Summary
На основе клеток пробирного является широко используемым методом для обнаружения сыворотка анти Аквапорин-4 иммуноглобулина G. Этот метод может применяться для клинической диагностики и научных исследований нейромиелит оптического спектра расстройств.
Abstract
Анти Аквапорин-4 (AQP4) иммуноглобулина G (IgG) является основной диагностики biomarker для нейромиелит optica спектра расстройств (NMOSD). На основе клеток пробирного (ЦБА) является широко используемым методом для обнаружения анти AQP4 IgG в сыворотке крови человека с высокой чувствительностью и специфичностью. Вкратце, сыворотка анти AQP4 IgG захвачен AQP4-transfected клеток, что является фиксированной на биочип затем определяется флуоресцеин, меченного вторичное антитело. Микроскопии флуоресцирования используется для визуализации флюоресценция, и интенсивность флуоресценции оценивается по крайней мере два опытных клиницистов. Окончательный диагноз NMOSD может производиться на основе на комбинации результаты обнаружения анти AQP4 IgG, клинические проявления и перенёс выводов. По данным предыдущих исследований ЦБА чувствительными, чем другие методы обнаружения анти AQP4 IgG, и оно может применяться для клинической диагностики и исследования NMOSD. Этот метод имеет ограничения; например в международном масштабе по оценке сыворотке крови анти AQP4 IgG титры по-прежнему отсутствует. Здесь описан подробный протокол для сыворотки крови человека анти AQP4 IgG обнаружения с помощью ЦБА.
Introduction
Сыворотка AQP4 IgG-это основные диагностические biomarker для нейромиелит optica спектра расстройств (NMOSD)1. Пробирного ячейки на основе (ЦБА) является широко используемым анти AQP4 метод обнаружения IgG с высокой чувствительностью и специфичностью. Здесь представлен подробный протокол для АЗВ.
AQP4, белок канала воды, имеет шесть единиц, охватывающих мембраны и два винтовых доменов, вокруг один водный поры2. Анти-AQP4 IgG участвует в патогенезе NMOSD через привязку к ее целевому объекту AQP4, который расположен главным образом на endfeet астроциты3. Было показано, что анти AQP4 IgG положительный примерно две трети пациентов NMOSD4. В самых последних международных диагностические критерии для NMOSD считается, что основные диагностические биомаркер5анти AQP4 IgG. В этой связи крайне важно создать надежный протокол обнаружить сыворотке человека анти AQP4 IgG и облегчения клинический диагноз NMOSD.
В настоящее время доступны различные методы обнаружения анти AQP4 IgG, такие как ЦБА, на основе ткани пробирного, энзим соединенный assay иммуносорбента и потока цитометрии6,7. ЦБ Азербайджана занято EU90 клетки, которые являются transfected с человеческой AQP4, чтобы захватить анти AQP4 IgG. Захваченные анти AQP4 IgG обнаружены флуоресцентные вторичные антитела и впоследствии визуализированное микроскопии. Накопление доказательств показал, что АЗВ является более чувствительной, чем другие анти AQP4 IgG определение методов6,7. По словам мета анализ чувствительность и специфичность ЦБА было показано, что 76% и 99%, которые были выше, чем на основе ткани и иммуноферментного assays6. Кроме того многоцентровое Сравнение диагностических анализов анти AQP4 IgG был проведены7. В общей сложности 193 исследования, предметы из 15 европейских диагностических центров были зачислены7. Четыре различные методы были использованы для выявления сыворотка анти AQP4 IgG7. Было продемонстрировано, что куб был чувствительными, чем другие методы7. Как AQP4 выражается в виде двух основных изоформ (AQP4-M1 и AQP4-M23), анти AQP4 IgG захват клеток является transfected с AQP4-M1 или AQP4-M23. Однако какой тип захвата клеток — лучше остается спорным. Одно расследование поддерживает AQP4-M1 на базе ЦБ8, в то время как другие указали, что AQP4-M23 основе АЗВ является более7,9,10. Однако на основе AQP4-M23 ЦБА может дать ложные положительные результаты благодаря неспецифических IgG привязки8. Jarius и др.. 11 сообщили, что не было никаких существенных различий в показатели выявления IgG анти AQP4 AQP4-M1 и на основе AQP4-M23 КТД.
