 부정적인 컨트롤을 준비 합니다.
- RT를 사용 하기 전에 키트를가지고.
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샘플 부 화
- 시 약 트레이 (그림 2)의 반응 분야에 미리 희석된 샘플, 긍정적인 통제, 또는 부정적인 컨트롤의 30 µ L를 추가 합니다.
참고: 공기 방울을 피하십시오. - 바이오 칩 슬라이드에 보호 커버를 제거 합니다.
참고: 분리 및 고정된 셀의 오염을 방지 하기 위해 봄에는 만지지 마십시오. 덮개를 제거 하기 전에 슬라이드 사이드-의해-측면을 잡으십시오. - 바이오 칩 슬라이드 시 약 트레이 (그림 2)에 적용 됩니다. 실시간에서 30 분 부 화를 시작
참고: 모든 샘플은 다른 방울과 혼합 하지 않고 해당 바이오 칩에 연결 된 개별 방울 이어야 한다. - 부드럽게 린스 워시 버퍼와 한번 바이오 슬라이드. 바이오 칩 슬라이드 가득한 적어도 5 분 자리 가능 하면 통에 비 커에 대 한 워시 버퍼의 100 mL 500 mL 비 커에 담가.
- 바이오 칩 슬라이드 워시 버퍼에서 꺼내 주세요. 신중 하 게 멀리 종이 타월로 반응 분야 이외의 잔여 워시 버퍼를 닦으십시오. 반응 분야에 잔여 워시 버퍼를 증발을 1-2 분 동안 야외에서 바이오 슬라이드를 표시 합니다.
참고: 반응 분야에 밖으로 건조 하지 마십시오. 종이 타월로 봄에는 만지지 마십시오.
- 시 약 트레이 (그림 2)의 반응 분야에 미리 희석된 샘플, 긍정적인 통제, 또는 부정적인 컨트롤의 30 µ L를 추가 합니다.
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이차 항 체 외피
- 배포자의 지시에 따라 이차 항 체 솔루션을 준비 합니다.
- 깨끗 한 시 약 트레이의 반응 분야에 형광 이차 항 체의 25 µ L를 추가 합니다.
- 이차 항 체와 함께 로드 시 약 트레이 바이오 슬라이드를 적용 합니다. 실시간에서 30 분 동안 품 어
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장착
- 사용된 워시 버퍼에 밖으로 부 어과 신선한 워시 버퍼의 100 mL 비 커에 추가. 2.2.4, 2.2.5 단계에 설명 된 대로 세척을 반복 합니다.
- 신중 하 게 바이오 슬라이드 (한 방울 반응 필드)에 반응 필드에 포함 매체를 추가 합니다. 커버 글라스의 한 조각으로 바이오 칩 슬라이드 인감. 공기 방울을 피하십시오.
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형광 검출
- 현미경 및 15 분 선택 488 nm 필터에 대 한 사전 열 형광 램프를 켭니다.
- 오픈 사진 소프트웨어입니다. 다른 확대와 함께 모든 반응 분야의 transfected와 untransfected 지역에서 사진을 찍을. 먼저, 4 배 확대에 대 한 개요와 함께 한 사진의 찍을 다음 10 x 20 x 확대와 더 많은 사진을 찍어.
참고: 자세한 프로토콜은 표 1에 표시 됩니다. 해석 결과의 대표적인 결과 섹션에 설명 되어 있습니다.
3입니다. 환자의 진단
- 경우 환자는 혈 청 안티-AQP4 IgG-긍정적인 NMOSD의 적어도 하나의 코어 임상 특성을 보여줍니다 (토론 섹션 참조), NMSOD5환자를 진단. 그러나, 환자는 안티-AQP4 경우 IgG-부정, NMOSD의 진단 배제 하지 않을 수 있습니다.