В резюме, сыворотка анти AQP4 IgG-это ядро biomarker для NMOSD. КУБ имеет выше специфичность и чувствительность, чем другие методы обнаружения анти AQP4 IgG. Она остается спорным ли AQP4-M1 - или AQP4-M23-на основе ЦБА лучше. В этой статье описан подробный протокол для АЗВ, основанные на AQP4-M1, которые можно применить к клинической диагностики и исследования NMOSD.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Эта процедура была утверждена Комитетом этики первой больнице Цзилинь университета и была исполнена на примерно 1500 темы.
1. пациент подачи и забора образца крови
- Примените Лаборатория обнаружения сыворотки, анти AQP4 IgG к клинике пациентов с главным жалобы и симптомы, перечисленные ниже. Выполняйте физические осмотры также.
Неврит зрительного нерва: пациенты страдают с визуального дефицит, как потеря поля зрения и снижение остроты зрения.
Острый миелит: пациенты могут представлять с параличом, сенсорные дефицита и вегетативные расстройства.
Площадь postrema синдром: пациенты могут иметь симптомов необъяснимой икота, тошнота или рвота.
Синдром острой ствола мозга: поражения мозга может привести различные симптомы и признаки физической зависимости от локализации поражения.
Симптоматическая Нарколепсия или острый мезодиэнцефальной клинический синдром с NMOSD-типичный мезодиэнцефальной МРТ поражений.
Симптоматическая церебральный синдром с NMOSD-типичный поражениями мозга.
Примечание: По данным международного консенсуса диагностические критерии для NMOSD5, диагноз NMOSD могут быть сделаны, если пациент является сыворотка анти AQP4 IgG позитивных и имеет по крайней мере один из основных клинических характеристик упомянутых выше. Однако тестирование анти AQP4 IgG у больных с неврит только не рекомендуется. -
Коллекция образцов крови
Примечание: пациентов не нужно быть поста.- Нарисуйте 2-3 мл венозной крови в 4 мл вакуумной пробирки.
- Разрешить сыворотки сгусток 30 мин при комнатной температуре (RT).
Примечание: Длительное свертывания может увеличить уровни сыворотки из-за утечки из тромбоцитов. - Центрифуга на 2100 x g 5 мин тщательно передать новой трубки сыворотки.
- Анализ сыворотки крови немедленно или Алиготе и хранить в -20 или -80 ° C.
Примечание: Для хранения от-20 ° c предназначен для хранения месяцев, а-80 ° C для хранения лет.
2. Обнаружение антител анти AQP4
ОСТОРОЖНОСТЬЮ: Инфекционные материалы следует пациентов образцов и используется комплект реагентов. Реагенты содержащие азид натрия в комплекте являются токсичными. Блок-схема протокола приводится на рисунке 1.
-
Подготовка
- Принесите комплект для RT перед использованием.
Примечание: Храните набор на 2-8 ° C. - Подготовить по крайней мере 200 мл PBS мыть буфер, содержащий 0,2% 20 анимации. Налейте в стакан 500 мл 100 мл мыть буфера.
- Разбавить сыворотки образцы 10 x с буфером мыть. Подготовьте положительной и отрицательной контроля согласно указаниям распространителя.
- Принесите комплект для RT перед использованием.
-
Инкубация образцов
- Добавьте 30 мкл предварительно разбавленного образцов, положительный контроль или отрицательный контроль реакции поля реагент лотка (рис. 2).
Примечание: Избегайте воздушных пузырей. - Снимите защитную крышку на слайдах биочип.
Примечание: Не прикасайтесь биочипов избежать отряда и загрязнение фиксированной клеток. Держите бок о бок слайд перед снятием крышки. - Применить биочип слайд в лоток реагента (рис. 2). Начало 30 минут инкубации на RT.
Примечание: Каждый образец должен быть отдельные капельки, подключенных к соответствующей биочип без смешивания с другими капельки. - Осторожно промывайте биочип слайд один раз с буфером мыть. Погрузите слайд биочип в 500 мл стакан, наполненный 100 мл буфера мытья для по крайней мере 5 минут место стакан на шейкер, если это возможно.
- Вывезти биочип слайд из буфера мытья. Тщательно протрите буфере остаточного мыть вне поля реакции с бумажным полотенцем. Разоблачить биочип слайд на открытом воздухе для 1-2 мин испаряться остаточного мыть буфера на поле реакции.
Примечание: Не высыхают поля реакции. Не прикасайтесь биочипов с бумажным полотенцем.
- Добавьте 30 мкл предварительно разбавленного образцов, положительный контроль или отрицательный контроль реакции поля реагент лотка (рис. 2).
-
Вторичное антитело инкубации
- Приготовляют раствор вторичного антитела согласно указаниям распространителя.
- Мкл 25 Флюоресцентная вторичные антитела к полям реакции чистым реагентом лотка.
- Применить биочип слайд реагент лоток загружена с вторичное антитело. Инкубируйте 30 мин на RT.
-
Монтаж
- Слейте буфер используется мыть и добавить 100 мл свежего мыть буфера в стакан. Повторите стирки, как описано в шагах 2.2.4 и 2.2.5.
- Тщательно добавьте вложения среднего поля реакции на слайде биочип (одна капля на поле реакции). Уплотнение биочип слайд с одной частью покровным стеклом. Избегайте воздушных пузырей.
-
Флуоресцентным обнаружением
- Включите люминесцентной лампы микроскопа и подогрейте на 15 мин выбрать фильтр 488 нм.
- Открыть фотографию программное обеспечение. Возьмите фотографии из transfected и untransfected районов всех полей реакции с различных увеличениях. Во-первых одно изображение с 4-кратным увеличением обзор, а затем взять больше фотографий с 10 x и 20 x увеличениях.
Примечание: В таблице 1показан подробный протокол. Интерпретация результатов обсуждается в разделе представитель результаты.
3. диагноз больных
- Если пациент сыворотка анти AQP4 IgG позитивных и показывает, по крайней мере один основной клиническая характеристика NMOSD (см. раздел "обсуждение"), диагноз пациента с NMSOD5. Однако если пациент является анти AQP4 IgG отрицательно, диагноз NMOSD не могут быть исключены.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Используя процедуру, описанную здесь, конкретных анти AQP4 IgG в сыворотке крови является обнаруживаемой. Во время процедуры, предварительно разбавленного образцов, положительный контроль и отрицательный контроль были добавлены к реакции полям, которые содержат transfected и untransfected области (рис. 2). Флуоресценции отрицательный контроль в зоне transfected главным образом указывается неспецифических привязки вторичные антитела к transfected клеток на биочипов (рис. 3). Однородно слабых флуоресценции было видно (рис. 3). Что касается позитивных контроля антитела анти AQP4 был добавлен в поле реакции. Сильная флуоресценция наблюдалось в районе transfected, который указал конкретные привязки анти AQP4 IgG к AQP4-M1 в transfected клеток (рис. 4). Флуоресценции положительный контроль в untransfected районе показал подсказки неспецифических привязки анти AQP4 IgG к фиксированной ячейки на биочипов (рис. 4). 10 x разреженных образцы анти AQP4 IgG отрицательных сыворотки показал шаблон флуоресцентные похож на отрицательный контроль, в то время как позитивные сыворотки показан шаблон похож на положительный контроль (рис. 5). Интенсивность флуоресценции был связан с анти AQP4 титр IgG. Примеры различной интенсивности флуоресценции, представлены на рисунке 5. Рисунок 5 A и 5B были от анти AQP4 IgG отрицательные примеры, а рис. 5C-H были от анти AQP4 IgG положительных образцов. До тех пор, как неоднородно и гранулированных флуоресценции появилась в transfected районах, образец был рассмотрен анти AQP4 IgG позитивных, независимо от силы флуоресценции. Диагностические критерии для NMOSD, которая основана на сыворотке крови анти AQP4 IgG, будут далее описаны в разделе обсуждения.