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Representative Results
여기에 설명 된 절차를 사용 하 여, 혈 청 igg가 특정 안티-AQP4 감지입니다. 절차 동안, 미리 희석된 샘플, 긍정적인 통제 및 부정적인 제어 transfected untransfected 영역 (그림 2)를 포함 하는 반응 필드에 추가 되었습니다. Transfected 지역에 부정적인 컨트롤의 형광은 주로 봄에는 (그림 3)에 transfected 세포에 이차 항 체의 불특정 바인딩 표시. 균질 약한 형광 표시 (그림 3) 했다. 긍정적인 컨트롤, 안티-AQP4 항 체 반응 필드에 추가 되었습니다. (그림 4)의 transfected 세포에 AQP4-m 1에 안티 AQP4 IgG의 특정 바인딩 표시 transfected 영역에서 강한 형광 관찰 되었다. Untransfected 지역에서 긍정적인 통제의 형광 봄에는 (그림 4)에 고정 셀 안티 AQP4 IgG의 불특정 바인딩 힌트를 보여주었다. 10 배 희석된 샘플에 대 한 안티-AQP4 IgG 부정 혈 청 형광 패턴 부정적인 컨트롤과 유사 하 게 동안 보였다 긍정적인 혈 청 긍정적인 컨트롤 (그림 5)와 비슷한 패턴을 보여주었다. 형광의 강도 안티 AQP4 IgG titer와 연관 되었다. 형광의 다른 농도의 예는 그림 5에 표시 됩니다. 그림 5 A 와 5B 에서 있었다 안티 AQP4 IgG 음수가 샘플, 그림 5C H 에서 안티 AQP4 IgG-긍정적인 샘플 했다. 샘플 안티 AQP4 여겨졌다으로 이기종 및 세분화 된 형광 transfected 지역에 등장, 형광의 강도에 igg가 양성. 기반으로 세럼 안티-AQP4 NMOSD에 대 한 진단 기준을 IgG, 토론 섹션에 더 설명 될 것입니다.
몇 가지 샘플에서 세포 수가 적은 transfected 지역에서 스테인드 강하게 했다 하 고 혈 청 안티 AQP4 IgG-포지티브 또는 네거티브 (그림 6)이 었 들었다. 이 경우에, "가능한 긍정적인" 보고 될 수 있습니다. 드문 경우에 transfected 영역에서 샘플의 형광 untransfected 지역 (그림 7)에서 보다 더 강한 균질 이었다. 이 경우에, 샘플 안티 AQP4 IgG-부정으로 간주 되어야 합니다. 배경 형광의 강도 높은 특이 현상이 있을 수도 있습니다. 신뢰할 수 있는 보고서를 만들려면 모든 사진 맹목적으로 적어도 두 가지 임상에 의해 평가 되어야 한다. 임상 평가 하기 전에 훈련 한다. 이 프로토콜에서 그들은 다른 샘플 종류의 대표적인 사진을 표시 했다 하 고 결과 평가 하는 방법을 통보 했다. 다음, 그들은 경험이 풍부한 임상 함께 사진 평가. 마지막으로, 훈련 된 임상 근무 하지 독립적으로. 이상적인 상황에서 그것은 해야 합니다 항상 같은 임상 결과 평가.
그림 1 : 안티 AQP4 IgG 탐지 프로토콜의 흐름 차트. AQP4 M1 페 또는 untransfected EU 90 세포는 봄에는에 고정 됩니다. 봄에는에 혈 청을 추가할 때 혈 청 igg가 안티 AQP4 고정된 transfected 세포에 의해 캡처됩니다. 다음, 이차 항 체 fluorescein 표시 안티 AQP4 IgG를 감지에 적용 됩니다. 형광과 다양 한 배율 현미경 검사 법에 의해 구상 될 수 있다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
그림 2 : 외피 샘플. (A) 시 약 트레이의 최고 볼 수 있습니다. 모든 시 약 트레이 5 개별 반응 필드를 포함합니다. 긍정적인 통제, 예제 및 부정적인 컨트롤은 별도 반응 필드에 추가 되어야 합니다. (B) 바이오 슬라이드의 최고 볼 수 있습니다. 모든 바이오 슬라이드 5 반응 분야를 두 개의 하위 섹션에 포함 되어 있습니다. Transfected 하위 untransfected 하위 untransfected 셀을 포함 하는 동안 고정된 AQP4 M1 페 셀을 포함 합니다. (C) 전면 시 약 트레이 바이오 칩 슬라이드의 보기. 시 약 트레이 바이오 칩 슬라이드에 반응 분야는 서로 짝을. 트레이 시에 반응은 필드에 추가 하는 샘플 바이오 슬라이드에 해당 반응 필드에 연결 되어야 합니다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
그림 3 : 부정적인 제어에 대 한 대표적인 인물. (A) 부정적인 컨트롤의 transfected 영역의 개요 배율 현미경 x 4에 의해 얻은 했다. 균질 약한 형광 지역에 걸쳐 관찰 했다. (B, C) 자세한 내용은 10에서 관찰 되었다 x (B)와 (C) 확대 사진. 일반적으로, 세포 막과 플라즈마 약간 스테인드 했다, 그리고 세포 핵 스테인드 아니었다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