В нескольких образцах только небольшое количество клеток сильно окрашенных в transfected районах, и было трудно определить, является ли сыворотка анти AQP4 IgG положительный или отрицательный (рис. 6). В этом случае можно говорить о «вероятные позитив». В редких случаях флуоресценции образца в transfected районах был однородно сильнее, чем в untransfected районах (рис. 7). В этом случае образец следует рассматривать как анти AQP4 IgG отрицательный. Высокая интенсивность флуоресценции фона может быть неспецифическим. Для создания надежных отчетов, все фотографии должны быть слепо оценены по крайней мере двух врачей. Клиницисты должны быть обучены до оценки. В этом протоколе они были показаны представитель фотографии образцов различных типов и были проинформированы о том, как оценить результаты. Затем они оцениваются фотографии вместе с опытным врачом. Наконец обученные врачи работали независимо друг от друга. В идеальной ситуации она должна быть всегда же клиницисты, которые оценивают результаты.
Рисунок 1 : Схема протокола обнаружения IgG anti-AQP4. AQP4-M1-transfected или untransfected ЕС 90 клеток фиксируются на биочипов. При добавлении сыворотки биочипов, анти AQP4 IgG в сыворотке захвачен фиксированной transfected клеток. Затем флуоресцеин, меченного вторичное антитело применяется для обнаружения анти AQP4 IgG. Флюоресценция могут быть визуализированы путем микроскопии с различных увеличениях. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.
Рисунок 2 : Пример инкубации. Вид сверху (A) реагента лотка. Каждый лоток реагент содержит пять отдельных реакции поля. Положительные элементы управления, образцы и отрицательные следует добавить к полям отдельные реакции. (B) вид сверху биочип слайда. Каждый слайд биочип содержит пять полей в реакции, которые имеют два подраздела. Transfected подраздел содержит фиксированный AQP4-M1-transfected клеток, а untransfected подраздел untransfected клетки. (C) передний вид реагент лоток и биочип слайд. Реакция поля на слайде лоток и биочип реагент спарены друг с другом. Образец добавляется поле реакции на лоток Реагент должен быть подключен в соответствующее поле реакции на слайде биочип. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.
Рисунок 3 : Представитель цифры для отрицательного контроля. (A) Обзор области transfected отрицательного контроля было получено 4 x увеличение микроскопии. Однородно слабых флуоресценции наблюдалась во всем районе. (B, C) Подробности были замечены в 10 x (B) и x (C) увеличения фотографии. Как правило клеточной мембраны и плазмы были слегка окрашенных и клеточного ядра был безупречный. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.
Рисунок 4 : Представитель цифры для позитивного управления. (A, B) Transfected (A) и untransfected (B) области позитивного управления отображаются. Однородно слабых флуоресценции наблюдалось в untransfected областях, указанием неспецифических привязки анти AQP4 IgG к фиксированной ячейки. И наоборот гетерогенных сильная флуоресценция наблюдалась transfected областях, указанием конкретной привязки анти AQP4 IgG к AQP4-М1, выраженные на фиксированные клетки. (C-F) Более подробную информацию о transfected (C, E) и untransfected (D, F) областях наблюдаются с 10 x (C, D) или 20 x увеличение (E, F). Слабы и даже флуоресценции появился в untransfected областях. Однако большой процент клеток в transfected областях показали интенсивный флуоресценции. В плазме сильно окрашенных клеток IgG анти AQP4 показало гладкой и гранулированных флуоресценции. Клеточное ядро было незапятнанное или слегка окрашенные. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.
Рисунок 5 : Представитель цифры для анти AQP4 антитела негативных или позитивных образцов. Образцы были 10 x разбавленный, и все цифры были приняты с целью 10 x. (A, B) Отрицательный флуоресценции образец: флюоресценция был однородно слаб в обоих (A) transfected и (B) untransfected области. (C, D) Слабая флуоресценции образец: по сравнению с untransfected областями (D), небольшое количество клеток (примерно 25% до 50%) в transfected районах (C) показали более интенсивным флуоресценции. (E, F) Умеренные флуоресценции пример: в transfected районах (E), сильные гранулированных флуоресценции наблюдался в средний количество клеток (примерно 50% до 75%). (G, H) Образец сильная флуоресценция: были слабо окрашенных клеток в untransfected районах (H). Однако в transfected районах (G), гранулированный флуоресценции с высокой интенсивностью появилась в большое количество клеток (примерно на 75%). Как правило как увеличение титра анти AQP4 IgG, интенсивности флуоресценции и процент сильно окрашенных клеток повышенной соответственно. Флуоресценции untransfected районах всегда был однородно слабых. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.
Рисунок 6 : Представитель цифры для образцов «вероятные позитив» антител анти AQP4. (A, B) Никаких существенных различий в структуре флуоресценции наблюдались между transfected (A) и untransfected (B) на 4 крат. (C-E) С 10 x (C, D) или 20 x (E, F) увеличение, несколько ячеек в transfected областях (C, E) показал сильный гранулированных флуоресценции. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.
Рисунок 7 : Пример образца IgG отрицательных нетипичных анти AQP4. Были однородно окрашенных transfected (A) и untransfected (B) областях. Однако флуоресценции в transfected областях был сильнее, чем в untransfected областях. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.
| Увеличение | Transfected район | Untransfected район |
| 4 x | 1 фотография | 1 фотография |
| 10 x | 4 фотографии | 1 фотография |
| 00: | 5 фотографий | 1 фотография |
Таблица 1: микроскопии флуоресцирования. Рекомендуется использовать 4 x и 10 x 20 x целей для визуализации transfected и untransfected районов.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Мы описали широко доступный метод для обнаружения анти AQP4 IgG в сыворотке крови человека. Анти-AQP4 IgG тесно связана с NMOSD, и создание надежных анти AQP4 метод обнаружения IgG имеет решающее значение для клинической диагностики NMOSD. Во-первых анти AQP4 IgG специфичен для NMOSD. Рассеянный склероз является также иммунной заболевание центральной нервной системы и имеет много общего с NMOSD12. Однако анти AQP4 IgG только положительные NMOSD13. Во-вторых анти AQP4 IgG распространены среди пациентов NMOSD. Приблизительно две трети больных NMOSD, сыворотка анти AQP4 IgG положительный4. В-третьих самые последние критерии диагностики для NMOSD на основе сыворотки анти AQP4 IgG тестирования5. Взятые вместе, сыворотка анти AQP4 IgG определение могло бы облегчить клинический диагноз NMOSD.
Среди различных методов обнаружения анти AQP4 IgG ЦБА широко используется для клинической диагностики благодаря высокой чувствительности и специфичности6,7. Хотя АЗВ является быстрый и простой метод, следует рассмотреть некоторые ключевые моменты. Во-первых экспериментаторов, следует соблюдать осторожность при работе с биочипов, как untransfected и AQP4-M1-transfected клеток фиксируются на биочипов. В течение всей процедуры биочипы следует не коснулся вручную или высохли. Кроме того слайды с биочипов следует подходить осторожно, иначе фиксированные ячейки на биочипы могут упасть или загрязняется, которые могут привести к флуоресцирования дефектных зон или высокой флюоресцентный фон. Во-вторых при добавлении образцов в реакции поля на панели реагента, исследователи должны обеспечить, что капли образцов не смешиваются друг с другом. Следует избегать пузырьки воздуха между образцами и биочипов.