그림 4 : 긍정적인 통제에 대 한 대표적인 인물. (A, B) Transfected (A)와 긍정적인 컨트롤의 untransfected (B) 영역이 표시 됩니다. 균질 약한 형광 고정 셀 안티 AQP4 IgG의 불특정 바인딩을 나타내는 untransfected 지역에서 관찰 되었다. 반대로, 다른 유형의 강한 형광 AQP4-m 1 고정된 셀에 표현에 안티 AQP4 IgG의 특정 바인딩을 나타내는 transfected 지역에서 관찰 되었다. (C F) Transfected (C, E) 및 untransfected (D, F) 분야의 자세한 내용을 10으로 관찰 된다 (C, D) 또는 (E, F) 배율 x 20. 약하고 심지어 형광 untransfected 지역에서 나타났다. 그러나, transfected 영역에 있는 셀의 큰 비율 강렬한 형광을 보여주었다. 강력 하 게 얼룩진된 셀의 플라즈마에서 안티 AQP4 IgG 세밀 하 고 부드러운 형광을 보여주었다. 세포 핵은 흠 없는 또는 약간 스테인드. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
그림 5 : 안티-AQP4 항 체 음수 또는 양수 샘플에 대 한 대표적인 인물. 샘플 10 배 희석, 그리고 표시 된 모든 수치는 10 배 목표와 함께 찍은. (A, B) 네거티브 형광 샘플: 형광은 균질 모두 (A)에 약한 페 및 (B) untransfected 지역. (C, D) 약한 형광 샘플: untransfected 영역 (D), 적은 양의 세포 (약 25% ~ 50%)와 비교 하면 transfected 지역 (C) 더 강렬한 형광을 보였다. (E, F) 보통 형광 샘플: transfected 지역 (E), 강한 세분화 된 형광 세포 (약 50% ~ 75%)의 중간 금액에서 관찰 되었다. (G, H) 강한 형광 샘플: untransfected 영역 (H)에 있는 셀 약하게 스테인드 했다. 그러나, transfected 영역 (G), 강도 높은 세분화 된 형광 세포 (이상 약 75%)의 많은 수에서 나타났다. 일반적으로, 안티 AQP4 IgG의 titer 증가, 형광 강도 강력 하 게 얼룩진된 셀의 비율 상승 대응 하 게. Untransfected 분야의 형광 항상 균질 약 했다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
그림 6 : 안티-AQP4 항 체 "가능성이 긍정적인" 샘플에 대 한 대표적인 인물. (A, B) 형광 패턴에 중요 한 차이가 관찰 되었다 transfected (A)와 4 배 확대에서 untransfected (B) 지역 사이. (C-E) 10으로 (C, D) x 20 (E, F) x 확대, 세분화 된 강한 형광을 보여주었다 transfected 영역 (C, E)에 있는 몇 가지 셀. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
그림 7 : Untypical 안티-AQP4 IgG 음수가 샘플의 예. Transfected (A)와 untransfected (B) 영역 스테인드 균질 했다. 그러나, transfected 분야에서 형광이 했다 untransfected 지역에서 강하다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
| 확대 | Transfected 영역 | Untransfected 영역 |
| 4 x | 1 그림 | 1 그림 |
| 10 배 | 4 사진 | 1 그림 |
| 20 x | 사진 5 | 1 그림 |
표 1: 형광 현미경 검사 법. 이미징 transfected 및 untransfected 분야의 4 배, 10 배, 20 x 목표를 사용 하는 것이 좋습니다.
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Discussion
우리는 안티-AQP4 IgG 인간의 혈 청에서 검출 하는 광범위 하 게 액세스할 수 방법을 설명 했습니다. 안티 AQP4 IgG는 밀접 하 게 관련이 NMOSD, 그리고 신뢰할 수 있는 안티-AQP4 IgG 탐지 방법을 구축 하는 것는 NMOSD의 임상 진단에 대 한 중요 한. 첫째, 안티-AQP4 IgG NMOSD에 대 한 특정 이다. 다 발성 경화 증 또한 중앙 신경의 면역 중재 하는 질병 이며, NMOSD12와 많은 유사점을 공유. 그러나, 안티-AQP4 IgG만 NMOSD13에 긍정적 이다. 둘째, 안티-AQP4 IgG NMOSD 환자 중 일반적 이다. NMOSD 환자의 약 2/3는 세럼 안티 AQP4 igg가 양성4. 셋째, 가장 최근의 진단 기준 NMOSD 세럼 안티-AQP4 기반에 대 한 IgG 테스트5. 함께 찍은, 세럼 안티 AQP4 IgG 탐지 수 용이 하 게 NMOSD의 임상 진단.