Этот метод имеет ограничения; например при использовании CBA для обнаружения анти AQP4 IgG, трудно дать количественную оценку интенсивности флуоресценции и описать титр IgG анти AQP4 в сыворотке крови. В настоящее время в наш диагностический центр, интенсивность флуоресценции субъективно сообщает двух врачей после сравнения фотографий образцов против. элементов управления. В большинстве случаев это не трудно определить, является ли сыворотка анти AQP4 IgG положительный или отрицательный. Однако в редких случаях, флуоресценции от образцов может показаться только немного сильнее, чем отрицательный контроль, и образец считается «вероятные позитив». В этой ситуации клиницисты должны быть более осторожными в постановке диагноза. Другим возможным решением повторение ЦБА. Более точный метод для количественного определения интенсивности флуоресценции и международного определения «Анти AQP4 IgG позитив» являются оправданными. В частности положительных анти AQP4 IgG в спинномозговой жидкости составляет намного ниже, чем в сыворотке, и тестирование для анти AQP4 IgG в спинномозговой жидкости не является информативным14,15.
ЦБА может применяться для клинической диагностики и научных исследований NMOSD. Клинический диагноз NMOSD производится на основании комбинации клинических проявлений, сыворотка анти AQP4 IgG и перенёс выводы. Сыворотка анти AQP4 IgG позитивных пациентов с по крайней мере один основной клинической характеристикой NMOSD может быть диагностирована с NMOSD5; Однако если пациент является анти AQP4 IgG отрицательно, диагноз NMOSD не должны быть исключены5, и клиницисты далее следует оценивать клинические проявления и перенёс выводы5,16,17 . Сыворотка миелина Олигодендроциты гликопротеина антитела могут быть обнаружены для оказания помощи в диагностике18,19,20. В частности хотя титр IgG сыворотки анти AQP4 могут быть изменены с rituximab лечения21, это не прогнозирования течения заболевания и реакции для иммунотерапии22,23. ЦБА также широко используется для научных исследований. Например Ян et al.24 описал клинические особенности анти AQP4 NMOSD IgG позитивных пациентов. Кроме того Kitley et al.25 анализ прогностических факторов для анти AQP4 NMOSD IgG положительных пациентов25. Оба исследования используются CBA для обнаружения сыворотка анти AQP4 IgG.
В целом АЗВ является широко используемым методом для выявления IgG анти AQP4 и может быть применен к клинической диагностики и научных исследований NMOSD.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Авторы не имеют ничего сообщать.
Acknowledgments
Авторы признательны за поддержку от субсидий из национального фонда науки Китая (№ 31600820), здравоохранения и планирования семьи Комиссии провинции Цзилинь (нет 2016Q036) и наука и технология планирования проекта из провинции Цзилинь (No. 20180520110JH).
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Anti-aquaporin-4 IIFT | Euroimmun | FA 1128-2005-50 | Contains biochip slides coated with AQP4-M1 transfected and untransfected EU 90 cells, fluorescein-labelled anti-human IgG, anti-AQP4 antibody as positive control, antibody negative sample, salt for PBS pH 7.2, Tween 20 and embedding medium. |
| CellSens Dimension | OLYMPUS | N/A | photograph software |
| Gel & clot activator tube | Improve medical | 623040202 | From a local Chinese company |
References
- Zekeridou, A., Lennon, V. A.
- Ho, J. D., et al. Crystal structure of human aquaporin 4 at 1.8 A and its mechanism of conductance. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 106 (18), 7437-7442 (2009).
- Takeshita, Y., et al. Effects of neuromyelitis optica-IgG at the blood-brain barrier in vitro. in vitro.Neurology Neuroimmunology & Neuroinflammation. 4 (1), 311 (2016).
- Sato, D. K., et al. Distinction between MOG antibody-positive and AQP4 antibody-positive NMO spectrum disorders. Neurology. 82 (6), 474-481 (2014).
- Wingerchuk, D. M., et al. International consensus diagnostic criteria for neuromyelitis optica spectrum disorders. Neurology. 85 (2), 177-189 (2015).
- Ruiz-Gaviria, R., et al. Specificity and sensitivity of aquaporin 4 antibody detection tests in patients with neuromyelitis optica: A meta-analysis. Multiple Sclerosis and Related Disorders. 4 (4), 345-349 (2015).
- Waters, P., et al. Multicentre comparison of a diagnostic assay: aquaporin-4 antibodies in neuromyelitis optica. Journal of Neurology, Neurosurgery, and Psychiatry. 87 (9), 1005-1015 (2016).
- Fryer, J. P., et al. AQP4 autoantibody assay performance in clinical laboratory service. Neurology Neuroimmunology & Neuroinflammation. 1 (1), 11 (2014).
- Long, Y., et al. Aquaporin-4 antibody in neuromyelitis optica: re-testing study in a large population from China. The International Journal of Neuroscience. 127 (9), 790-799 (2017).
- Pisani, F., et al. Aquaporin-4 autoantibodies in Neuromyelitis Optica: AQP4 isoform-dependent sensitivity and specificity. PloS One. 8 (11), 79185 (2013).
- Jarius, S., et al. Aquaporin-4 antibody testing: direct comparison of M1-AQP4-DNA-transfected cells with leaky scanning versus M23-AQP4-DNA-transfected cells as antigenic substrate. Journal of Neuroinflammation. 11, 129 (2014).
- Juryńczyk, M., Craner, M., Palace, J. Overlapping CNS inflammatory diseases: differentiating features of NMO and MS. Journal of Neurology, Neurosurgery, and Psychiatry. 86 (1), 20-25 (2015).
- Chen, H., et al. Clinical Features of Patients with Multiple Sclerosis and Neuromyelitis Optica Spectrum Disorders. Chinese Medical Journal. 129 (17), 2079-2084 (2016).
- Majed, M., Fryer, J. P., McKeon, A., Lennon, V. A., Pittock, S. J. Clinical utility of testing AQP4-IgG in CSF: Guidance for physicians. Neurology Neuroimmunology & Neuroinflammation. 3 (3), 231 (2016).
- Jarius, S., et al. Cerebrospinal fluid antibodies to aquaporin-4 in neuromyelitis optica and related disorders: frequency, origin, and diagnostic relevance. Journal of Neuroinflammation. 7, 52 (2010).
- Asgari, N., et al. Disruption of the leptomeningeal blood barrier in neuromyelitis optica spectrum disorder. Neurology Neuroimmunology & Neuroinflammation. 4 (4), 343 (2017).
- Kim, H. J., et al. MRI characteristics of neuromyelitis optica spectrum disorder: an international update. Neurology. 84 (11), 1165-1173 (2015).
- Jarius, S., et al. MOG encephalomyelitis: international recommendations on diagnosis and antibody testing. Journal of Neuroinflammation. 15 (1), 134 (2018).
- Narayan, R., et al. MOG antibody disease: A review of MOG antibody seropositive neuromyelitis optica spectrum disorder. Multiple Sclerosis and Related Disorders. 25, 66-72 (2018).
- Ogawa, R., et al. MOG antibody-positive, benign, unilateral, cerebral cortical encephalitis with epilepsy. Neurology Neuroimmunology & Neuroinflammation. 4 (2), 322 (2017).
- Valentino, P., Marnetto, F., Granieri, L., Capobianco, M., Bertolotto, A. Aquaporin-4 antibody titration in NMO patients treated with rituximab: A retrospective study. Neurology Neuroimmunology & Neuroinflammation. 4 (2), 317 (2016).
- Kessler, R. A., et al. Anti-aquaporin-4 titer is not predictive of disease course in neuromyelitis optica spectrum disorder: A multicenter cohort study. Multiple Sclerosis and Related Disorders. 17, 198-201 (2017).
- Mealy, M. A., et al. Aquaporin-4 serostatus does not predict response to immunotherapy in neuromyelitis optica spectrum disorders. Multiple Sclerosis. , (2017).
- Yang, Y., et al. The role of aquaporin-4 antibodies in Chinese patients with neuromyelitis optica. Journal of Clinical Neuroscience. 20 (1), 94-98 (2013).
- Kitley, J., et al. Prognostic factors and disease course in aquaporin-4 antibody-positive patients with neuromyelitis optica spectrum disorder from the United Kingdom and Japan. Brain. 135 (6), 1834-1849 (2012).