다양 한 안티-AQP4 IgG 검출 방법 중 CBA는 높은 감도 및 특이성6,7임상 진단을 위해 널리 사용 됩니다. CBA는 신속 하 고 간단한 방법 이지만 몇 가지 핵심 포인트를 해결 한다. 첫째, 경험 AQP4 M1 페 및 untransfected 세포는 봄에는에 고정으로 봄에는, 작업할 때 주의 해야 한다. 전체 절차 동안 봄에는 해야 하지 손으로 건드리지 또는 밖으로 건조. 또한, 봄에는와 슬라이드를 부드럽게 처리 한다, 그렇지 않으면에 봄에는 고정된 셀 떨어질 수 있습니다 또는 오염 되는 형광 결함 영역 또는 높은 형광 배경 발생할 수 있습니다. 둘째, 샘플 시 약 트레이에 반응 필드를 추가할 때 연구자는 샘플의 방울은 서로 혼합 되지 확인 해야 합니다. 공기 방울 샘플 및 봄에는 사이 피해 야 한다.
이 메서드는 제한; 예를 들어 CBA를 사용 하 여 안티-AQP4 IgG를 감지, 형광 강도 측정 하 고 혈 청에서 안티 AQP4 IgG titer를 설명 하기 어렵다. 현재, 우리의 진단 센터에서 형광의 강도 주관적 보고 두 임상 샘플 대. 컨트롤의 사진 비교 후. 대부분의 경우에서 그것은 혈 청 안티 AQP4 IgG-포지티브 또는 네거티브 인지 결정 하기 어렵다입니다. 그러나, 드물게, 샘플에서 형광 처럼 보일 수 있습니다만, 부정적인 컨트롤 보다 약간 더 강한 그리고 샘플 "가능성이 긍정적인" 것으로 간주 됩니다. 이 상황에서 임상 진단을 만들기에 더 조심 해야 한다. 또 다른 가능한 해결책은 CBA 반복 이다. 형광의 강도와 국제적인 정의의 척도를 더 정확한 방법 "안티-AQP4 IgG-긍정적인"는 보증. 특히, 중추 신 경계에서 안티 AQP4 IgG의 긍정적인 평가 혈 청에 비해 훨씬 낮은 고 척수에서 안티 AQP4 IgG에 대 한 테스트 정보14,15아니다.
CBA는 임상 진단 및 NMOSD의 과학 연구에 적용할 수 있습니다. NMOSD의 임상 진단 임상 발현, 혈 청의 조합에 따라 만든 안티-AQP4 IgG 및 neuroradiological 결과. NMOSD5; NMOSD의 임상 특성을 적어도 하나의 코어와 세럼 안티 AQP4 IgG 양성 환자를 진단할 수 있습니다. 그러나, 환자가 안티 AQP4 경우 IgG-부정, NMOSD의 진단 제외5, 고 임상 임상 발현 및 neuroradiological 결과5,16,17 평가 추가 해야 . 혈 청 myelin oligodendrocyte 당단백질 항 체 진단18,,1920을 지원 하기 위해 검색 수 있습니다. 특히, 세럼 안티 AQP4 IgG titer rituximab 치료21변경 될 수 있습니다, 하지만 그건 질병 과정과 immunotherapy22,23응답의 예측. CBA는 과학 연구에도 널리 사용 됩니다. 예를 들어 양 외.24 안티 AQP4 IgG-긍정적인 NMOSD 환자의 임상적 특징을 설명합니다. 또한, Kitley 외.25 안티-AQP4 IgG-긍정적인 NMOSD 환자25에 대 한 전조 요인 분석. 두 연구는 혈 청을 감지 하 CBA 사용 안티 AQP4 IgG.
요약 하자면, CBA 안티 AQP4 IgG를 감지 하는 널리 사용 되는 방법 이며 임상 진단 및 NMOSD의 과학 연구에 적용할 수 있습니다.
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Disclosures
저자는 공개 없다.
Acknowledgments
저자는 국립 과학 재단의 중국 (No. 31600820)는 건강 및 가족계획 위원회의 지린 (번호 2016Q036), 그리고 과학 기술 계획 프로젝트의 지린 (No.에서 보조금에서 지원에 대 한 감사 20180520110JH)입니다.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Anti-aquaporin-4 IIFT | Euroimmun | FA 1128-2005-50 | Contains biochip slides coated with AQP4-M1 transfected and untransfected EU 90 cells, fluorescein-labelled anti-human IgG, anti-AQP4 antibody as positive control, antibody negative sample, salt for PBS pH 7.2, Tween 20 and embedding medium. |
| CellSens Dimension | OLYMPUS | N/A | photograph software |
| Gel & clot activator tube | Improve medical | 623040202 | From a local Chinese company |
References
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